Monoklonální protilátka - Monoclonal antibody

Obecná reprezentace metody použité k produkci monoklonálních protilátek.[1][2]

A monoklonální protilátka (mAb nebo moAb) je protilátka od klonování unikátní bílých krvinek. Všechny následující protilátky odvozené tímto způsobem se vracejí zpět k jedinečné rodičovské buňce.

Monoklonální protilátky mohou mít jednomocný afinita, vazba pouze na stejné epitop (součást antigen který je rozpoznáván protilátkou). V porovnání, polyklonální protilátky váží se na více epitopů a jsou obvykle vytvářeny několika různými sekretujícími protilátkami plazmatická buňka linie. Bispecifické monoklonální protilátky lze také připravit zvýšením terapeutických cílů jedné monoklonální protilátky na dva epitopy.

Je možné produkovat monoklonální protilátky, které se specificky vážou na prakticky jakoukoli vhodnou látku; pak mohou sloužit k jeho detekci nebo očištění. Tato schopnost se stala důležitým nástrojem v systému Windows biochemie, molekulární biologie, a lék.

Dějiny

Role, kterou monoklonální protilátky předpokládají, byla poprvé předpokládána počátkem 20. století imunolog Paul Ehrlich, který navrhl myšlenku lékařské Zauberkugel„a“Kouzelná kulka ". Jednalo by se o sloučeninu, která by mohla být vyrobena k selektivnímu zacílení na organismus způsobující onemocnění, což by umožnilo dodávat toxin pro tento organismus spolu s ním. On a Élie Metchnikoff obdržel 1908 Nobelova cena za fyziologii nebo medicínu pro tuto práci.

V 70. letech rakovina B-buněk mnohočetný myelom byl známý. Bylo zřejmé, že všechny tyto rakovinné B-buňky produkují jediný typ protilátky (a paraprotein ). To bylo použito ke studiu struktury protilátek, ale dosud nebylo možné produkovat identické protilátky specifické pro daný typ antigen.[3]:324

Produkce monoklonálních protilátek zahrnujících hybridní buňky člověk-myš byla poprvé popsána autorem Jerrold Schwaber v roce 1973.[4] Tato práce je i nadále široce citována mezi těmi, kteří používají lidský původ hybridomy.[5]

V roce 1975 Georges Köhler a César Milstein se podařilo vytvořit fúze buněčných linií myelomu s B buňky vytvořit hybridomy které by mohly produkovat protilátky specifické pro známé antigeny a které byly zvěčněny.[6] Oni a Niels Kaj Jerne sdílel Nobelova cena za fyziologii nebo medicínu v roce 1984 za objev.[6]

V roce 1988 Greg Winter a jeho tým propagoval techniky humanizovat monoklonální protilátky,[7] eliminace reakcí, které u některých pacientů způsobovaly mnohé monoklonální protilátky.

V roce 2018 James P. Allison a Tasuku Honjo obdrželi Nobelovu cenu za fyziologii nebo medicínu za objev léčby rakoviny inhibicí negativní imunitní regulace pomocí monoklonálních protilátek, které zabraňují inhibičním vazbám.[8]

Výroba

Vědci zkoumající sklíčka kultur buněk, které vytvářejí monoklonální protilátky. Jsou pěstovány v laboratoři a vědci analyzují produkty, aby vybrali ty nejslibnější z nich.
Monoklonální protilátky lze pěstovat v neomezeném množství v lahvích zobrazených na tomto obrázku.
Technik ruční plnění studní kapalinou pro výzkumný test. Tento test zahrnuje přípravu kultur, ve kterých jsou hybridy pěstovány ve velkém množství za vzniku požadované protilátky. To se provádí fúzí myelom buňka a myš lymfocytů k vytvoření hybridní buňky (hybridom ).
Laboratorní technik koupající připravené diapozitivy v roztoku. Tento technik připravuje podložní sklíčka monoklonálních protilátek pro výzkumné pracovníky. Zobrazené buňky označují člověka rakovina prsu.

Vývoj hybridomů

Další informace: Technologie hybridomů

Velká část práce, která stojí za produkcí monoklonálních protilátek, má kořeny v produkci hybridomů, která zahrnuje identifikaci antigen-specifických plazmatických / plazmablastových buněk (ASPC), které produkují protilátky specifické pro požadovaný antigen a fixační tyto buňky s myelom buňky.[6] Králičí B-buňky lze použít k vytvoření a hybridom králíka. Polyethylenglykol se používá k fúzi sousedních plazmatických membrán,[9] ale úspěšnost je nízká, proto se používá selektivní médium, ve kterém mohou růst pouze fúzované buňky. To je možné, protože myelomové buňky ztratily schopnost syntetizovat hypoxanthin-guanin-fosforibosyl transferáza (HGPRT), enzym nezbytný pro záchranná syntéza nukleových kyselin. Absence HGPRT není pro tyto buňky problémem, pokud de novo syntéza purinů cesta je také narušena. Vystavení buněk aminopterin (A kyselina listová analog, který inhibuje dihydrofolát reduktáza, DHFR), znemožňuje jim využívat cestu de novo a plně se stát auxotrofní pro nukleové kyseliny, což vyžaduje přežití, aby přežilo.

Volá se selektivní kultivační médium HAT médium protože obsahuje hypoxanthin, aminopterin a thymidin. Toto médium je selektivní pro kondenzované (hybridom ) buňky. Nespojené myelomové buňky nemohou růst, protože jim chybí HGPRT, a proto nemohou replikovat svou DNA. Fúzované buňky sleziny nemohou růst do nekonečna kvůli své omezené délce života. Pouze fúzované hybridní buňky označované jako hybridomy jsou schopny růst v médiu neomezeně dlouho, protože partner slezinných buněk dodává HGPRT a myelomový partner má vlastnosti, díky nimž je nesmrtelný (podobně jako rakovinová buňka).

Tato směs buněk se poté zředí a klony se pěstují z jednotlivých rodičovských buněk na mikrotitračních jamkách. Protilátky vylučované různými klony se poté testují na schopnost vázat se na antigen (testem, jako je ELISA nebo Antigen Microarray Assay) nebo imuno-dot blot. Poté je vybrán nejproduktivnější a nejstabilnější klon pro budoucí použití.

Hybridomy lze pěstovat neurčitě ve vhodném kultivačním médiu pro buňky. Mohou být také injikovány myším (v peritoneální dutiny, obklopující střevo). Tam produkují nádory vylučující tzv. Tekutinu bohatou na protilátky ascites tekutina.

Během toho musí být médium obohaceno in vitro výběr k dalšímu zvýhodnění růstu hybridomů. Toho lze dosáhnout použitím vrstvy výživných buněk fibrocytů nebo doplňkového média, jako je briclon. Lze použít kultivační médium upravené makrofágy. Produkce v buněčné kultuře je obvykle upřednostňována, protože technika ascitu je pro zvíře bolestivá. Tam, kde existují alternativní techniky, se uvažuje o ascitu neetický.[10]

Nová technologie vývoje mAb

Nedávno bylo vyvinuto několik technologií monoklonálních protilátek,[11] jako fágový displej,[12] kultura jedné B buňky,[13] amplifikace jedné buňky z různých populací B buněk[14][15][16][17][18] a technologie dotazování jednotlivých plazmatických buněk. Na rozdíl od tradiční technologie hybridomů používají novější technologie techniky molekulární biologie k amplifikaci těžkých a lehkých řetězců genů protilátek pomocí PCR a produkci buď v bakteriálních nebo savčích systémech s rekombinantní technologie. Jedna z výhod nových technologií je použitelná na více zvířat, jako jsou králíci, lamy, kuřata a další běžná experimentální zvířata v laboratoři.

Čištění

Po získání vzorku média kultivovaných hybridomů nebo vzorku tekutiny z ascitu musí být požadované protilátky extrahovány. Kontaminanty vzorku buněčné kultury sestávají primárně ze složek média, jako jsou růstové faktory, hormony a transferriny. Naproti tomu in vivo vzorek pravděpodobně bude mít hostitelské protilátky, proteázy, nukleázy, nukleové kyseliny a viry. V obou případech došlo k dalšímu vylučování hybridomů, jako je cytokiny může být přítomen. Může také dojít ke bakteriální kontaminaci a v důsledku toho endotoxiny které jsou vylučovány bakteriemi. V závislosti na složitosti média požadovaného v buněčné kultuře a tedy na kontaminujících látkách, jedna nebo druhá metoda (in vivo nebo in vitro) může být výhodnější.

Vzorek je nejprve upraven nebo připraven k čištění. Buňky, buněčné zbytky, lipidy a sražený materiál se nejdříve odstraní, obvykle centrifugací a poté filtrace s 0,45 µm filtrem. Tyto velké částice mohou způsobit jev zvaný znečištění membrány v pozdějších krocích čištění. Kromě toho nemusí být koncentrace produktu ve vzorku dostatečná, zejména v případech, kdy je požadovaná protilátka produkována buněčnou linií s nízkou sekrecí. Vzorek se proto koncentruje do ultrafiltrace nebo dialýza.

Většina nabitých nečistot je obvykle anionty jako jsou nukleové kyseliny a endotoxiny. Ty lze oddělit pomocí iontoměničová chromatografie.[19] Buď kation výměna chromatografie se používá na dostatečně nízké úrovni pH že požadovaná protilátka se váže na kolonu, zatímco protékají anionty, nebo aniontoměničová chromatografie se používá při dostatečně vysokém pH, aby požadovaná protilátka protékala kolonou, zatímco se na ni váže anionty. Různé proteiny lze také oddělit spolu s anionty na základě jejich izoelektrický bod (pI). V proteinech je izoelektrický bod (pl) definován jako pH, při kterém protein nemá žádný čistý náboj. Když pH> pI, protein má čistý záporný náboj, a když pH albumin má pí 4,8, což je významně nižší hodnota než u většiny monoklonálních protilátek, které mají pí 6,1. Při pH mezi 4,8 a 6,1 je tedy průměrný náboj molekul albuminu pravděpodobně zápornější, zatímco molekuly mAb jsou kladně nabité, a proto je možné je oddělit. Transferrin má na druhé straně pí 5,9, takže jej nelze touto metodou snadno oddělit. Pro dobrou separaci je nutný rozdíl v pI alespoň 1.

Transferrin lze místo toho odstranit pomocí vylučovací chromatografie. Tato metoda je jednou z nejspolehlivějších chromatografických technik. Jelikož máme co do činění s proteiny, vlastnosti jako náboj a afinita nejsou konzistentní a mění se s pH, protože molekuly jsou protonované a deprotonované, zatímco velikost zůstává relativně konstantní. Má však nevýhody, jako je nízké rozlišení, nízká kapacita a nízká eluce krát.

Mnohem rychlejší je jednostupňová metoda oddělení protein A / G afinitní chromatografie. Protilátka se selektivně váže na protein A / G, takže je dosaženo vysoké úrovně čistoty (obvykle> 80%). Tato metoda však může být problematická pro protilátky, které se snadno poškodí, protože se obecně používají drsné podmínky. Nízké pH může rozbít vazby a odstranit protilátku z kolony. Kromě možného ovlivnění produktu může nízké pH způsobit únik samotného proteinu A / G z kolony a objevit se v eluovaném vzorku. K dispozici jsou jemné pufrovací systémy, které používají vysoké koncentrace solí, aby se zabránilo vystavení citlivých protilátek nízkému pH. Cena je u této metody také důležitým hlediskem, protože imobilizovaný protein A / G je dražší pryskyřice.

K dosažení maximální čistoty v jediném kroku lze provést afinitní čištění s použitím antigenu k zajištění specificity pro protilátku. V této metodě je antigen použitý k vytvoření protilátky kovalentně připojen k agaróza Podpěra, podpora. Pokud je antigen a peptid, je běžně syntetizován pomocí terminálu cystein, který umožňuje selektivní připojení k nosnému proteinu, jako je KLH během vývoje a na podporu čištění. Médium obsahující protilátku se poté inkubuje s imobilizovaným antigenem, a to buď v dávce, nebo když protilátka prochází kolonou, kde se selektivně váže a může být zadržena, zatímco jsou nečistoty odplaveny. Eluce pufrem s nízkým pH nebo jemnějším pufrem s vysokou solí se poté použije k izolaci purifikované protilátky z nosiče.

Heterogenita protilátek

Heterogenita produktu je běžná u monoklonálních protilátek a dalších rekombinantních biologických produktů a obvykle se zavádí buď proti proudu během exprese, nebo směrem dolů během výroby.[Citace je zapotřebí ]

Tyto varianty jsou obvykle agregáty, deamidace produkty, glykosylace varianty, oxidované aminokyselinové postranní řetězce, stejně jako aminokyselinové a karboxylové koncové aminokyselinové přísady.[20] Tyto zdánlivě nepatrné strukturální změny mohou ovlivnit preklinickou stabilitu a optimalizaci procesu i účinnost terapeutického produktu, biologická dostupnost a imunogenicita. Obecně přijímaná metoda čištění procesních proudů pro monoklonální protilátky zahrnuje zachycení cíle produktu pomocí protein A, eluce, okyselení k inaktivaci potenciálních savčích virů, následovaná iontová chromatografie, nejprve s anion korálky a poté s kationtovými kuličkami.[Citace je zapotřebí ]

Vytěsňovací chromatografie byl použit k identifikaci a charakterizaci těchto často neviditelných variant v množstvích, která jsou vhodná pro následné preklinické režimy hodnocení, jako je zvíře farmakokinetické studie.[21][22] Znalosti získané během předklinické vývojové fáze jsou zásadní pro lepší pochopení kvality produktu a poskytují základ pro řízení rizik a vyšší regulační flexibilitu. Nedávný úřad pro kontrolu potravin a léčiv Kvalita podle návrhu iniciativa se pokouší poskytnout vodítko pro vývoj a usnadnit návrh produktů a procesů, které maximalizují účinnost a bezpečnostní profil a zároveň zvyšují vyrobitelnost produktu.[23]

Rekombinantní

Výroba rekombinantní monoklonální protilátky zahrnují repertoár klonování, CRISPR / Cas9 nebo fágový displej /kvasnicový displej technologie.[24] Rekombinantní protilátkové inženýrství zahrnuje produkci protilátek pomocí viry nebo droždí, spíše než myši. Tyto techniky se spoléhají na rychlé klonování segmentů genů imunoglobulinu k vytvoření knihoven protilátek s mírně odlišnými aminokyselina sekvence, ze kterých lze vybrat protilátky s požadovanými specificitami.[25] Knihovny fágových protilátek jsou variantou knihoven fágových antigenů.[26] Tyto techniky lze použít ke zvýšení specificity, s jakou protilátky rozpoznávají antigeny, jejich stability v různých podmínkách prostředí, jejich terapeutické účinnosti a jejich detekovatelnosti v diagnostických aplikacích.[27] K výrobě protilátek ve velkém měřítku byly použity fermentační komory.

Chimérické protilátky

Hlavní článek: Chimérické protilátky

Zatímco myší a lidské protilátky jsou strukturně podobné, rozdíly mezi nimi byly dostatečné k vyvolání imunitní reakce, když myší monoklonální protilátky byly injekčně podány člověku, což mělo za následek jejich rychlé odstranění z krve, stejně jako systémové zánětlivé účinky a produkci lidské anti-myší protilátky (HAMA).

Rekombinantní DNA byla zkoumána od konce 80. let za účelem prodloužení doby pobytu. V jednom přístupu byla myší DNA kódující vazebnou část monoklonální protilátky sloučena s DNA produkující lidské protilátky v živých buňkách. Vyjádření tohoto "chimérický „nebo„ humanizovaná “DNA prostřednictvím buněčná kultura poskytly částečně myší, částečně lidské protilátky.[28][29]

Lidské protilátky

Byly vyvinuty přístupy k izolaci lidských monoklonálních protilátek[11]

Od objevu, že by mohly být generovány monoklonální protilátky, se vědci zaměřili na tvorbu plně lidské produkty ke snížení vedlejších účinků humanizovaných nebo chimérických protilátek. Bylo identifikováno několik úspěšných přístupů: transgenní myši,[30] fágový displej[12] a klonování jednotlivých B buněk:[11]

V listopadu 2016 třináct z devatenácti plně terapeutika lidských monoklonálních protilátek na trhu byla odvozena z technologie transgenních myší.

Mezi přijímající organizace, které uvádějí na trh transgenní technologie, patří:

  • Medarex - která uvedla na trh platformu UltiMab. Společnost Medarex získala v červenci 2009 společnost Bristol Myers Squibb[31]
  • Abgenix - který prodával technologii Xenomouse. Společnost Abgenix získala v dubnu 2006 společnost Amgen.[32]
  • Regeneron Pharmaceuticals Technologie VelocImmune.[33]
  • Kymab - kteří prodávají své technologie Kymouse.[34]
  • Otevřete platformu OmniRat ™ a OmniMouse ™ od Monoclonal Technology.[35]
  • TRIANNI, Inc.. - kdo prodává své TRIANNI Myší platforma.[36]
  • Ablexis, LLC - kteří prodávají svou platformu AlivaMab Mouse.[37]

Fágový displej lze použít k expresi variabilních domén protilátek na vláknitých fágových obalových proteinech (Fágový hlavní obalový protein ).[38][39][40] Tyto protilátky fágového displeje lze použít pro různé výzkumné aplikace.[41][42] ProAb byl oznámen v prosinci 1997[43] a zahrnoval vysoce výkonný screening protilátkových knihoven proti nemocné a nemocné tkáni, zatímco Proximol použil enzymatickou reakci volných radikálů k označení molekul v blízkosti daného proteinu.[44][45]

K léčbě byly schváleny monoklonální protilátky rakovina, kardiovaskulární onemocnění, zánětlivá onemocnění, makulární degenerace, odmítnutí transplantátu, roztroušená skleróza a virová infekce.

V srpnu 2006 Farmaceutický výzkum a výrobci v Americe uvádí, že americké společnosti měly v klinických studiích 160 různých monoklonálních protilátek nebo čekají na schválení ze strany Úřad pro kontrolu potravin a léčiv.[46]

Náklady

Výroba monoklonálních protilátek je nákladnější než výroba malých molekul kvůli složitým procesům a obecné velikosti molekul, to vše navíc k enormním nákladům na výzkum a vývoj, které přináší pacientům novou chemickou entitu. Jejich ceny umožňují výrobcům získat zpět obvykle vysoké investiční náklady a tam, kde neexistují žádné cenové kontroly, jako jsou například Spojené státy, mohou být ceny vyšší, pokud poskytují velkou hodnotu. Sedm University of Pittsburgh vědci dospěli k závěru: „Roční cena terapií mAb je v onkologii a hematologii přibližně o 100 000 USD vyšší než v jiných chorobných stavech,“ srovnávají je na jednoho pacienta s cenami za kardiovaskulární nebo metabolické poruchy, imunologii, infekční onemocnění, alergie a oftalmologii .[47]

Aplikace

Diagnostické testy

Jakmile jsou pro danou látku vytvořeny monoklonální protilátky, lze je použít k detekci přítomnosti této látky. Proteiny lze detekovat pomocí Western blot a imuno dot blot testy. v imunohistochemie, monoklonální protilátky lze použít k detekci antigenů ve fixovaných tkáňových řezech a podobně, imunofluorescence lze použít k detekci látky buď v části zmrazené tkáně, nebo v živých buňkách.

Analytické a chemické použití

Protilátky lze také použít k čištění jejich cílových sloučenin ze směsí pomocí způsobu podle imunoprecipitace.

Terapeutické použití

Hlavní článek: Terapie monoklonálními protilátkami

Terapeutické monoklonální protilátky působí prostřednictvím mnoha mechanismů, jako je blokování funkcí cílených molekul, indukce apoptóza v buňkách, které exprimují cíl, nebo modulací signálních drah.[48][49]

Léčba rakoviny

Jedna možná léčba pro rakovina zahrnuje monoklonální protilátky, které se vážou pouze na specifické pro rakovinné buňky antigeny a vyvolat imunitní odpověď proti cílové rakovinové buňce. Takové mAb mohou být upraveny pro dodání a toxin, radioizotop, cytokin nebo jiný aktivní konjugát nebo navrhnout bispecifické protilátky které se mohou spojit s jejich Fab regiony jak do cílového antigenu, tak do konjugované nebo efektorové buňky. Každá intaktní protilátka se může vázat na buněčné receptory nebo jiné proteiny Fc region.

Monoklonální protilátky proti rakovině. ADEPT, protilátková enzymová proléčiva; ADCC: na buňkách zprostředkovaná cytotoxicita závislá na protilátkách; CDC: cytotoxicita závislá na komplementu; MAb: monoklonální protilátka; scFv, jednořetězcový Fv fragment.[50]

MAbs schválené FDA pro rakovinu zahrnují:[51]

Autoimunitní onemocnění

Monoklonální protilátky používané pro autoimunitní onemocnění zahrnout infliximab a adalimumab, které jsou účinné v revmatoidní artritida, Crohnova nemoc, ulcerózní kolitida a ankylozující spondylitida jejich schopností vázat se a inhibovat TNF-α.[52] Basiliximab a daclizumab inhibovat IL-2 při aktivaci T buňky a tím pomáhat předcházet akutní odmítnutí transplantací ledvin.[52] Omalizumab inhibuje člověka imunoglobulin E (IgE) a je užitečný při léčbě středně těžké až těžké alergie astma.

Příklady terapeutických monoklonálních protilátek

Pro podrobnější seznam viz Seznam monoklonálních protilátek.

Monoklonální protilátky pro výzkumné aplikace lze najít přímo od dodavatelů protilátek nebo pomocí speciálního vyhledávače CiteAb. Níže jsou uvedeny příklady klinicky důležitých monoklonálních protilátek.

Hlavní kategorieTypaplikaceMechanismus / cílRežim
Proti-
zánětlivé		infliximab[52]inhibuje TNF-αchimérický
adalimumabinhibuje TNF-αčlověk
basiliximab[52]inhibuje IL-2 na aktivováno T buňkychimérický
daclizumab[52]inhibuje IL-2 při aktivaci T buňkyzlidštění
omalizumab
  • středně těžký až těžký alergik astma
inhibuje člověka imunoglobulin E (IgE)zlidštění
Protirakovinnégemtuzumab[52]cílí na povrchový antigen myeloidních buněk CD33 na leukémie buňkyzlidštění
alemtuzumab[52]zacílí na antigen CD52 na T- a B-lymfocytyzlidštění
rituximab[52]cílí na fosfoprotein CD20 na B lymfocytychimérický
trastuzumabzaměřuje se na HER2 / neu (erbB2) receptorzlidštění
nimotuzumabEGFR inhibitorzlidštění
cetuximabEGFR inhibitorchimérický
bevacizumab & ranibizumabinhibuje VEGFzlidštění
Protirakovinné a antivirovébavituximab[53]imunoterapie, cíle fosfatidylserin[53]chimérický
jinýpalivizumab[52]
  • RSV infekce u dětí
inhibuje RSV fúzní protein (F)zlidštění
abciximab[52]inhibuje receptor GpIIb / IIIa na krevní destičkychimérický

Vedlejší efekty

Několik monoklonálních protilátek, jako např Bevacizumab a Cetuximab, může způsobit různé druhy vedlejších účinků.[54] Tyto nežádoucí účinky lze rozdělit na běžné a závažné nežádoucí účinky.[55]

Mezi časté nežádoucí účinky patří:

  • Závrať
  • Bolesti hlavy
  • Alergie
  • Průjem
  • Kašel
  • Horečka
  • Svědění
  • Bolesti zad
  • Obecná slabost
  • Ztráta chuti k jídlu
  • Nespavost
  • Zácpa[56]

Mezi možné závažné nežádoucí účinky patří:

Viz také

Reference

  1. ^ „Metabolismus léků a karcinogenů zprostředkovaných cytochromem P450 pomocí monoklonálních protilátek“. home.ccr.cancer.gov. Citováno 2018-04-02.
  2. ^ Gelboin HV, Krausz KW, Gonzalez FJ, Yang TJ (listopad 1999). „Inhibiční monoklonální protilátky proti lidským enzymům cytochromu P450: nová cesta k objevu léčiv“. Trendy ve farmakologických vědách. 20 (11): 432–8. doi:10.1016 / S0165-6147 (99) 01382-6. PMID  10542439.
  3. ^ Tansey EM, Catterall PP (červenec 1994). „Monoklonální protilátky: seminář svědků v současné lékařské historii“. Zdravotní historie. 38 (3): 322–7. doi:10.1017 / s0025727300036632. PMC  1036884. PMID  7934322.
  4. ^ Schwaber J, Cohen EP (srpen 1973). "Hybridní klon lidské x myší somatické buňky vylučující imunoglobuliny obou rodičovských typů". Příroda. 244 (5416): 444–7. doi:10.1038 / 244444a0. PMID  4200460. S2CID  4171375.
  5. ^ Cambrosio A, Keating P (1992). „Mezi skutečností a technikou: počátky technologie hybridomů“. Journal of the History of Biology. 25 (2): 175–230. doi:10.1007 / BF00162840. PMID  11623041. S2CID  45615711.
  6. ^ A b C Marks, LV. „Příběh Césara Milsteina a monoklonálních protilátek“. WhatisBiotechnology.org. Citováno 23. září 2020.
  7. ^ Riechmann L, Clark M, Waldmann H, Winter G (březen 1988). "Přetváření lidských protilátek pro terapii". Příroda. 332 (6162): 323–7. Bibcode:1988Natur.332..323R. doi:10.1038 / 332323a0. PMID  3127726. S2CID  4335569.
  8. ^ Altmann DM (listopad 2018). „Činnost hodná Nobelovy ceny: imunologie rakoviny a využití imunity vůči nádorovým neoantigenům“. Imunologie. 155 (3): 283–284. doi:10.1111 / imm.13008. PMC  6187215. PMID  30320408.
  9. ^ Yang J1, Shen MH. Buněčná fúze zprostředkovaná polyethylenglykolem. Methods Mol Biol. 2006; 325: 59-66.
  10. ^ Výbor pro metody výroby monoklonálních protilátek Národní rady pro výzkum (USA). Doporučení 1: Shrnutí: Výroba monoklonálních protilátek. Washington (DC): National Academies Press (USA); 1999. ISBN  978-0-309-07511-4
  11. ^ A b C Ho M (červen 2018). „Úvodní článek: Hledání kouzelných kulek“. Protilátková terapeutika. 1 (1): 1–5. doi:10.1093 / abt / tby001. PMC  6086361. PMID  30101214.
  12. ^ A b Ho M, Feng M, Fisher RJ, Rader C, Pastan I (květen 2011). „Nová vysoce afinní lidská monoklonální protilátka proti mezotelinu“. International Journal of Cancer. 128 (9): 2020–30. doi:10.1002 / ijc.25557. PMC  2978266. PMID  20635390.
  13. ^ Seeber S, Ros F, Thorey I, Tiefenthaler G, Kaluza K, Lifke V a kol. (2014). „Robustní vysoce výkonná platforma pro generování funkčních rekombinantních monoklonálních protilátek pomocí králičích B buněk z periferní krve“. PLOS ONE. 9 (2): e86184. Bibcode:2014PLoSO ... 986184S. doi:10.1371 / journal.pone.0086184. PMC  3913575. PMID  24503933.
  14. ^ Wardemann H, Yurasov S, Schaefer A, Young JW, Meffre E, Nussenzweig MC (září 2003). "Převládající produkce autoprotilátek časnými prekurzory lidských B buněk". Věda. 301 (5638): 1374–7. Bibcode:2003Sci ... 301.1374W. doi:10.1126 / science.1086907. PMID  12920303. S2CID  43459065.
  15. ^ Koelsch K, Zheng NY, Zhang Q, Duty A, Helms C, Mathias MD a kol. (Červen 2007). „Třída zralých B buněk přepnutá na IgD jsou u zdravých jedinců autoreaktivní“. The Journal of Clinical Investigation. 117 (6): 1558–65. doi:10,1172 / JCI27628. PMC  1866247. PMID  17510706.
  16. ^ Smith K, Garman L, Wrammert J, Zheng NY, Capra JD, Ahmed R, Wilson PC (01.01.2009). „Rychlá tvorba plně lidských monoklonálních protilátek specifických pro vakcinační antigen“. Přírodní protokoly. 4 (3): 372–84. doi:10.1038 / nprot.2009.3. PMC  2750034. PMID  19247287.
  17. ^ Duty JA, Szodoray P, Zheng NY, Koelsch KA, Zhang Q, Swiatkowski M a kol. (Leden 2009). „Funkční anergie v subpopulaci naivních B buněk od zdravých lidí, kteří exprimují autoreaktivní imunoglobulinové receptory“. The Journal of Experimental Medicine. 206 (1): 139–51. doi:10.1084 / jem.20080611. PMC  2626668. PMID  19103878.
  18. ^ Huang J, Doria-Rose NA, Longo NS, Laub L, Lin CL, Turk E a kol. (Říjen 2013). "Izolace lidských monoklonálních protilátek z B buněk periferní krve". Přírodní protokoly. 8 (10): 1907–15. doi:10.1038 / nprot.2013.117. PMC  4844175. PMID  24030440.
  19. ^ Vlasak J, Ionescu R (prosinec 2008). „Heterogenita monoklonálních protilátek odhalená metodami citlivými na náboj“. Současná farmaceutická biotechnologie. 9 (6): 468–81. doi:10.2174/138920108786786402. PMID  19075686.
  20. ^ Beck A, Wurch T, Bailly C, Corvaia N (květen 2010). „Strategie a výzvy pro novou generaci terapeutických protilátek“. Recenze přírody. Imunologie. 10 (5): 345–52. doi:10.1038 / nri2747. PMID  20414207. S2CID  29689097.
  21. ^ Khawli LA, Goswami S, Hutchinson R, Kwong ZW, Yang J, Wang X a kol. (2010). „Varianty náboje v IgG1: izolace, charakterizace, in vitro vazebné vlastnosti a farmakokinetika u potkanů“. mAb. 2 (6): 613–24. doi:10,4161 / mabs.2.6.13333. PMC  3011216. PMID  20818176.
  22. ^ Zhang T, Bourret J, Cano T (srpen 2011). "Izolace a charakterizace terapeutických variant náboje protilátky pomocí kationtové výměnné chromatografie". Journal of Chromatography A. 1218 (31): 5079–86. doi:10.1016 / j.chroma.2011.05.061. PMID  21700290.
  23. ^ Rathore AS, Winkle H (leden 2009). „Quality by design for biopharmaceuticals“. Přírodní biotechnologie. 27 (1): 26–34. doi:10.1038 / nbt0109-26. PMID  19131992. S2CID  5523554.
  24. ^ van der Schoot JM, Fennemann FL, Valente M, Dolen Y, Hagemans IM, Becker AM a kol. (Srpen 2019). „Funkční diverzifikace protilátek produkovaných hybridomy genomovým inženýrstvím CRISPR / HDR“. Vědecké zálohy. 5 (8): eaaw1822. doi:10.1126 / sciadv.aaw1822. PMC  6713500. PMID  31489367.
  25. ^ Siegel DL (leden 2002). "Technologie rekombinantní monoklonální protilátky". Transfusion Clinique et Biologique. 9 (1): 15–22. doi:10.1016 / S1246-7820 (01) 00210-5. PMID  11889896.
  26. ^ „Dr. George Pieczenik“. Absolventi LMB. MRC Laboratory of Molecular Biology (LMB). 17. září 2009. Archivovány od originál dne 23. prosince 2012. Citováno 17. listopadu 2012.
  27. ^ Schmitz U, Versmold A, Kaufmann P, Frank HG (2000). "Fágový displej: molekulární nástroj pro generování protilátek - přehled". Placenta. 21 Suppl A (Suppl A): S106-12. doi:10.1053 / plac.1999.0511. PMID  10831134.
  28. ^ Boulianne GL, Hozumi N, Shulman MJ (1984). "Produkce funkční chimérické myší / lidské protilátky". Příroda. 312 (5995): 643–6. doi:10.1038 / 312643a0. PMID  6095115. S2CID  4311503.
  29. ^ Chadd HE, Chamow SM (duben 2001). "Terapeutická technologie exprese protilátek". Aktuální názor na biotechnologie. 12 (2): 188–94. doi:10.1016 / S0958-1669 (00) 00198-1. PMID  11287236.
  30. ^ Lonberg N, Huszar D (1995). "Lidské protilátky z transgenních myší". Mezinárodní recenze imunologie. 13 (1): 65–93. doi:10.3109/08830189509061738. PMID  7494109.
  31. ^ „Bristol-Myers kupuje společnost Medarex Drugmaker za 2,4 miliardy dolarů (aktualizace 3)“.
  32. ^ „Společnost Amgen dokončuje akvizici společnosti Abgenix; Akvizice poskytuje společnosti Amgen plné vlastnictví panitumumabu a eliminuje licenční poplatky pro denosumab“.
  33. ^ „Archivovaná kopie“. Archivovány od originál 29. června 2009. Citováno 28. července 2009.CS1 maint: archivovaná kopie jako titul (odkaz)
  34. ^ „Proprietární protilátková platforma“. Archivovány od originál dne 03.02.2013. Citováno 2013-01-17.
  35. ^ „Přirozeně optimalizované lidské protilátky“.
  36. ^ „Proprietární protilátková platforma“.
  37. ^ „Proprietární protilátková platforma“.
  38. ^ McCafferty J, Griffiths AD, Winter G, Chiswell DJ (prosinec 1990). "Fágové protilátky: vláknitý fág zobrazující variabilní domény protilátky". Příroda. 348 (6301): 552–4. Bibcode:1990 Natur.348..552M. doi:10.1038 / 348552a0. PMID  2247164. S2CID  4258014.
  39. ^ Marks JD, Hoogenboom HR, Bonnert TP, McCafferty J, Griffiths AD, Winter G (prosinec 1991). "Obejití imunizace. Lidské protilátky z knihoven genů V zobrazené na fágu". Journal of Molecular Biology. 222 (3): 581–97. doi:10.1016 / 0022-2836 (91) 90498-U. PMID  1748994.
  40. ^ Carmen S, Jermutus L (červenec 2002). „Koncepty v zobrazení protilátkového fága“. Briefings in Functional Genomics & Proteomics. 1 (2): 189–203. doi:10.1093 / bfgp / 1.2.189. PMID  15239904.
  41. ^ Osbourn JK (2002). "Proximity naváděná (ProxiMol) výběr protilátek". Fágový displej protilátky. Methods Mol. Biol. 178. 201–5. doi:10.1385/1-59259-240-6:201. ISBN  978-1-59259-240-1. PMID  11968489.
  42. ^ Abeloff MD, Armitage JO, Niederhuber JE, Kastan MB, McKenna G (2008). "Terapeutické protilátky a imunologické konjugáty". Abeloffova klinická onkologie (4. vydání). Elsevier.
  43. ^ „Cambridge Antibody Technology“. Archivovány od originál dne 28. 9. 2011.
  44. ^ Osbourn JK, Derbyshire EJ, Vaughan TJ, Field AW, Johnson KS (leden 1998). "Pathfinder selection: in situ izolace nových protilátek". Imunotechnologie. 3 (4): 293–302. doi:10.1016 / S1380-2933 (97) 10007-0. PMID  9530562.
  45. ^ „Současný stav proteomické technologie“. Archivovány od originál dne 08.10.2011. Citováno 2009-07-28.
  46. ^ Zprávy PhRMA identifikují více než 400 biotechnologických léčivých přípravků ve vývoji. Pharmaceutical Technology, 24. srpna 2006. Citováno 2006-09-04.
  47. ^ Hernandez I, Bott SW, Patel AS, Wolf CG, Hospodar AR, Sampathkumar S, Shrank WH (únor 2018). „Cena léčby monoklonálními protilátkami: vyšší, pokud se používá pro rakovinu?“. The American Journal of Managed Care. 24 (2): 109–112. PMID  29461857.
  48. ^ Breedveld FC (Únor 2000). „Terapeutické monoklonální protilátky“. Lanceta. 355 (9205): 735–40. doi:10.1016 / S0140-6736 (00) 01034-5. PMID  10703815. S2CID  43781004.
  49. ^ Australský předepisující lékař (2006). „Terapie monoklonálními protilátkami na nezhoubné onemocnění“. Australský předepisovatel. 29 (5): 130–133. doi:10.18773 / austprescr.2006.079.
  50. ^ Upraveno z Carter P (listopad 2001). „Zlepšení účinnosti léčby rakoviny pomocí protilátek“. Recenze přírody. Rakovina. 1 (2): 118–29. doi:10.1038/35101072. PMID  11905803. S2CID  10169378.
  51. ^ Takimoto CH, Calvo E. (1. ledna 2005) "Principy onkologické farmakoterapie" v Pazdur R, Wagman LD, Camphausen KA, Hoskins WJ (Eds) Management rakoviny
  52. ^ A b C d E F G h i j Rang HP (2003). Farmakologie. Edinburgh: Churchill Livingstone. 241, pro příklady infliximab, basiliximab, abciximab, daclizumab, palivusamab, gemtuzumab, alemtuzumab a rituximab a mechanismus a režim. ISBN  978-0-443-07145-4.
  53. ^ A b Zaměstnanci, Adis Insight. Profil Bavituximab Poslední aktualizace 27. ledna 2016
  54. ^ "Monoklonální protilátky k léčbě rakoviny | Americká rakovinová společnost". www.cancer.org. Citováno 2018-04-19.
  55. ^ „Léky s monoklonálními protilátkami na rakovinu: Jak fungují“. Klinika Mayo. Citováno 2018-04-19.
  56. ^ A b „Monoklonální protilátky: seznam, typy, vedlejší účinky a použití FDA (rakovina)“. MedicineNet. Citováno 2018-04-19.

Další čtení

externí odkazy

Prostředky knihovny o
Monoklonální protilátka