Newyorský agar - New York City agar
The N.Y.C (New York City ) střední nebo GC (Neisseria gonorrhoeae ) střední agar se používá k izolaci Gonokoky.[1]
Složení
Agarová základna se skládá z:[1]
| Složení | Gramů na litr |
|---|---|
| Proteózový pepton | 15 |
| Kukuřičný škrob | 1 |
| Glukóza | 5 |
| Chlorid sodný | 5 |
| Hydrogenfosforečnan draselný | 4 |
| Dihydrogenfosforečnan draselný | 1 |
| Agar | 20 |
Finále pH (při 25 ° C) 7,4 ± 0,2
Pozadí a zásady
NYC Agar Base původně vyvinuli Fauer, Weisburd a Wilson[1][2][3] na New York City Department of Health pro selektivní izolaci patogenních Neisseria druhy z klinických vzorků. Skládá se primárně z agarové báze pepton-kukuřičný škrob pufrovaný fosfáty a doplněno koněm plazma, kůň hemoglobin, dextróza, kvasnicový autolyzát a antibiotika.[1][2] Toto médium je lepší než jiná média obecně používaná k izolaci Neisseria druh.[1][4][5] Transparentní povaha média pomáhá při studiu koloniálních typů.[6]
Proteózový pepton, koňská plazma, hemoglobin poskytnout živiny pro růst N. gonorrhoeae a N. meningitidis. Fosfát Nárazníky médium. Přidaný selektivní doplněk obsahuje antibiotika vankomycin, kolistin, nystatin a trimethoprim, potlačit doprovodnou flóru. Vankomycin je inhibiční pro grampozitivní bakterie. Colistin inhibuje gram negativní bakterie, včetně Druhy Pseudomonas, zatímco Proteus je inhibován trimethoprim.[7] Kombinace trimethoprim a kolistin činy synergicky proti gramnegativní bacily.[8] Škrob neutralizuje toxické metabolity produkované Neisseria. Doplněk autolyzátu z kvasnic splňuje CO2 požadavky potřebné ke zvýšení Neisseria růst. Kvasinky obsahují kyselina oxalooctová který je metabolizován gonokoky produkovat dostatek CO2 pro růst kapnofilních gonokoků.[9] Přítomnost kvasinkového autolyzátu také snižuje zpožďovací fáze růstu Neisseria, čímž se zvyšuje jak velikost, tak počet kolonií. Vzorek může být přímo nanesen na médium, aby se dosáhlo maximální izolace.
Postup
Pruh the vzorek co nejdříve po obdržení v laboratoř. Pokud je materiál kultivovaný přímo z a tampon, postupujte následovně:[10]
- Roll tampon přímo na médiu ve velkém „Z“, aby byla zajištěna adekvátní expozice tamponu na střední pro převod organismy.
- Křížový vzor „Z“ s a sterilní drátěná smyčka, nejlépe v klinika. Pokud se tak nestane dříve, mělo by se provést křížové pruhování v laboratoři.
- Umístěte kulturu co nejdříve do aerobní prostředí obohacené o oxid uhličitý.
- Inkubovat při 35 ± 2 ° C a poté zkoušet přes noc inkubace a znovu po přibližně 48 hodinách.
- Subkultůra pro identifikaci N. gonorrhoeae by mělo být provedeno do 18–24 hodin. Pokud jsou odeslány po inkubaci, měly by být kolonie před provedením biochemických identifikačních testů subkultivovány, aby bylo zajištěno dosažení přiměřené životaschopnosti.
Očekávané výsledky
Typická koloniální morfologie je následující:[7]
N. gonorrhoeae se mohou jevit jako malé (0,5–1,0 mm) šedavě bílé až bezbarvé mukoidní kolonie.N. meningitidis se jeví jako velké bezbarvé až modrošedé mukoidní kolonie.
Kolonie mohou být vybrány pro Gramovo barvení, subkultivace nebo jiné diagnostické postupy.
Reference
- ^ A b C d E Fauer, Weisburd, Wilson a May, 1973, Health Lab. Sci., 10: 44.
- ^ A b Fauer, Weisburd a Wilson, 1973, Health Lab. Sci., 10:55.
- ^ Fauer Y. C., Weisburd M. H. a Wilson M. E., 1973, Health Lab Sci., 10 (2) 61.
- ^ Granato, Schneible-Smith a Weiner, 1981, J. Clin. Microbiol. 13: 963.
- ^ Griffin P. J. a Reider S. V., 1957, J. Biol. Med., 29, 613
- ^ MacFaddin J. F., 1985, Media for Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria, sv. 1, Williamsand Wilkins, Baltimore
- ^ A b Knapp a Koumans. 1999. In Murray, Baron, Pfaller, Tenover and Yolken (ed.), Manuál klinické mikrobiologie, 7. vydání. Americká společnost pro mikrobiologii, Washington, D.C.
- ^ . Simmons N. A., 1970, J. Clin. Pathol., 23, 757.
- ^ Lawton a Koch, 1982, J. Clin. Microbiol., 20: 905
- ^ Centrum pro kontrolu nemocí. 1975. Kritéria a techniky pro diagnostiku kapavky, USPHS, Atlanta, Ga.