Skvrna Ziehl – ​​Neelsen - Ziehl–Neelsen stain

Mycobacterium tuberculosis vizualizace pomocí skvrny Ziehl – ​​Neelsen
Ziehl – ​​Neelsenovo (kyselinovzdorné) barvení - schéma základních kroků

Ziehl-Neelsenovo barvení je typ kyselinovzdorné skvrny, kterou poprvé představil Paul Ehrlich. Barvení Ziehl – ​​Neelsen je bakteriologické barvivo používané k identifikaci kyselinově rychlé organismy, hlavně Mykobakterie. Je pojmenován pro dva německé lékaře, kteří skvrnu upravili: bakteriolog Franz Ziehl (1859–1926) a patolog Friedrich Neelsen (1854–1898).

Mykobakterie

Rod Mycobacterium je pomalu rostoucí bakterie, tvořená malými tyčemi, které jsou mírně zakřivené nebo rovné a jsou považovány za grampozitivní. Některé druhy mykobakterií tvoří větve nebo vlákna. Některé mykobakterie jsou volně žijící saprofyty, ale mnoho z nich je patogenů, které způsobují onemocnění zvířat i lidí. Mycobacterium bovis způsobuje tuberkulózu u skotu. Vzhledem k tomu, že tuberkulóza může být rozšířena na člověka, je mléko pasterizováno, aby zabilo kteroukoli z bakterií.[1]Některé druhy Mycobacteria, které způsobují onemocnění u lidí, zahrnují Mycobacterium leprae, Mycobacterium kansasii, Mycobacterium marinum, Mycobacterium bovis, Mycobacterium africanum a členové Mycobacterium avium komplex. Mycobacterium tuberculosis je druh Mycobacterium, který způsobuje tuberkulóza (TB). Mycobacterium tuberculosis je bakterie přenášená vzduchem, která obvykle infikuje lidské plíce.[2][3] Mezi příznaky TBC patří špatný kašel, bolest na hrudi, únava, úbytek na váze, nechutenství, zimnice, horečka a noční pocení.[4] Typický režim pro léčbu latentní TBC infekce zahrnuje použití isoniazidu, rifapentinu a rifampinu. Režim se mění u těch, u kterých se vyvinul kmen TB odolný vůči lékům.[5] Testování na TBC zahrnuje krevní testy, kožní testy a rentgenové snímky hrudníku.[6] Při pohledu na nátěry na TB se obarví pomocí kyselinovzdorného skvrn. Tyto rychle kyselé organismy, jako je Mycobacterium, obsahují ve svých buněčných stěnách velké množství lipidových látek zvaných mykolové kyseliny. Tyto kyseliny odolávají barvení běžnými metodami, jako je a Gramovo barvení.[7] Může být také použit k barvení několika dalších bakterií, jako jsou Nocardia. Činidla používaná pro barvení Ziehl – ​​Neelsen jsou - carbol fuchsin, kyselý alkohol a methylenová modř. Kyselinově rychlé bacily jsou po obarvení jasně červené.

Houby

Ziehl-Neelsenovo barvení je druh houbového barviva s úzkým spektrem. Houbové skvrny s úzkým spektrem jsou selektivní a mohou pomoci rozlišit a identifikovat houby.[8] Výsledky barvení ZIehl-Neelsen jsou variabilní, protože mnoho buněčných stěn hub není kyselinově rychlé.[9] Příklad běžného typu kyselinovzdorné houby, která je obvykle obarvena Ziehl-Neelsenovým barvením, se nazývá Histoplasma (HP).[10] Histoplazma se nachází v půdě a výkalech ptáků a netopýrů.[11] Lidé mohou uzavřít histoplazmózu vdechováním spór hub. Histoplazma vstupuje do těla a jde do plic, kde se spory mění na kvasinky.[12] Kvasinky se dostávají do krevního oběhu a ovlivňují lymfatické uzliny a další části těla. Lidé obvykle onemocněním vdechováním spór nejsou, ale pokud ano, obvykle mají příznaky podobné chřipce.[13] Další variace na tuto metodu barvení se používá v mykologie odlišně obarvit kyselinově rychlé inkrusty v kutikule hyfy některých druhů houby v rodu Russula.[14][15] Některé volné endospory lze zaměnit s malými kvasinkami, proto se k identifikaci neznámých hub používá barvení.[16] Je také užitečné při identifikaci některých prvoků, a to Cryptosporidium a Isospora. Skvrna Ziehl – ​​Neelsen může také bránit diagnostice v případě paragonimiasis protože vajíčka ve vzorku sputa pro vajíčko a parazita (O&P) mohou být barvivem rozpuštěna a v tomto klinickém prostředí se často používají, protože příznaky a příznaky paragonimiózy se velmi podobají příznakům a tuberkulóze.

Dějiny

V roce 1882 Robert Koch objevil etiologii tuberkulózy.[17] Brzy po Kochově objevu vyvinul Paul Ehrlich skvrnu na mycobacterium tuberculosis, která se nazývá kamenec hematoxylinová skvrna.[18] Franz Ziehl poté změnil Ehrlichovu barvicí techniku ​​pomocí kyseliny karbolové jako mořidla. Friedrich Neelsen ponechal Ziehlovu volbu mořidla, ale změnil primární skvrnu na carbol fuchsin. Společně s úpravami společnosti Ziehl a Neelsen byla vyvinuta skvrna Ziehl-Neelsen. Další kyselinovzdorný satén vyvinul Joseph Kinyoun pomocí techniky barvení Ziehl-Neelsen, ale odstraněním kroku zahřívání z postupu. Tato nová skvrna z Kinyounu byla pojmenována Kinyounská skvrna.

Postup

Typický postup barvení AFB zahrnuje upuštění buněk v suspenzi na podložní sklíčko, potom sušení kapaliny na vzduchu a fixování buněk teplem. [19]

Souhrn kyselinovzdorného barvení (barvení Ziehl – ​​Neelsen)[20]
AplikaceČinidloBarva buňky
Kyselina rychleNekyselý rychle
Primární barvivoCarbol fuchsinČervenéČervené
OdbarvovačKyselý alkoholČervenéBezbarvý
Počítadlo skvrnMethylenová modř /malachitová zeleňČervenéModrý

Studie prokázaly, že barvivo AFB bez kultury má špatnou negativní prediktivní hodnotu. Kultura AFB by měla být provedena společně s barvením AFB; to má mnohem vyšší negativní prediktivní hodnotu.

Mechanismus kyselinovzdorného barvení v kyselinově rychlých buňkách a v kyselinově rychlých buňkách.[21][22][23]

Vysvětlení mechanismu

Zpočátku carbol fuchsin obarví každou buňku. Když jsou odbarveny kyselinou-alkoholem, odbarví se pouze nekyselé bakterie, protože nemají tlustou voskovou lipidovou vrstvu jako kyselinovzdorné bakterie. Když se aplikuje protikus, nekysele rychlé bakterie ho zachytí a při pohledu pod mikroskopem se stávají modrou (methylenová modř) nebo zelenou (malachitová zeleň). Kyseliny rychlé bakterie zadržují karbol fuchsin, takže vypadají červeně.

Modifikace

Viz také

Příklady online protokolů

Reference

  1. ^ Sandman, Kathleen, Joanne Willey a Dorothy Wood. Prescottova mikrobiologie. 11. vydání New York, NY: McGraw-Hill Higher Education, 2020. Tisk. str. 541
  2. ^ Centra pro kontrolu a prevenci nemocí. Základní fakta o TB. 11. března 2016. https://www.cdc.gov/tb/topic/basics/default.htm
  3. ^ Centra pro kontrolu a prevenci nemocí. Jak se šíří TB. 11. března 2016. https://www.cdc.gov/tb/topic/basics/howtbspreads.htm
  4. ^ Centra pro kontrolu a prevenci nemocí. Známky a příznaky. 11. března 2016. https://www.cdc.gov/tb/topic/basics/signsandsymptoms.htm
  5. ^ Centra pro kontrolu a prevenci nemocí. Režimy léčby pro latentní TBC infekci (LTBI). 11. března 2016. https://www.cdc.gov/tb/topic/treatment/ltbi.htm
  6. ^ Centra pro kontrolu a prevenci nemocí. Testování a diagnostika. 11. března 2016. https://www.cdc.gov/tb/topic/testing/default.htm
  7. ^ Morello, Josephine A., Paul A. Granato, Marion E. Wilson a Verna Morton. Laboratorní příručka a sešit v mikrobiologii: Aplikace v péči o pacienta. 10. vydání. Boston: McGraw-Hill Higher Education, 2006. Tisk.[stránka potřebná ]
  8. ^ Veerappan, R., Miller, L. E., Sosinski, C., & Youngberg, G. A. (2006) Úzkopásmový vzor barvení Pityrosporum. Journal of Cutaneous Pathology: November 2006, Vol. 33, č. 11, str. 731-734.
  9. ^ Haque, A. (2010). Použití speciálních skvrn při plísňových infekcích. Připojení: 187-194
  10. ^ Rajeshwari, M., Xess, I., Sharma, M. C. a Jain, D. (2017). Kyselinová stálost histoplazmy v praxi chirurgické patologie. Časopis patologie a translační medicíny, 51 (5), 482–487. doi: 10.4132 / jptm.2017.07.11
  11. ^ Centra pro kontrolu a prevenci nemocí. Histoplazmóza. 13. srpna 2018. https://www.cdc.gov/fungal/diseases/histoplasmosis/index.html.
  12. ^ Centra pro kontrolu a prevenci nemocí. Zdroje histoplazmózy. 11. února 2019. https://www.cdc.gov/fungal/diseases/histoplasmosis/causes.html
  13. ^ Centra pro kontrolu a prevenci nemocí. Příznaky histoplazmózy. 13. srpna 2018. https://www.cdc.gov/fungal/diseases/histoplasmosis/symptoms.html
  14. ^ Romagnesi, H. (1967). Les Russules d'Europe et d'Afrique du Nord. Bordas. ISBN  0-934454-87-6.[stránka potřebná ]
  15. ^ Largent, D; D Johnson; R Watling (1977). Jak identifikovat houby rodu III: mikroskopické rysy. Mad River Press. str. 25. ISBN  0-916422-09-7.
  16. ^ Youngberg, George A .; Wallen, Ellen D. B .; Giorgadze, Tamar A. (listopad 2003). „Úzkospektrální histochemické barvení hub“. Archivy patologie a laboratorní medicíny. 127 (11): 1529–30. doi:10.1043 / 1543-2165 (2003) 127 <1529: NHSOF> 2,0.CO; 2 (neaktivní 2020-10-21). PMID  14567744.CS1 maint: DOI neaktivní od října 2020 (odkaz)
  17. ^ DiNardo, Andrew R .; Lange, Christoph; Mandalakas, Anna M. (1. května 2016). „Redakční komentář: 1, 2, 3 (roky)… a jste venku: Konec 123leté historické éry“. Klinické infekční nemoci. 62 (9): 1089–1091. doi:10.1093 / cid / ciw041. PMID  26839384.
  18. ^ Singhal, Ritu; Myneedu, Vithal Prasad (březen 2015). "Mikroskopie jako diagnostický nástroj u plicní tuberkulózy". International Journal of Mycobacteriology. 4 (1): 1–6. doi:10.1016 / j.ijmyco.2014.12.006. PMID  26655191.
  19. ^ Leboffe, Michael J. a Burton E. Pierce. Mikrobiologická laboratorní teorie a základy aplikace. Morton Publishing, 2019. Tisk. str. 179.[stránka potřebná ]
  20. ^ Acid-Fast Stain - princip, postup, interpretace a příklady. 8. května 2015, autor Sagar Aryal
  21. ^ „Poznámky k mikrobiologii online“. Poznámky k mikrobiologii online. Citováno 2017-11-29.
  22. ^ „Home - microbeonline“. microbeonline.com. Citováno 2017-11-29.
  23. ^ Kumar, Surinder (2012). Učebnice mikrobiologie. str. 315.
  24. ^ Ellis, RC; LA Zabrowarny. (1993). „Bezpečnější metoda barvení pro kyselě rychlé bacily“. Journal of Clinical Pathology. 46 (6): 559–560. doi:10.1136 / jcp.46.6.559. PMC  501296. PMID  7687254.

Bibliografie

  • „Microbiology with Diseases by Body System“, Robert W. Bauman, 2009, Pearson Education, Inc.

externí odkazy