Denaturace (biochemie) - Denaturation (biochemistry) - Wikipedia

Vliv teploty na enzym aktivita. Horní - zvyšující se teplota zvyšuje rychlost reakce (Koeficient Q10 ). Střední - podíl složeného a funkčního enzymu klesá nad jeho denaturační teplotu. Dno - tedy enzym je optimální rychlost reakce je při střední teplotě.
IUPAC definice
Proces částečné nebo úplné změny přirozených sekundárních a / nebo terciárních a / nebo kvartérních struktur proteinů nebo nukleových kyselin vedoucích ke ztrátě bioaktivita.

Poznámka 1: Upraveno z definice uvedené v ref.[1]

Poznámka 2: Denaturace může nastat, když jsou proteiny a nukleové kyseliny vystaveny zvýšené teplotě nebo extrémním hodnotám pH nebo nefyziologickým koncentracím solí, organických rozpouštědel, močoviny nebo jiných chemických látek.

Poznámka 3: An enzym ztrácí svou katalytickou aktivitu, když je denaturován.[2]

Denaturace je proces, ve kterém bílkoviny nebo nukleové kyseliny ztratit kvartérní struktura, terciární struktura, a sekundární struktura který je přítomen v jejich rodný stát, působením nějakého vnějšího stresu nebo sloučeniny, jako je silný kyselina nebo základna, koncentrovaný anorganické sůl, an organický rozpouštědlo (např. alkohol nebo chloroform ), záření nebo teplo.[3] Pokud jsou proteiny v živé buňce denaturovány, vede to k narušení buněčné aktivity a pravděpodobně k buněčné smrti. Denaturace bílkovin je také důsledkem buněčné smrti.[4][5] Denaturované proteiny mohou vykazovat širokou škálu charakteristik, od konformační změna a ztráta rozpustnosti do agregace kvůli expozici hydrofobní skupiny. Denaturované proteiny ztrácejí svoji 3D strukturu, a proto nemohou fungovat.

Skládání bílkovin je klíčem k tomu, zda a kulovitý nebo membránový protein může dělat svou práci správně; musí být složen do správného tvaru, aby fungoval. Nicméně, Vodíkové vazby, které hrají velkou roli při skládání, jsou poměrně slabé, a proto na ně snadno působí teplo, kyselost, různé koncentrace solí a další stresory, které mohou denaturovat protein. To je jeden z důvodů homeostáza je fyziologicky v mnoha nutné formy života.

Tento koncept nesouvisí s denaturovaný alkohol, což je alkohol, který byl smíchán s přísadami, aby byl nevhodný k lidské spotřebě.

Běžné příklady

(Nahoře) Protein albumin ve vaječné bíle podléhá denaturaci a ztrátě rozpustnosti, když se vejce vaří. (Dolní) kancelářské sponky poskytují vizuální analogii, která pomáhá s konceptualizací procesu denaturace.

Když se jídlo vaří, některé jeho proteiny se denaturují. Proto se vařená vejce stávají tvrdými a vařené maso pevnými.

Klasický příklad denaturace v bílkovinách pochází z vaječných bílků, které jsou obvykle z velké části vaječné albuminy ve vodě. Čerstvá vejce jsou průhledná a tekutá. Vaření tepelně nestabilní bílí je promění v neprůhledné a vytvoří vzájemně propojenou pevnou hmotu.[6] Stejnou transformaci lze provést s denaturační chemikálií. Nalití bílků do kádinky aceton změní také bílky na průsvitné a pevné. Kůže, která se tvoří sražený mléko je dalším běžným příkladem denaturovaného proteinu. Studený předkrm známý jako ceviche se připravuje chemickým „vařením“ syrových ryb a měkkýšů v kyselé citrusové marinádě bez ohně.[7]

Denaturace bílkovin

Denaturované proteiny mohou vykazovat širokou škálu charakteristik, od ztráty rozpustnost na agregace proteinů.

Funkční proteiny mají čtyři úrovně strukturní organizace:
1) Primární struktura: lineární struktura aminokyselin v polypeptidovém řetězci
2) Sekundární struktura: vodíkové vazby mezi řetězci peptidových skupin v alfa šroubovici nebo beta listu
3) Terciární struktura: trojrozměrná struktura skládaných alfa šroubovice a beta šroubovice
4) Kvartérní struktura: trojrozměrná struktura více polypeptidů a to, jak do sebe zapadají
Proces denaturace:
1) Funkční protein vykazující kvartérní strukturu
2) Když se aplikuje teplo, mění se intramolekulární vazby proteinu
3) Rozvíjení polypeptidů (aminokyselin)

Pozadí

Proteiny nebo Polypeptidy jsou polymery aminokyseliny. Protein je tvořen ribozomy ta „přečtená“ RNA, která je kódována kodony v genu a sestavte požadovanou kombinaci aminokyselin z genetický instrukce v procesu známém jako překlad. Nově vytvořený proteinový řetězec pak prochází posttranslační modifikace, ve kterém další atomy nebo molekuly jsou přidány například měď, zinek nebo žehlička. Jakmile je tento posttranslační modifikační proces dokončen, protein se začne skládat (někdy spontánně a někdy s enzymatický pomoc), stočil se na sebe hydrofobní prvky proteinu jsou pohřbeny hluboko uvnitř struktury a hydrofilní prvky končí na vnější straně. Konečný tvar proteinu určuje, jak interaguje s okolním prostředím.

Skládání proteinů spočívá v rovnováze mezi podstatným množstvím slabých intra-molekulárních interakcí uvnitř proteinu (hydrofobní, elektrostatické a Van Der Waalsovy interakce) a interakcemi protein-rozpouštědlo.[8] Výsledkem je, že tento proces je silně závislý na stavu prostředí, ve kterém protein sídlí.[8] Mezi tyto podmínky prostředí patří mimo jiné: teplota, slanost, tlak a použitá rozpouštědla.[8] V důsledku toho může jakékoli vystavení extrémnímu namáhání (např. Teplu nebo záření, vysokým koncentracím anorganických solí, silným kyselinám a zásadám) narušit interakci proteinu a nevyhnutelně vést k denaturaci.[9]

Když je protein denaturován, jsou změněny sekundární a terciární struktury, ale peptidové vazby primární struktury mezi aminokyselinami zůstávají nedotčeny. Jelikož všechny strukturní hladiny proteinu určují jeho funkci, protein již nemůže vykonávat svoji funkci, jakmile je denaturován. To je v rozporu s vnitřně nestrukturované proteiny, které jsou rozloženy v jejich rodný stát, ale stále funkčně aktivní a mají tendenci skládat se po navázání na svůj biologický cíl.[10]

Jak denaturace probíhá na úrovních struktury bílkovin

Viz také: Struktura bílkovin

Ztráta funkce

Většina biologických substrátů ztrácí svou biologickou funkci, když je denaturována. Například, enzymy ztratit jejich aktivita, protože se substráty již nemohou vázat na Aktivní stránky,[12] a protože aminokyselinové zbytky podílející se na stabilizaci substrátů přechodové stavy již nejsou v pozici, aby to mohli dělat. Proces denaturace a související ztrátu aktivity lze měřit pomocí technik, jako jsou duální polarizační interferometrie, CD, QCM-D a MP-SPR.

Ztráta aktivity v důsledku těžkých kovů a metaloidů

Zacílením na proteiny je známo, že těžké kovy narušují funkci a aktivitu prováděnou proteiny.[13] Je důležité si uvědomit, že těžké kovy spadají do kategorií sestávajících z přechodných kovů a vybraného množství metaloidu.[13] Tyto kovy mají při interakci s nativními složenými proteiny sklon bránit jejich biologické aktivitě.[13] Toto rušení lze provádět různými způsoby. Tyto těžké kovy mohou tvořit komplex s funkčními skupinami postranních řetězců přítomných v proteinu nebo vytvářet vazby k volným thiolům.[13] Těžké kovy také hrají roli při oxidaci postranních řetězců aminokyselin přítomných v proteinu.[13] Spolu s tím mohou při interakci s metaloproteiny těžké kovy dislokovat a nahradit klíčové ionty kovů.[13] Výsledkem je, že těžké kovy mohou interferovat se složenými proteiny, což může silně bránit stabilitě a aktivitě proteinu.

Reverzibilita a nevratnost

V mnoha případech je denaturace reverzibilní (proteiny mohou získat svůj původní stav, když je odstraněn vliv denaturace). Tento proces lze nazvat renaturací.[14] Toto porozumění vedlo k představě, že všechny informace potřebné k tomu, aby proteiny mohly převzít svůj nativní stav, byly zakódovány v primární struktuře proteinu, a tedy v DNA který kóduje protein, tzv. „Anfinsen termodynamická hypotéza ".[15]

Denaturace může být také nevratná. Tato nevratnost je obvykle kinetická, nikoli termodynamická nevratnost, protože obecně, když je protein složen, má nižší volnou energii. Díky kinetické ireverzibilitě může skutečnost, že se protein zasekl v místním minimu, zabránit tomu, aby se po opětovném denaturaci znovu skládal.[16]

Denaturace bílkovin v důsledku pH

Denaturace může být také způsobena změnami pH, které mohou ovlivnit chemii aminokyselin a jejich zbytků. Ionizovatelné skupiny v aminokyselinách jsou schopné ionizovat, když dojde ke změnám pH. Změna pH na kyselější nebo zásaditější podmínky může vyvolat vývoj.[17] Kyselinou vyvolané rozložení se často vyskytuje mezi pH 2 a 5, rozložení vyvolané bází obvykle vyžaduje pH 10 nebo vyšší.[17]

Denaturace nukleových kyselin

Hlavní článek: Termodynamika nukleových kyselin

Nukleové kyseliny (počítaje v to RNA a DNA ) jsou nukleotid polymery syntetizované polymerázové enzymy během obou transkripce nebo replikace DNA. Po 5'-3 'syntéze páteře jsou jednotlivé dusíkaté báze schopné vzájemné interakce prostřednictvím vodíkové vazby, což umožňuje tvorbu struktur vyššího řádu. K denaturaci nukleové kyseliny dochází, když je narušena vodíková vazba mezi nukleotidy, a vede k oddělení dříve žíhaný prameny. Například denaturace DNA v důsledku vysokých teplot má za následek narušení Watson a Crick páry bází a oddělení dvouvláknové šroubovice do dvou jednoduchých řetězců. Vlákna nukleové kyseliny jsou schopná opětného rozpadu, když „normální „podmínky jsou obnoveny, ale pokud dojde k obnově příliš rychle, mohou se řetězce nukleové kyseliny nedokonale znovu žíhat, což povede k nesprávnému spárování bází.

Biologicky indukovaná denaturace

K denaturaci DNA dochází, když jsou narušeny vodíkové vazby mezi páry bází Watson a Crick.

The nekovalentní interakce mezi antiparalelní prameny v DNA lze rozbít za účelem "otevření" dvojitá spirála když biologicky důležité mechanismy, jako je replikace DNA, transkripce, Oprava DNA nebo k vazbě na protein.[18] Oblast částečně oddělené DNA je známá jako denaturační bublina, kterou lze konkrétněji definovat jako otevření dvojité šroubovice DNA prostřednictvím koordinované separace párů bází.[18]

První model, který se pokusil popsat termodynamika denaturační bubliny byla zavedena v roce 1966 a nazývá se Polsko-Scheragův model. Tento model popisuje denaturaci řetězců DNA jako funkci teplota. Jak teplota stoupá, vodíkové vazby mezi páry bází Watson a Crick jsou stále více narušovány a začínají se vytvářet „denaturované smyčky“.[19] Model Polsko-Scheraga je však nyní považován za základní, protože nezohledňuje matoucí důsledky Sekvence DNA, chemické složení, ztuhlost a kroucení.[20]

Nedávné termodynamické studie odvodily, že životnost singulární denaturační bubliny se pohybuje od 1 mikrosekundy do 1 milisekundy.[21] Tyto informace jsou založeny na stanovených časových rámcích replikace a transkripce DNA.[21] V současné době,[když? ] provádějí se biofyzikální a biochemické výzkumné studie k úplnějšímu objasnění termodynamických detailů denaturační bubliny.[21]

Denaturace v důsledku chemických látek

Formamid denaturuje DNA narušením vodíkových vazeb mezi páry bází Watson a Crick. Oranžové, modré, zelené a fialové čáry představují adenin, thymin, guanin a cytosin. Tři krátké černé čáry mezi bázemi a formamidovými molekulami představují nově vytvořené vodíkové vazby.

S polymerázová řetězová reakce (PCR) patří mezi nejpopulárnější kontexty, ve kterých je žádoucí denaturace DNA, je nejčastější metodou denaturace zahřívání.[22] Kromě denaturace teplem mohou nukleové kyseliny procházet procesem denaturace různými chemickými látkami, jako je např formamid, guanidin, salicylát sodný, dimethylsulfoxid (DMSO), propylenglykol, a močovina.[23] Tato chemická denaturační činidla snižují teplotu tání (Tm) soutěží o dárce a akceptory vodíkových vazeb s již existujícími dusíkatá báze páry. Někteří agenti jsou dokonce schopni vyvolat denaturaci při pokojové teplotě. Například, zásaditý Bylo prokázáno, že látky (např. NaOH) denaturují DNA změnou pH a odstranění protonů přispívajících k vodíkové vazbě.[22] Tyto denaturanty byly použity k výrobě Denaturační gradientový gel pro elektroforézu (DGGE), který podporuje denaturaci nukleových kyselin za účelem eliminace vlivu tvaru nukleových kyselin na jejich elektroforetický mobilita.[24]

Alternativou je chemická denaturace

The optická aktivita (absorpce a rozptyl světla) a hydrodynamické vlastnosti (translační difúze, sedimentační koeficienty, a časy rotační korelace ) z formamid denaturované nukleové kyseliny jsou podobné jako u tepelně denaturovaných nukleových kyselin.[23][25][26] Proto v závislosti na požadovaném účinku může chemicky denaturující DNA poskytnout jemnější postup pro denaturaci nukleových kyselin než denaturace vyvolaná teplem. Studie porovnávající různé metody denaturace, jako je zahřívání, mlýnek na korálky různých velikostí perliček, sonda sonifikace a chemická denaturace ukazují, že chemická denaturace může poskytnout rychlejší denaturaci ve srovnání s jinými popsanými fyzikálními denaturačními metodami.[22] Zejména v případech, kdy je požadována rychlá renaturace, mohou chemická denaturační činidla poskytnout ideální alternativu k zahřívání. Například řetězce DNA denaturované pomocí alkalické látky jako NaOH renatura co nejdříve fosfátový pufr je přidáno.[22]

Denaturace způsobená vzduchem

Malý, elektronegativní molekuly jako dusík a kyslík, což jsou primární plyny v vzduch, významně ovlivňuje schopnost okolních molekul účastnit se vodíkové vazby.[27] Tyto molekuly soutěží s okolními akceptory vodíkových vazeb o dárce vodíkových vazeb, proto působí jako „látky rozbíjející vodíkové vazby“ a oslabující interakce mezi okolními molekulami v prostředí.[27] Antiparellalová vlákna v DNA jsou dvojité šroubovice nekovalentně vázány vodíkovou vazbou mezi páry bází Watson a Crick;[28] dusík a kyslík proto udržují potenciál k oslabení integrity DNA při vystavení vzduchu.[29] Výsledkem je, že řetězce DNA vystavené vzduchu vyžadují menší sílu, aby se oddělily a ukázaly nižší teploty tání.[29]

Aplikace

Mnoho laboratorních technik spoléhá na schopnost oddělit se řetězce nukleových kyselin. Po porozumění vlastnostem denaturace nukleových kyselin byly vytvořeny následující metody:

Denaturanty

Denaturanty bílkovin

Kyseliny

Kyselé proteinové denaturanty zahrnují:

Základny

Základny fungují podobně jako kyseliny v denaturaci. Obsahují:

Rozpouštědla

Většina organických rozpouštědla jsou denaturační, včetně:[Citace je zapotřebí ]

Zesíťovací činidla

Zesíťování činidla pro proteiny zahrnují:[Citace je zapotřebí ]

Chaotropní látky

Chaotropní látky zahrnout:[Citace je zapotřebí ]

Reduktory disulfidových vazeb

Agenti, kteří se zlomí disulfidové vazby redukcí zahrnují:[Citace je zapotřebí ]

Chemicky reaktivní činidla

Činidla, jako je peroxid vodíku, elementární chlor, kyselina chlorná (chlorová voda), brom, bromová voda, jód, dusičná a oxidační kyselina, a ozon, reagují s citlivými skupinami, jako je sulfid / thiol, aktivované aromatické kruhy (fenylalanin), čímž dochází k bílkoviny a učinit je zbytečnými.

jiný

Denaturanty nukleových kyselin

Chemikálie

Kyselé denaturanty nukleových kyselin zahrnují:

Základní denaturanty nukleových kyselin zahrnují:

  • NaOH

Mezi další denaturanty nukleových kyselin patří:

Fyzický

Viz také

Reference

  1. ^ Alan D. MacNaught; Andrew R. Wilkinson, vyd. (1997). Kompendium chemické terminologie: Doporučení IUPAC („zlatá kniha“). Blackwell Science. ISBN  978-0865426849.
  2. ^ Vert, Michel (2012). „Terminologie pro biologicky související polymery a aplikace (doporučení IUPAC 2012)“ (PDF). Čistá a aplikovaná chemie. 84 (2): 377–410. doi:10.1351 / PAC-REC-10-12-04. S2CID  98107080.
  3. ^ Mosbyův lékařský slovník (8. vydání). Elsevier. 2009. Citováno 1. října 2013.
  4. ^ Samson, Andre L .; Ho, Bosco; Au, Amanda E .; Schoenwaelder, Simone M .; Smyth, Mark J .; Bottomley, Stephen P .; Kleifeld, Oded; Medcalf, Robert L. (01.11.2016). „Fyzikálně-chemické vlastnosti, které řídí agregaci proteinů, také určují, zda je protein zadržen nebo uvolněn z nekrotických buněk“. Otevřená biologie. 6 (11): 160098. doi:10.1098 / rsob.160098. ISSN  2046-2441. PMC  5133435. PMID  27810968.
  5. ^ Samson, Andre L .; Knaupp, Anja S .; Sashindranath, Maithili; Borg, Rachael J .; Au, Amanda E.-L .; Policajti, Elisa J .; Saunders, Helen M .; Cody, Stephen H .; McLean, Catriona A. (2012-10-25). „Nukleocytoplazmatická koagulace: agregační událost vyvolaná poškozením, která disulfid zesíťuje proteiny a usnadňuje jejich odstranění plazminem“. Zprávy buněk. 2 (4): 889–901. doi:10.1016 / j.celrep.2012.08.026. ISSN  2211-1247. PMID  23041318.
  6. ^ Důl, Yoshinori; Noutomi, Tatsushi; Haga, Noriyuki (1990). "Tepelně vyvolané změny v bílkovinách vaječného bílku". Journal of Agricultural and Food Chemistry. 38 (12): 2122–2125. doi:10.1021 / jf00102a004.
  7. ^ „Ceviche: nové sushi,“ Časy.
  8. ^ A b C Bondos, Sarah (2014). "Složení bílkovin". Přístup k vědě. doi:10.1036/1097-8542.801070.
  9. ^ "Denaturace". Věda v kontextu. 2006-04-03.
  10. ^ Dyson, H. Jane; Wright, Peter E. (01.03.2005). "Jiskrově nestrukturované proteiny a jejich funkce". Nature Reviews Molecular Cell Biology. 6 (3): 197–208. doi:10.1038 / nrm1589. ISSN  1471-0072. PMID  15738986. S2CID  18068406.
  11. ^ Charles Tanford (1968), "Denaturace bílkovin" (PDF), Pokroky v chemii proteinů, 23: 121–282, doi:10.1016 / S0065-3233 (08) 60401-5, ISBN  9780120342235, PMID  4882248
  12. ^ Online slovník biologie, Definice a příklady denaturace
  13. ^ A b C d E F Tamás, Markus J .; Sharma, Sandeep K .; Ibstedt, Sebastian; Jacobson, Therese; Christen, Philipp (04.03.2014). „Těžké kovy a metaloidy jako příčina nesprávného skládání a agregace proteinů“. Biomolekuly. 4 (1): 252–267. doi:10,3390 / biom4010252. PMC  4030994. PMID  24970215.
  14. ^ Campbell, N. A .; Reece, J. B.; Meyers, N .; Urry, L. A .; Cain, M.L .; Wasserman, S.A .; Minorsky, P.V .; Jackson, R.B. (2009), Biologie (8. australská verze, ed.), Sydney: Pearson Education Australia
  15. ^ Anfinsen CB. (1973), „Principy, které řídí skládání proteinových řetězců“, Věda, 181 (4096): 223–30, Bibcode:1973Sci ... 181..223A, doi:10.1126 / science.181.4096.223, PMID  4124164, S2CID  10151090
  16. ^ Wetlaufer, D.B. (1988). "Reverzibilní a nevratná denaturace proteinů v chromatografických systémech". Makromolekulare Chemie. Makromolekulární sympozia. 17 (1): 17–28. doi:10.1002 / masy.19880170104. ISSN  0258-0322.
  17. ^ A b Konermann, Lars (2012-05-15). "Protein Unfolding and Denaturants". eLS. Chichester, Velká Británie: John Wiley & Sons, Ltd. doi:10.1002 / 9780470015902.a0003004.pub2. ISBN  978-0470016176. Chybějící nebo prázdný | název = (Pomoc)
  18. ^ A b Sicard, François; Destainville, Nicolas; Manghi, Manoel (21. ledna 2015). „Bubliny pro denaturaci DNA: krajina s volnou energií a míra nukleace / uzavření“. The Journal of Chemical Physics. 142 (3): 034903. arXiv:1405.3867. Bibcode:2015JChPh.142c4903S. doi:10.1063/1.4905668. PMID  25612729. S2CID  13967558.
  19. ^ Lieu, Simon. „Model Polsko-Scheraga.“ (2015): 0-5. Massachusetts Institute of Technology, 14. května 2015. Web. 25. října 2016.
  20. ^ Richard, C. a A. J. Guttmann. „Polsko – Scheraga modely a přechod denaturace DNA.“ Žurnál statistické fyziky 115,3 / 4 (2004): 925-47. Web.
  21. ^ A b C Altan-Bonnet, Grégoire; Libchaber, Albert; Krichevsky, Oleg (1. dubna 2003). „Dynamika bublin v DNA s dvojitým řetězcem“. Dopisy o fyzické kontrole. 90 (13): 138101. Bibcode:2003PhRvL..90m8101A. doi:10.1103 / fyzrevlett.90.138101. PMID  12689326. S2CID  1427570.
  22. ^ A b C d Wang, X (2014). "Charakterizace denaturace a renaturace DNA pro hybridizaci DNA". Zdraví a toxikologie pro životní prostředí. 29: e2014007. doi:10.5620 / eht.2014.29.e2014007. PMC  4168728. PMID  25234413.
  23. ^ A b Marmur, J (1961). "Denaturace deoxyribonukleové kyseliny formamidem". Biochimica et Biophysica Acta. 51 (1): 91013–7. doi:10.1016/0006-3002(61)91013-7. PMID  13767022.
  24. ^ "Denaturační polyakrylamidový gelový elektroforéza DNA a RNA". Elektroforéza. Národní diagnostika. Citováno 13. října 2016.
  25. ^ Tinoco, I; Bustamante, C; Maestre, M (1980). "Optická aktivita nukleových kyselin a jejich agregátů". Roční přehled biofyziky a bioinženýrství. 9 (1): 107–141. doi:10.1146 / annurev.bb.09.060180.000543. PMID  6156638.
  26. ^ Fernandes, M (2002). "Výpočet hydrodynamických vlastností malých nukleových kyselin z jejich atomové struktury". Výzkum nukleových kyselin. 30 (8): 1782–8. doi:10.1093 / nar / 30.8.1782. PMC  113193. PMID  11937632.
  27. ^ A b Mathers, T. L .; Schoeffler, G .; McGlynn, S. P. (červenec 1985). "Účinky vybraných plynů na ethanol: rozbití vodíkové vazby O a N". Canadian Journal of Chemistry. 63 (7): 1864–1869. doi:10.1139 / v85-309.
  28. ^ Cox, David L. Nelson, Michael M. (2008). Lehningerovy principy biochemie (5. vydání). New York: W.H. Freemane. ISBN  9780716771081.
  29. ^ A b Mathers, T. L .; Schoeffler, G .; McGlynn, S. P. (1982). „Rozbíjení vodíkové vazby O / sub 2 / a N / sub 2 /. II. Křivky tání DNA“ (PDF). doi:10.2172/5693881. OSTI  5693881. Citovat deník vyžaduje | deník = (Pomoc)
  30. ^ López-Alonso JP, Bruix M, Font J, Ribó M, Vilanova M, Jiménez MA, Santoro J, González C, Laurents DV (2010), „NMR spektroskopie odhaluje, že RNáza A je převážně denaturována ve 40% kyselině octové: důsledky pro tvorbu oligomerů výměnou domén 3D“, J. Am. Chem. Soc., 132 (5): 1621–30, doi:10.1021 / ja9081638, PMID  20085318
  31. ^ Jaremko, M .; Jaremko Ł; Kim HY; Cho MK; Schwieters CD; Giller K; Becker S; Zweckstetter M. (duben 2013). "Studená denaturace proteinového dimeru monitorována při atomovém rozlišení". Nat. Chem. Biol. 9 (4): 264–70. doi:10.1038 / nchembio.1181. PMC  5521822. PMID  23396077.

externí odkazy