Weil – Felixův test - Weil–Felix test

Weil – Felixův test
Účeldiagnóza rickettsial infekce

The Weil – Felixův test je aglutinační test pro diagnózu rickettsial infekce. Poprvé byl popsán v roce 1916. Díky své dlouhé historii a své jednoduchosti se jedná o jeden z nejčastěji používaných testů pro rickettsia v globálním měřítku, přestože je v mnoha nastaveních nahrazen citlivějšími a konkrétnějšími diagnostickými testy. Nedávno bylo zjištěno, že protilátka Weil-Felix cílí na rickettsia LPS O-antigen.[1]

Historie a základ pro zkoušku

Základem testu je přítomnost antigenní křížová reaktivita mezi Rickettsia spp. a určité sérotypy nemotorické Proteus spp., fenomén poprvé publikovaný Edmund Weil a Arthur Felix v roce 1916.[2] Weil-Felix je nespecifický aglutinační test, který detekuje anti-rickettsiální protilátky v séru pacienta. Weil-Felixův test je založen na zkřížených reakcích, ke kterým dochází mezi protilátkami produkovanými při akutních rickettsiálních infekcích s antigeny kmenů OX (OX 19, OX 2 a OXK) druhů Proteus. Ředění séra pacienta se testuje proti suspenzi různých kmenů Proteus.[Citace je zapotřebí ]

Typhus group rickettsiae (Rickettsia prowazekii, R. typhi ) reagovat s P. vulgaris OX19 a drhnout tyfus (Orientia tsutsugamushi ) reaguje s P. mirabilis OXK. The skvrnitá horečka skupina rickettsiae (R. rickettsii, R. africae, R. japonica atd.) reagují s P. vulgaris OX2 a OX19, v různé míře, v závislosti na druhu.[3]

Weil – Felixův test trpí špatnými výsledky citlivost a specifičnost, přičemž nedávná studie ukazuje celkovou senzitivitu pouhých 33% a specificitu 46%.[4] Jiné studie měly podobné nálezy.[5] Ve výsledku byl do značné míry nahrazen jinými metodami sérologie, včetně nepřímých imunofluorescence protilátka (IFA) testování, což je zlatý standard. V podmínkách omezených zdrojů však stále zůstává důležitým nástrojem v diagnostice a identifikaci obav o veřejné zdraví, jako jsou ohniska epidemického tyfu.

Postup

Weil – Felixův test lze provést buď jako sklíčko nebo tubus. The antigeny nezbytné (OX2, OX19 a OXK) lze získat komerčně.

Posuvná metoda

Na pevný povrch (skleněné podložní sklíčko, dlaždice, karta) se umístí malé množství (50–100 μL) séra pacienta. Přidá se jedna kapka požadovaného antigenu a výsledná suspenze se promíchá a poté se po dobu jedné minuty otáčí. Viditelná aglutinace svědčí o pozitivním výsledku a zhruba odpovídá a titr 1:20. Pozitivní výsledky lze dále titrovat pomocí trubicové metody, která je náročnější na práci.[Citace je zapotřebí ]

Metoda trubice

Použití 0,25% fenol solný roztok jako ředidlo, se vyrobí řada zkumavek obsahujících dvojnásobná ředění séra pacienta s konečným objemem 1 ml. Do každé zkumavky se přidá kapka suspenze antigenu a směs se inkubuje při teplotě 50–55 ° C po dobu 4–6 hodin. Pozitivní zkumavka by vykazovala viditelnou flokulaci nebo granulaci, která se zvýrazní, když se zkumavka jemně promíchá. Titr odpovídá nejředěnější zkumavce v sérii, která stále vykazuje pozitivitu. Obecně se titr ≥ 1: 320 považuje za diagnostický.[Citace je zapotřebí ]

Reference

  1. ^ Kim, Hwan Keun; Premaratna, Ranjan; Missiakas, Dominique M .; Schneewind, Olaf (2019-08-14). „Antigen Rickettsia conorii O je terčem baktericidních protilátek Weil – Felix“. Sborník Národní akademie věd. 116 (39): 19659–19664. doi:10.1073 / pnas.1911922116. ISSN  0027-8424. PMC  6765297. PMID  31413191.
  2. ^ Cruikshank, R. Weil-Felixova reakce na tyfus. 1927. J Hyg (Lond) 27 (1): 64–69.
  3. ^ Walker, DH a DH Bouyer. Rickettsia a Orientia. In: Manuál klinické mikrobiologie, 9. vydání. 2007. ASM Press: Washington, DC. str. 1042
  4. ^ Kularatne, SAM a IB Gawarammana. Platnost Weil-Felixova testu v diagnostice akutních rickettsiálních infekcí na Srí Lance. 2009. T Roy Soc Trop Med Hyg 103: 423–424.
  5. ^ Kaplan, JE a LB Schonberger. 1986. Citlivost různých sérologických testů při diagnostice skvrnité horečky Rocky Mountain. Am J Trop Med Hyg 35: 840–844.