Diagnóza malárie - Diagnosis of malaria
Základna z malárie diagnóza byla mikroskopické vyšetření krve s využitím krevní filmy.[1] Ačkoli krev je nejčastěji používaným vzorkem pro stanovení diagnózy, sliny a moč byly vyšetřovány jako alternativní, méně invazivní vzorky.[2] Více nedávno, moderní techniky využívající testy antigenu nebo polymerázová řetězová reakce byly objeveny, i když v endemických oblastech malárie nejsou široce implementovány.[3][4] Oblasti, které si nemohou dovolit laboratorní diagnostické testy, často používají jako indikaci k léčbě malárie pouze subjektivní horečku.
Krevní filmy
Druh | Vzhled | Periodicita | Játra přetrvávají |
---|---|---|---|
Plasmodium vivax | ![]() | tercián | Ano |
Plasmodium ovale | ![]() | tercián | Ne |
Plasmodium falciparum | ![]() | tercián | Ne |
Plasmodium malariae | ![]() | quartan | Ne |
Nejekonomičtější, preferovanou a nejspolehlivější diagnózou malárie je mikroskopické vyšetření krevní filmy protože každý ze čtyř hlavních druhů parazitů má charakteristické vlastnosti. Tradičně se používají dva druhy krevního filmu. Tenké filmy jsou podobné obvyklým krevním filmům a umožňují identifikaci druhů, protože vzhled parazita je v tomto přípravku nejlépe zachován. Silné filmy umožňují mikroskopovi promítat větší objem krve a jsou asi jedenáctkrát citlivější než tenký film, takže zachycení nízkých úrovní infekce je na tlustém filmu snazší, ale vzhled parazita je mnohem více zkreslený, a proto rozlišování mezi různými druhy může být mnohem obtížnější. S ohledem na výhody a nevýhody hustých i tenkých nátěrů je nutné při pokusu o definitivní diagnózu použít oba nátěry.[5]
Z tlustého filmu může zkušený mikroskop zjistit úrovně parazitů (nebo parazitemie ) jen 5 parazitů /µL krev.[6] Diagnóza druhů může být obtížná, protože rané trofozoity („prstencová forma“) všech čtyř druhů vypadají podobně a nikdy není možné diagnostikovat druhy na základě jediné prstencové formy; identifikace druhů je vždy založena na několika trophozoitech.
Vzhledem k tomu, že malárie je méně rozšířená v důsledku zásahů, jako jsou síťky do postele, význam přesné diagnostiky roste. Je to proto, že předpoklad, že každý pacient s horečkou má malárii, se stává méně přesným. Z tohoto důvodu probíhá výzkum zaměřený na vývoj řešení pro mikroskopii s nízkými náklady Globální jih.[7]
Plasmodium malariae a P. knowlesi (což je nejčastější příčina malárie v Jihovýchodní Asie ) vypadají pod mikroskopem velmi podobně. Nicméně, P. knowlesi parazitémie se zvyšuje velmi rychle a způsobuje závažnější onemocnění než P. malariae, takže je důležité rychle identifikovat a léčit infekce. Proto moderní metody, jako je PCR (viz níže „Molekulární metody“) nebo monoklonální protilátka v této části světa by se měly používat panely, které je dokážou rozlišit.[8]
Antigenové testy
Pro oblasti, kde není k dispozici mikroskopie nebo kde nemají laboratorní pracovníci zkušenosti s diagnostikou malárie, existují komerční testy na detekci antigenu, které vyžadují pouze kapku krve.[9] Imunochromatografické testy (nazývané také: Rychlé diagnostické testy na malárii, Antigen-Capture Assay nebo "Měrky ") byly vyvinuty, distribuovány a testovány v terénu. Tyto testy používají prstovou nebo žilní krev, kompletní test trvá celkem 15–20 minut a výsledky se vizuálně odečítají jako přítomnost nebo nepřítomnost barevných pruhů na měrce takže jsou vhodné pro použití v terénu. Prahová hodnota detekce pomocí těchto rychlých diagnostických testů je v rozmezí 100 parazitů / µl krve (komerční soupravy se mohou pohybovat od 0,002% do 0,1% parazitemie) ve srovnání s 5 pomocí tlustého filmu Nevýhodou je, že měrky jsou kvalitativní, ale ne kvantitativní - mohou určit, zda jsou paraziti přítomni v krvi, ale ne kolik.
Byly použity první rychlé diagnostické testy Plasmodium glutamát dehydrogenáza jako antigen.[3]PGluDH byl brzy nahrazen Plasmodium laktátdehydrogenáza (pLDH). Podle toho monoklonální protilátky Tento typ testu může rozlišovat mezi různými druhy lidských parazitů malárie, kvůli antigenním rozdílům mezi jejich izoenzymy pLDH. Testy protilátek mohou být také namířeny proti jiným malarickým antigenům, jako je P. falciparum specifický HPR2.
Moderní rychlé diagnostické testy na malárii často zahrnují kombinaci dvou antigenů, jako je a P. falciparum. specifický antigen, např. protein II bohatý na histidiny (HRP II) a buď a P. vivax specifický antigen, např. P. vivax LDH nebo antigen citlivý na všechny plasmodium druhy, které ovlivňují člověka, např. pLDH. Takové testy nemají a citlivost 100% a pokud je to možné, mělo by být také provedeno mikroskopické vyšetření krevních filmů.
Molekulární metody
Molekulární metody jsou k dispozici v některých klinických laboratořích a rychlé testy v reálném čase (například QT-NASBA založeno na polymerázová řetězová reakce )[4] jsou vyvíjeny s nadějí, že je bude možné nasadit v endemických oblastech.
PCR (a další molekulární metody) je přesnější než mikroskopie. Je to však drahé a vyžaduje to specializovanou laboratoř. Úrovně parazitémie navíc nemusí nutně souviset s progresí onemocnění, zvláště když je parazit schopen přilnout ke stěnám cév. Proto je třeba vyvinout citlivější diagnostické nástroje s nízkou technologií, aby bylo možné detekovat nízkou hladinu parazitémie v terénu.[10]
Dalším přístupem je detekce vedlejší produkt hemoglobinu který se vyskytuje u parazitů malárie hodujících se na červených krvinkách, ale nenachází se v normálních krvinkách. Může to být rychlejší, jednodušší a přesnější než kterákoli jiná metoda. Výzkumní pracovníci v Rice University publikovali předklinickou studii své nové technologie, která dokáže detekovat i jedinou buňku infikovanou malárií mezi miliony normálních buněk.[11][12] Tvrdí, že může být provozován nelékařským personálem, produkuje nulové falešně pozitivní hodnoty a nepotřebuje jehlu ani žádné poškození.
Nadměrná a chybná diagnóza
Několik nedávných studií dokumentovalo nadměrnou diagnózu malárie jako přetrvávající problém na celém světě, ale zejména v afrických zemích.[13][14] Výsledkem nadměrné diagnózy je nadměrná inflace skutečné míry malárie hlášené na místní a národní úrovni.[15] Zdravotnická zařízení mají tendenci nadměrně diagnostikovat malárii u pacientů s příznaky, jako je horečka, v důsledku tradičního vnímání jako „jakákoli horečka je ekvivalentní malárii“[15] a problémy související s laboratorními testy (například vysoká míra falešné pozitivity diagnózy nekvalifikovaným personálem [16]). Nadměrná diagnóza malárie vede k nedostatečné léčbě jiných stavů vyvolávajících horečku, k předepisování antimalarik [17][15] a přehnané vnímání vysoké endemicity malárie v oblastech, které již pro tuto infekci nejsou endemické.[15]
Subjektivní diagnóza
Oblasti, které si nemohou dovolit laboratorní diagnostické testy, často používají jako indikaci k léčbě malárie pouze subjektivní horečku. S použitím Giemsových obarvených krevních nátěrů od dětí v Malawi jedna studie ukázala, že když byly jako indikace léčby použity klinické prediktory (teplota konečníku, bledost nehtů a splenomegalie), namísto použití pouze subjektivních horeček v anamnéze, správná diagnóza se zvýšila ze % až 41% případů a zbytečná léčba malárie byla významně snížena.[10]
Rozdíl
Horečka a septický šok jsou obvykle špatně diagnostikovány jako závažná malárie Afrika, což vedlo k selhání léčby jiných život ohrožujících nemocí. V endemických oblastech s malárií parazitemie nezajišťuje diagnózu těžké malárie, protože parazitémie může být vedlejším účinkem k dalšímu souběžnému onemocnění. Nedávná vyšetřování naznačují, že malarický retinopatie je lepší (kolektivní citlivost 95% a specificita 90%) než jakýkoli jiný klinický nebo laboratorní znak pro rozlišení malárie od nemalaria kóma.[18]
Kvantitativní Buffy Coat
Kvantitativní buffy coat (QBC) je laboratorní test k detekci infekce malárií nebo jinými krevními parazity. Krev je odebrána do QBC kapilární trubice, která je potažena akridinovou oranžovou barvou (fluorescenční barvivo) a odstředěna; fluoreskující paraziti pak mohou být pozorováni pod ultrafialovým světlem na rozhraní mezi červenými krvinkami a buffy coat. Tento test je citlivější než běžný hustý nátěr, je však nespolehlivý pro diferenciální diagnostiku druhů parazitů.[19]
V případech extrémně nízkého počtu bílých krvinek může být obtížné provést manuální rozdíl různých typů bílých krvinek a je prakticky nemožné získat automatický rozdíl. V takových případech může lékařský technolog získat buffy coat, ze kterého je vyroben krevní nátěr. Tento nátěr obsahuje mnohem vyšší počet bílých krvinek než plná krev.
Reference
- ^ Krafts K, Hempelmann E, Oleksyn B (2011). „Barva fialová: od královské rodiny po laboratoř, s omluvou Malachowskému“. Biotech Histochem. 86 (1): 7–35. doi:10.3109/10520295.2010.515490. PMID 21235291.
- ^ Sutherland CJ, Hallett R (2009). „Detekce parazitů malárie mimo krev“. J Infect Dis. 199 (11): 1561–3. doi:10.1086/598857. PMID 19432543.
- ^ A b Ling IT .; Cooksley S .; Bates PA .; Hempelmann E .; Wilson RJM. (1986). "Protilátky proti glutamátdehydrogenáze z Plasmodium falciparum" (PDF). Parazitologie. 92 (2): 313–24. doi:10.1017 / S0031182000064088. PMID 3086819.
- ^ A b Pánská PF; Schoone GJ; Kager PA; Schallig HDFH. (2006). „Detekce a identifikace lidských druhů Plasmodium s kvantitativní amplifikací sekvencí nukleových kyselin v reálném čase“. Malárie Journal. 5 (80): 80. doi:10.1186/1475-2875-5-80. PMC 1592503. PMID 17018138.
- ^ Warhurst DC, Williams JE (1996). „Laboratorní diagnostika malárie“. J Clin Pathol. 49 (7): 533–8. doi:10.1136 / jcp.49.7.533. PMC 500564. PMID 8813948.
- ^ Richard L. Guerrant; David H. Walker; Peter F. Weller (2006). Tropické infekční nemoci: principy, patogeny a praxe. Elsevier Churchill Livingstone. ISBN 978-0-443-06668-9. Citováno 22. června 2011.
- ^ Bowden AK, Durr NJ, Erickson D, Ozcan A, Ramanujam N, Jacques PV (2020). „Optické technologie pro zlepšení zdravotní péče v nastavení s nízkými zdroji: úvod k problému s funkcemi“. Biomedicínská optika Express. 11 (6): 3091–3094. doi:10.1364 / BOE.397698. PMC 7316015.
- ^ McCutchan, Thomas F .; Piper, Robert C .; Makler, Michael T. (listopad 2008). "Použití malárského rychlého diagnostického testu k identifikaci Plasmodium knowlesi Infekce". Vznikající infekční nemoci. 14 (11): 1750–2. doi:10.3201 / eid1411.080840. PMC 2630758. PMID 18976561.
- ^ Pattanasin S, Proux S, Chompasuk D, Luwiradaj K, Jacquier P, Looareesuwan S, Nosten F (2003). „Vyhodnocení nového testu na laktátdehydrogenázu Plasmodium (OptiMAL-IT) pro detekci malárie“. Transact Royal Soc Trop Med. 97 (6): 672–4. doi:10.1016 / S0035-9203 (03) 80100-1. PMID 16117960.
- ^ A b Redd S, Kazembe P, Luby S, Nwanyanwu O, Hightower A, Ziba C, Wirima J, Chitsulo L, Franco C, Olivar M (2006). "Klinický algoritmus pro léčbu Plasmodium falciparum malárie u dětí ". Lanceta. 347 (8996): 223–7. doi:10.1016 / S0140-6736 (96) 90404-3. PMID 8551881.
- ^ "Parní nanobubliny rychle detekují malárii přes kůži Archivováno 08.01.2014 na Wayback Machine ", news.rice.edu
- ^ „Hemozoiny generované parní nanobubliny pro transdermální detekci malárie bez použití činidel a jehly“, Ekaterina Y. L., et. al. DOI:10.1073 / pnas.1316253111
- ^ Ghai, Ria R .; Thurber, Mary I .; El Bakry, Azza; Chapman, Colin A .; Goldberg, Tony L. (07.09.2016). „Hodnocení více metod u pacientů s horečnatým onemocněním odhaluje nadměrnou diagnózu malárie ve venkovské Ugandě“. Malárie Journal. 15 (1): 460. doi:10.1186 / s12936-016-1502-4. ISSN 1475-2875. PMC 5015337. PMID 27604542.
- ^ Reyburn, Hugh; Mbatia, Redepmta; Drakeley, Chris; Carneiro, Ilona; Mwakasungula, Emmanuel; Mwerinde, Ombeni; Saganda, Kapalala; Shao, John; Kitua, Andrew (2004-11-20). „Nadměrná diagnóza malárie u pacientů s těžkým horečnatým onemocněním v Tanzanii: prospektivní studie“. BMJ (Clinical Research Ed.). 329 (7476): 1212. doi:10.1136 / bmj.38251,658229,55. ISSN 1756-1833. PMC 529364. PMID 15542534.
- ^ A b C d Mwanziva, Charles; Shekalaghe, Seif; Ndaro, Arnold; Mengerink, Bianca; Megiroo, Simon; Mosha, Frank; Sauerwein, Robert; Drakeley, Chris; Gosling, Roly (05.11.2008). „Nadužívání kombinované léčby artemisininem v Mto wa Mbu (řeka komárů), oblasti nesprávně interpretované jako vysoce endemická pro malárii“. Malárie Journal. 7: 232. doi:10.1186/1475-2875-7-232. ISSN 1475-2875. PMC 2588630. PMID 18986520.
- ^ Jegorov, Sergej; Galiwango, Ronald M .; Ssemaganda, Aloysious; Muwanga, Mojžíš; Wesonga, Irene; Miiro, George; Drajole, David A .; Kain, Kevin C .; Kiwanuka, Noah (2016-11-14). „Nízká prevalence laboratorně potvrzené malárie u klinicky diagnostikovaných dospělých žen z ugandské čtvrti Wakiso“. Malárie Journal. 15 (1): 555. doi:10.1186 / s12936-016-1604-z. ISSN 1475-2875. PMC 5109652. PMID 27842555.
- ^ Salomão, Cristolde A .; Sacarlal, Jahit; Chilundo, Baltazar; Gudo, Eduardo Samo (01.12.2015). „Postupy předepisování malárie v Mosambiku: špatné dodržování národních protokolů o léčbě malárie ve 22 zdravotnických zařízeních“. Malárie Journal. 14: 483. doi:10.1186 / s12936-015-0996-5. ISSN 1475-2875. PMC 4667420. PMID 26628068.
- ^ Beare NA, Taylor TE, Harding SP, Lewallen S, Molyneux ME (listopad 2006). „Malariální retinopatie: nově zavedený diagnostický znak u těžké malárie“. Dopoledne. J. Trop. Med. Hyg. 75 (5): 790–7. doi:10.4269 / ajtmh.2006.75.790. PMC 2367432. PMID 17123967.
- ^ Adeoye GO, Nga IC (prosinec 2007). „Srovnání techniky kvantitativního Buffy Coat (QBC) s Giemsa obarveným tlustým filmem (GTF) pro diagnostiku malárie“. Parazitol. Int. 56 (4): 308–12. doi:10.1016 / j.parint.2007.06.007. PMID 17683979.