Kinyounská skvrna - Kinyoun stain
The Kinyounova metoda nebo Kinyounská skvrna (studená metoda), vyvinutá Joseph J. Kinyoun, je postup zvyklý na skvrna kyselinově rychlé druhy bakteriálních rodů Mycobacterium a Nocardia[1] a apicomplexan rod Cryptosporidium. Jedná se o variantu metody vyvinuté Robertem Kochem v roce 1882. Některé druhy bakterií mají ve svých buněčných stěnách voskovitý lipid nazývaný kyselina mykolová, který jim umožňuje barvit se pomocí Acid-Fast lépe než Gram-Stain. Jedinečná schopnost mykobakterií odolat odbarvování kyselinou-alkoholem je důvodem, proč jsou označovány jako kyselinovzdorné.[2] Zahrnuje aplikaci primární skvrny (základní fuchsin ), odbarvovač (kyselý alkohol) a barvivo (methylenová modř ).[3] Na rozdíl od Skvrna Ziehl-Neelsen (Z-N skvrna), metoda barvení Kinyoun nevyžaduje ohřev.[4][5] Ve skvrně Ziehl-Neelsen působí teplo jako fyzikální mořidlo, zatímco fenol (karbol karbol fuschin) působí jako chemické mořidlo. Protože skvrna Kinyoun je metoda za studena (bez použití tepla), zvyšuje se koncentrace použitého karbol-fuschinu.[6]
Aplikace | Činidlo | Barva buňky | |
---|---|---|---|
Kyselina rychle | Nekyselý rychle | ||
Primární barvivo | Carbol fuchsin | Červené | Červené |
Odbarvovač | Kyselý alkohol | Červené | Bezbarvý |
Counter Stain | Methylenová modř | Červené | Modrý |
Postup barvení

Vytvořte kyselinovzdorné skvrny [7]
Materiály
- Skluzavka s rozmazáním organismu
- Carbol Fuchsin
- Kyselina-alkohol
- Methylenová modř
- biblický papír
- Mikroskop
Instrukce
- Vytvořte nátěr na snímek s organismy
- Vyčistěte sklíčko, sklíčko voskového štítku, rozetřete organismus, vysušte na vzduchu po dobu 10 minut, tepelně fixujte
- Ponořte sklíčko na 20 minut do Carbol Fuchsinu.
- Opláchněte sklíčko
- Ponořte sklíčko na 3 až 5 sekund do kyselého alkoholu.
- Opláchněte snímek
- Ponořte sklíčko na 30 sekund do methylenové modři.
- Opláchněte snímek
- Skvrna vysušte suchým papírem.
- Pozorujte pod mikroskopem.
Úpravy
Metodu Kinyoun lze upravit jako slabě kyselé rychlé barvení, při kterém se místo kyseliny chlorovodíkové používá 5% kyselina sírová. Slabé kyselé rychlé barvení kromě barvení mykobakterií bude barvit organismy, které nejsou schopné udržovat karbol fuchsin po odbarvení HCl.
Viz také
Reference
- ^ Geo F. B a kol., Jawetz, Melnick and Adelberg's Medical Microbiology, 25. vydání, Lange Medical, 2004, strana 182
- ^ .dalynn (říjen 2014). „KINYOUN CARBOL FUCHSIN STAIN“ (PDF).
- ^ Hussey, A. M., Zayaitz, A., „Acid-Fast Stain Protocols“ Archivováno 2011-10-01 na Wayback Machine, Americká společnost pro mikrobiologii, 8. září 2008. Citováno dne 1. listopadu 2014.
- ^ Murray PR, Baron E, Pfaller M, Tenover F, Yolken, Eds. Manuál klinické mikrobiologie. 7. vydání Washington, DC: ASM, 1999.
- ^ Baron EJ, Finegold SM. Bailey a Scottova diagnostická mikrobiologie. 8. vydání St. Louis: Mosby, 1990.
- ^ Ananthanarayan and Panicker's učebnice mikrobiologie, 9. vydání, Universities Press (Indie), 2013, strana 353
- ^ https://faculty.mtsac.edu/cbriggs/Micr-22NewLabmanual2Aug2018.pdf
![]() | Tento mikrobiologie související článek je a pahýl. Wikipedii můžete pomoci pomocí rozšiřovat to. |