Intrabody (protein) - Intrabody (protein) - Wikipedia

Pro další použití viz Intrabody.

v molekulární biologie, an uvnitř těla (zintracelulární a protilátka ) je protilátka, která se v buňce váže na intracelulární protein.[1] Kvůli nedostatku spolehlivého mechanismu pro přenos protilátek do živé buňky z extracelulárního prostředí to obvykle vyžaduje expresi protilátky v cílové buňce, čehož lze dosáhnout u transgenních zvířat[2] nebo genová terapie. Výsledkem je, že intrabody jsou definovány jako protilátky, které byly upraveny pro intracelulární lokalizaci, a tento termín se rychle začal používat, i když jsou protilátky produkovány v prokaryoty nebo jiné necílové buňky.[3] Tento výraz lze použít pro několik typů cílení na bílkoviny: protilátka může zůstat v cytoplazma, nebo může mít signál jaderné lokalizace,[4] nebo to může podstoupit kotranslační translokace přes membránu do lumenu endoplazmatické retikulum, za předpokladu, že je v tomto prostoru zadržen prostřednictvím a KDEL sekvence.[5]

Vzhledem k tomu, že přirozeně se vyskytující protilátky jsou optimalizovány tak, aby byly vylučovány z buňky, vyžadují cytosolické intraprotilátky speciální úpravy, včetně použití protilátek s jedním řetězcem (scFvs ), modifikace imunoglobulinových VL domén pro hyperstabilitu,[6] výběr protilátek rezistentních na více redukující cytosolické prostředí,[7] nebo exprese jako fúzní protein s protein vázající maltózu nebo jiné stabilní intracelulární proteiny.[8] Takové optimalizace zlepšily stabilitu a strukturu intrabody, což umožnilo zveřejnění řady slibných aplikací proti žloutenka typu B,[9] ptačí chřipka,[10] prion nemoci,[11] zánět,[12] Parkinsonova choroba,[13] a Huntingtonova choroba.[14] Optimalizace vyžadované pro cytosolické intrabody nejsou nutné pro ER zadržené intrabody, které se skládají v kompartmentu, ve kterém se přirozeně produkují protilátky. Od devadesátých let se ER protilátky používají v různých oblastech výzkumu k likvidaci membránových proteinů a sekretovaných proteinů. [15]


Reference

  1. ^ Chen, SY; Bagley, J; Marasco, WA (1994). "Intracelulární protilátky jako nová třída terapeutických molekul pro genovou terapii". Lidská genová terapie. 5 (5): 595–601. doi:10.1089 / hum.1994.5.5-595. PMID  7914435.
  2. ^ Marschall, AL; Single, FN; Schlarmann, K; Bosio, A; Strebe, N; van den Heuvel, J; Frenzel, A; Dübel, S (2014). „Funkční eliminace VCAM1 u myší zprostředkovaná endoplazmatickým retikulem zadrženým intrabody“. mAb. 6 (6): 1394–401. doi:10,4161 / mabs.34377. PMC  4622715. PMID  25484057.
  3. ^ Cohen, PA; Mani, JC; Lane, DP (1998). "Charakterizace nového nitrobuněčného těla namířeného proti N-koncové oblasti lidského p53". Onkogen. 17 (19): 2445–56. doi:10.1038 / sj.onc.1202190. PMID  9824155.
  4. ^ Mhashilkar, AM; Bagley, J; Chen, SY; Szilvay, AM; Helland, DG; Marasco, WA (1995). „Inhibice transaktivace LTR zprostředkované HIV-1 Tat a infekce HIV-1 anti-Tat jednoreťazcovými intrabody.“. Časopis EMBO. 14 (7): 1542–51. doi:10.1002 / j.1460-2075.1995.tb07140.x. PMC  398241. PMID  7537216.
  5. ^ Yurong Yang Wheeler; Timothy E. Kute; Mark C. Willingham; Si-Yi Chen; David C. Sane (2003). „Intrabody založené strategie pro inhibici receptoru 2 vaskulárního endoteliálního růstového faktoru: účinky na apoptózu, růst buněk a angiogenezi“. FASEB Journal. 17 (12): 1733–5. doi:10.1096 / fj.02-0942fje. PMID  12958192.
  6. ^ Cohen, PA; Mani, JC; Lane, DP (1998). "Charakterizace nového nitrobuněčného těla namířeného proti N-koncové oblasti lidského p53". Onkogen. 17 (19): 2445–56. doi:10.1038 / sj.onc.1202190. PMID  9824155.
  7. ^ Auf Der Maur, A; Escher, D; Barberis, A (2001). "Na antigenu nezávislá selekce stabilních intracelulárních jednořetězcových protilátek". FEBS Dopisy. 508 (3): 407–12. doi:10.1016 / S0014-5793 (01) 03101-5. PMID  11728462.
  8. ^ Shaki-Loewenstein, S; Zfania, R; Hyland, S; Wels, WS; Benhar, I (2005). "Univerzální strategie pro stabilní intracelulární protilátky". Journal of Immunological Methods. 303 (1–2): 19–39. doi:10.1016 / j.jim.2005.05.004. PMID  16045924.
  9. ^ Serruys, B; Van Houtte, F; Verbrugghe, P; Leroux-Roels, G; Vanlandschoot, P (2009). „Látky odvozené z jednodoménových intrabody, které inhibují sekreci virionů hepatitidy B u myší“. Hepatologie. 49 (1): 39–49. doi:10,1002 / hep. 22609. PMID  19085971.
  10. ^ Mukhtar, MM; Li, S; Li, W; Wan, T; Mu, Y; Wei, W; Kang, L; Rasool, ST; et al. (2009). „Jednořetězcové intracelulární protilátky inhibují replikaci viru chřipky narušením interakce proteinů zapojených do replikace a transkripce viru“. International Journal of Biochemistry & Cell Biology. 41 (3): 554–60. doi:10.1016 / j.biocel.2008.07.001. PMID  18687409.
  11. ^ Filesi, I; Cardinale, A; Mattei, S; Biocca, S (2007). "Selektivní přesměrování prionového proteinu na proteazomy a alterace jeho vezikulární sekrece zabraňují tvorbě PrP (Sc)." Journal of Neurochemistry. 101 (6): 1516–26. doi:10.1111 / j.1471-4159.2006.04439.x. PMID  17542810.
  12. ^ Strebe, N; Guse, A; Schüngel, M; Schirrmann, T; Hafner, M; Jostock, T; Hust, M; Müller, W; Dübel, S (2009). "Funkční blokování VCAM-1 na posttranslační úrovni s protilátkami zadrženými ER". Journal of Immunological Methods. 341 (1–2): 30–40. doi:10.1016 / j.jim.2008.10.012. PMID  19038261.
  13. ^ Zhou, C; Przedborski, S (2009). „Intrabody and Parkinson's disease“. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Molekulární základ choroby. 1792 (7): 634–42. doi:10.1016 / j.bbadis.2008.09.001. PMC  2745095. PMID  18834937.
  14. ^ Cardinale, A; Biocca, S (2008). "Potenciál intracelulárních protilátek pro terapeutické cílení na nemoci se špatně skládajícími se bílkovinami". Trendy v molekulární medicíně. 14 (9): 373–80. doi:10.1016 / j.molmed.2008.07.004. PMID  18693139.
  15. ^ Marschall, AL; Dübel, S; Böldicke, T (2015). „Specifické in vivo blokování funkce proteinu uvnitř těla“. mAb. 7 (6): 1010–35. doi:10.1080/19420862.2015.1076601. PMC  4966517. PMID  26252565.