Skvrna Papanicolaou - Papanicolaou stain
Skvrna Papanicolaou (taky Papanicolaouova skvrna a Pap skvrna) je multichromatický (vícebarevný) cytologické barvení technika vyvinutá George Papanicolaou v roce 1942.[1][2][3] Skvrna Papanicolaou je jednou z nejběžněji používaných skvrn cytologie,[1] kde se používá na pomoc patologové při stanovení diagnózy. Ačkoli nejpozoruhodnější pro jeho použití při detekci rakovina děložního hrdla v Pap test nebo Papový nátěr, také se používá k barvenígynekologické preparáty vzorků z různých tělesné sekrece a od malé biopsie jehlou orgánů a tkání.[4][5] Papanicolaou publikoval tři formulace této skvrny v letech 1942, 1954 a 1960.[2]
Používání
Papírové barvení se používá k diferenciaci buněk v nátěrových přípravcích (ve kterých jsou vzorky rozprostřeny nebo rozmazány na sklíčko mikroskopu)[6] z různých tělesné sekrece a jehlové biopsie; vzorky mohou zahrnovat gynekologické nátěry (Papové nátěry ), sputum, kartáče, mytí, moč, mozkomíšní mok,[4] břišní tekutina, pleurální tekutina, synoviální tekutina, sperma,[7] jemné aspirace jehlou, vzorky nádoru nebo jiné materiály obsahující uvolněné buňky.[8][4][9]
Papírová skvrna není plně standardizovaná a dodává se v několika formulacích, které se liší přesnými použitými barvivy, jejich poměry a načasováním procesu.[2][1] Papírové barvení je obvykle spojeno s cytopatologie ve kterém jsou zkoumány volné buňky, ale barvivo bylo také upraveno a použito na řezy tkáně.[9]
Pap test
Papírové barvení se používá v Papový nátěr (nebo Pap test) a je spolehlivá technika v rakovina děložního hrdla promítání v gynekologie.[10]
Zobecněná metoda barvení
Klasická forma barvení Papanicolaou zahrnuje pět skvrny ve třech řešeních.[2][11][12]
- První barvicí roztok obsahuje hematoxylin které skvrny buněčná jádra.[10][2][12] Papanicolaou použitý Harrisův hematoxylin ve všech třech formulacích skvrny, kterou publikoval.[2]
- Druhý barvicí roztok (označený jako OG-6) obsahuje Orange G. v 95% ethylalkohol s malým množstvím kyselina fosfowolframová.[12][2] V OG-6 znamená OG Orange G a „6“ označuje koncentraci kyselina fosfowolframová přidané; další varianty jsou OG-5 a OG-8).[2]
- Třetí barvicí roztok se skládá ze tří barviv, Eosin Y, Světle zelená SF nažloutlá, a Bismarck hnědá Y v 95% ethylalkoholu s malým množstvím kyseliny fosfowolframové a uhličitan lithný.[12][2] Toto řešení, označené EA, následované číslem, které označuje podíl barviv, další formulace zahrnují EA-36, EA-50 a EA-65.[2]
Kontrastní barvy jsou rozpuštěny v 95% ethylalkoholu, což zabraňuje nadměrnému barvení buněk, které by zakrývalo jaderné detaily a obrysy buněk, zejména v případě, že se buňky překrývají na podložním sklíčku.[3][2] K úpravě se přidá kyselina fosfowolframová pH kontrastních barev a pomáhá optimalizovat intenzitu barev.[2] Kontrastní barvivo EA obsahuje hnědou Bismarck a kyselinu fosfowolframovou, které při kombinaci způsobují obě sraženina z roztoku, což snižuje životnost směsi.[2]
Výsledek
Výsledkem barvení by měly být buňky, které jsou poměrně průhledné, takže lze interpretovat i tlustší vzorky s překrývajícími se buňkami.[2] Buněčná jádra by měla být ostrá, modré až černé barvy[12][13] a chromatin vzory jádra by měly být dobře definovány. Buňka cytoplazma skvrny modrozelené a keratin skvrny oranžové barvy.[13][5]
Eosin Y skvrny na povrchovém epitelu dlaždicové buňky, nukleoly, řasy, a červené krvinky.[2] Světle zelená SF nažloutlá skvrny na cytoplazma jiných buněk, kromě povrchových dlaždicových buněk.[2] Povrchové buňky jsou oranžové až růžové a střední a parabazální buňky jsou tyrkysově zelené až modré.[12]
Ultrarychlá skvrna Papanicolaou
Ultrarychlá skvrna Papanicolaou je alternativou pro vzorky aspirace jemnou jehlou, vyvinuté pro dosažení srovnatelné vizuální jasnosti za výrazně kratší dobu. Proces se liší rehydratací nátěru sušeného na vzduchu solný, použijte 4% formaldehyd v 65% ethanol fixační a použití Richarda-Allana Hematoxylin -2 a Cyto-Stain, což má za následek 90sekundový proces poskytující transparentní polychromatické skvrny.[14]
Příklady barvení Papanicolaou
Maligní melanom, aspirace tenkou jehlou biopsie játra, přímý nátěr.
Spinocelulární karcinom bronchiální mytí.
Benigní vzorek cytologie moči.
Papíry George N. Papanicolaou popisující jeho skvrnu
- Papanicolaou, George N. „Nový postup pro barvení vaginálních skvrn.“ Science 95,2469 (1942): 438–439.
- Papanicolaou, George N. „Metoda diagnostiky rakoviny pomocí buněčného nátěru.“ American Journal of Public Health and the Nation's Health 38,2 (1948): 202–205.
- Papanicolaou, George N. "Atlas exfoliativní cytologie." Publikováno pro fond společenství Harvard University Press. (1954).
- Papanicolaou, George N. "Memorandum o barvení." Atlas exfoliativní cytologie. Cambridge, MA: Harvard University Press, dodatek II (1960): 12.
Viz také
- Diff-Quik — Romanowského barvení metoda běžně používaná v cytologii[15]
Reference
- ^ A b C Schulte EK (1991). „Standardizace biologických barviv a skvrn: úskalí a možnosti“. Histochemie. 95 (4): 319–328. doi:10.1007 / BF00266958. PMID 1708749.
- ^ A b C d E F G h i j k l m n Ó str Gill, Gary W. (2013). „Papanicolaou Stain“. Cytopreparace. Základy v cytopatologii. 12. 143–189. doi:10.1007/978-1-4614-4933-1_10. ISBN 978-1-4614-4932-4. ISSN 1574-9053.
- ^ A b Chantziantoniou N, Donnelly AD, Mukherjee M, Boon ME, Austin RM (2017). „Vznik a vývoj metody Papanicolaou Stain“. Acta Cytol. 61 (4–5): 266–280. doi:10.1159/000457827. PMID 28384641.CS1 maint: více jmen: seznam autorů (odkaz)
- ^ A b C Kumar, Vinay; Abbas, Abul K .; Aster, Jon C. (2013). Robbinsova základní patologie (9. vydání). Elsevier / Saunders. p. 910. ISBN 978-1-4377-1781-5.
- ^ A b Drury, R. A. B .; Wallington, E. A. (1980). Carletonova histologická technika (5. vydání). Oxford University Press. str. 520p. ISBN 0-19-261310-3.
- ^ Stedmanov lékařský slovník (27. vydání). Lippincott Williams & Wilkins. ISBN 978-0683400076.
- ^ Lars Björndahl; David Mortimer; Christopher L. R. Barratt (1. dubna 2010). Praktický průvodce základní laboratorní andrologií. Cambridge University Press. ISBN 978-1-139-48249-3.
- ^ Hoda RS (2007). „Ne-gynekologická cytologie na kapalných přípravcích: morfologický přehled faktů a artefaktů“. Diagnostická cytopatologie. 35 (10): 621–34. doi:10.1002 / dc.20698. PMID 17854077.
- ^ A b Preethi, S .; Sivapathasundharam, B. (2014). „Bude upravená skvrna Papanicolaou novou skvrnou pro keratin?“. Journal of Histotechnology. 38 (1): 9–13. doi:10.1179 / 2046023614Y.0000000053. ISSN 0147-8885.
- ^ A b Ross, Michael H .; Pawlina, Wojciech (2016). Histologie: text a atlas: s korelovanou buněčnou a molekulární biologií (7. vydání). Wolters Kluwer. 984 s. ISBN 978-1451187427.
- ^ Carson, Freida L; Hladik, Christa (2009). Histotechnology: Samoučivý text (3. vyd.). Hongkong: Americká společnost pro klinickou patologii Lis. 361–3363. ISBN 978-0-89189-581-7.
- ^ A b C d E F Bancroft, John; Stevens, Alan, eds. (1982). Teorie a praxe histologických technik (2. vyd.). Longman Group Limited.
- ^ A b Dey, Pranab (2018). "Rutinní barvení v cytologické laboratoři". Základní a pokročilé laboratorní techniky v histopatologii a cytologii. 133–138. doi:10.1007/978-981-10-8252-8_14. ISBN 978-981-10-8251-1.
- ^ Yang GC, Alvarez II (1995). „Ultrarychlé barvení Papanicolaou. Alternativní přípravek pro aspirační cytologii s jemnou jehlou“. Acta Cytol. 39 (1): 55–60. PMID 7531380.
- ^ Demay, Richard (2012). „Kapitola 26: Skvrny“. Umění a věda cytopatologie. Chicago, IL: Am Soc Clinical Pathology. p. 1505. ISBN 978-0-89189-644-9. OCLC 761848930.