Genetické monitorování - Genetic monitoring

Genetické monitorování je použití molekulární markery i) identifikovat jednotlivce, druhy nebo populace nebo ii) kvantifikovat změny v populační genetika metriky (např efektivní velikost populace, genetická rozmanitost a velikost populace) v průběhu času. Genetické monitorování lze tedy použít k detekci změn v hojnosti druhů a / nebo rozmanitosti a stalo se důležitým nástrojem v obou případech zachování a hospodářská zvířata řízení. Typy molekulárních markerů používaných k monitorování populací jsou nejčastěji mitochondriální, mikrosatelity nebo jedno-nukleotidové polymorfismy (SNP), zatímco dřívější studie také využívaly alozym data. Za důležitou je považována také genová rozmanitost druhů biologická rozmanitost metrika pro implementaci Úmluva o biologické rozmanitosti.[1]

Typy

Mezi typy populačních změn, které lze detekovat genetickým monitorováním, patří růst a pokles populace, šíření patogenů, adaptace na změny prostředí, hybridizace, introgrese a fragmentace stanovišť. Většina z těchto změn je sledována pomocí „neutrálního“ genetické markery (markery, u nichž mutační změny nemění jejich adaptivitu zdatnost v rámci populace). Markery ukazující adaptivní reakce na změnu prostředí však mohou být „neutrální“ (např. Mutační změny ovlivňují jejich relativní zdatnost v populaci).

Kategorie genetického monitorování podle definice Schwartze et al. 2007[2]

Byly definovány dvě široké kategorie genetického monitorování:[2] Kategorie I zahrnuje použití genetických markerů jako identifikátorů jednotlivců (kategorie Ia), populací a druhů (kategorie Ib) pro tradiční monitorování populace. Kategorie II představuje použití genetických markerů k monitorování změn populační genetika parametry, které zahrnují odhady efektivní velikost populace (Ne), genetické variace, směšování populace, struktura a migrace.

Příklady

Odhad hojnosti a parametrů historie života - kategorie Ia

Na individuální úrovni může genetická identifikace umožnit odhad hojnosti populace a míry nárůstu populace v rámci vychytávání značky modely. Množství kryptických nebo nepolapitelných druhů, které je obtížné sledovat, lze odhadnout pomocí sběru neinvazivních biologických vzorků v terénu (např. Peří, scat nebo srst) a jejich použití k identifikaci jednotlivců mikrosatelit nebo jedno-nukleotidový polymorfismus (SNP) genotypizace. Toto sčítání jednotlivců lze poté použít k odhadu hojnosti populace pomocí analýzy opětovného získání značky. Například tato technika byla použita ke sledování populací Grizzly,[3] štětec-sledoval skalní klokan,[4] bengálský tygr[5] a levhart sněžný.[6] Míra populačního růstu je produktem míry populace nábor a přežití, a lze jej odhadnout pomocí otevřeného vychytávání značky modely. Například DNA z peří vrhaných východní císařský orel ukazuje nižší kumulativní přežití v průběhu času, než u jiných dlouhověkých dravců.[7]

  • Grizzly

  • Klokan skalní

  • Levhart sněžný

  • Východní císařský orel

Identifikace druhů - kategorie Ib

Použití molekulárně genetických technik k identifikaci druhů může být užitečné z mnoha důvodů. Identifikaci druhů ve volné přírodě lze použít k detekci změn v populačních rozsazích nebo obsazení místa, rychlosti výskytu hybridizace a vznik a šíření patogeny a invazivní druhy. Byly zkoumány změny v populačních rozsazích Iberský rys[8] a Rosomák,[9] při sledování wrestlope bezohledný pstruh ukazuje rozšířenou probíhající hybridizaci se zavedenou pstruh duhový [10] (vidět cutbow ) a Rys ostrovid -rys hybridy byly zjištěny na jižním okraji současného populačního rozmezí rysa.[11][12] Vznik a šíření patogeny lze sledovat pomocí diagnostických molekulárních testů - například identifikace šíření virus západního Nilu mezi komáry ve východních USA k identifikaci pravděpodobného geografického původu infekce[13] a identifikaci genových lokusů spojených s citlivostí na parazity v ovce tlustorohá.[14] Genetické monitorování invazivních druhů je z hlediska ochrany a ekonomického zájmu, protože invaze často ovlivňují ekologii a rozsah původních druhů a mohou také přinést rizika hybridizace (např. copepods,[15] Kachny,[16] promlčená sova a skvrnitá sova,[17] a Lessepsian králík[18]).

  • Iberský rys

  • Rosomák

  • Kanadský rys

  • Skvrnitá sova

Identifikace druhů je rovněž velmi užitečná při monitorování rybolov a obchod s divočinou, kde je konvenční vizuální identifikace zmasakrovaných nebo napuštěných produktů obtížná nebo nemožná.[19] Monitorování obchodu a spotřeby druhů z hlediska ochrany lze provádět pomocí molekulární amplifikace a identifikace masa nebo ryb získaných z trhů. Například genetické průzkumy trhu byly použity k identifikaci chráněných druhů a populací velryb (např. Severní Pacifik plejtvák malý ) a druhy delfínů, které se objevují na trhu.[20] Další průzkumy tržního obchodu se zaměřily na ploutvonožci,[21] mořští koně[22] a žraloci.[23] Tyto průzkumy se používají k zajištění průběžného sledování množství a pohybu produktů rybolovu a volně žijících živočichů na trzích a ke zjišťování pytláctví nebo jiné nezákonné, nehlášené nebo neregulované (NNN) vykořisťování [19] (např. NNN rybolov ).

Ačkoli se počáteční aplikace zaměřovaly na identifikaci druhů a hodnocení populace, průzkumy trhu také poskytují příležitost pro řadu vyšetřování molekulární ekologie, včetně odchytu a vychytávání, testů přiřazení a modelování populace.[19] Tento vývoj je potenciálně relevantní pro genetické monitorování kategorie II.

Monitorování genetických parametrů populace - kategorie II

Monitorování populačních změn genetickými prostředky lze provádět zpětně, analýzou „historická“ DNA získané z muzejně archivovaných druhů a srovnání se současnou DNA tohoto druhu. Může být také použit jako nástroj pro hodnocení probíhajících změn stavu a perzistence současných populací. Genetické míry relativní změny populace zahrnují změny v rozmanitosti (např. heterozygotnost a alelické bohatství). Monitorování relativních populačních změn prostřednictvím těchto metrik bylo prováděno zpětně pro Beringian bizon,[24] Galapágy želva,[25] hákování,[26] Atlantský losos,[27] štika severní,[28] Kanic Nového Zélandu,[29] Steelhead pstruh,[30] větší prérijní kuře,[31] Mauricijská poštolka[32] a Hectorův delfín[33] a je předmětem mnoha probíhajících studií, včetně dánských a švédských pstruh potoční populace.[34][35] Měření absolutních změn populace (např. efektivní velikost populace (Ne)) lze provést měřením změn frekvencí alely populace („Ftemporal“) nebo úrovní vazebná nerovnováha v průběhu času („LDNe“), zatímco měnící se vzorce toku genů mezi populacemi lze také sledovat odhadem rozdílů ve frekvencích alel mezi populacemi v průběhu času. Mezi předměty těchto studií patří medvěd grizzly,[3][36][37] treska,[38] jelen,[39] Leopardí žáby[40] a Barel Medic.[41][42]

  • Galapágy obří želva

  • Atlantský losos

  • Hectorův delfín

  • Leopardí žába

Genetické monitorování se také stále častěji používá ve studiích, které sledují změny prostředí prostřednictvím změn ve frekvenci adaptivně vybraných markerů. Například geneticky řízená fotoperiodická odezva (doba hibernace) komárů džbánů (Wyeomyia smithii ) se posunul v reakci na delší vegetační období rostlin džbánu způsobené teplejším počasím.[43] Experimentální pšenice populace pěstované v kontrastních prostředích po dobu 12 generací zjistily, že se změny v kvetoucí čas úzce koreloval s regulačními změnami v jednom genu, což naznačuje cestu pro genetickou adaptaci na měnící se klima v rostlinách.[44][45]

Genetické monitorování je také užitečné při monitorování probíhajícího zdravotního stavu malých přemístěných populací. Dobré příklady toho lze nalézt pro Ptáci Nového Zélandu mnohé z nich byly v minulém století značně zasaženy ničením stanovišť a výskytem mnoha savčích predátorů a v poslední době se staly součástí relokačních programů, které přenášejí několik „zakladatelských“ jedinců na pobřežní oblasti bez predátorů „Ekologické“ ostrovy. Např. černý červenka,[46] a kakapo.[47]

  • Sudový zdravotník

  • Pšenice obecná

  • Džbán rostlin komár

  • Kakapo - novozélandský noční papoušek

Stav genetického monitorování ve vědě

V únoru 2007 se konal mezinárodní summit v Institutu životního prostředí v UCLA týkající se „Evoluční změny v lidských změněných prostředích: mezinárodní summit, který promění vědu v politiku“. To vedlo ke speciálnímu vydání časopisu Molekulární ekologie[48] organizované kolem našeho chápání genetických účinků ve třech hlavních kategoriích: (i) narušení stanoviště a klimatická změna ii) využívání a chov v zajetí (iii) invazivní druhy a patogeny.

V roce 2007 Pracovní skupina o genetickém monitorování bylo zahájeno se společnou podporou NCEAS[49] a NESCent[50] dále rozvíjet příslušné techniky a poskytovat obecné pokyny k monitorování pro tvůrce politik a manažery.[51]

V současné době je toto téma zahrnuto v několika známých učebnicích, včetně McComb et al. (2010) a Allendorf et al. (2013)

Genetické monitorování v agenturách zabývajících se přírodními zdroji

Mnoho přírodní zdroj agentury považují genetické monitorování za nákladově efektivní a obhájitelný způsob monitorování populací ryb a volně žijících živočichů. Jako takové vědci v Americký geologický průzkum, Lesní služba USA,[52] Služba národního parku, a Národní služba pro mořský rybolov vyvíjejí nové metody a nástroje pro použití genetického monitorování a používají tyto nástroje v širokém zeměpisném měřítku.[2][36] V současné době USFWS hostí web, který informuje manažery o nejlepším způsobu použití genetických nástrojů pro monitorování (viz níže).

Viz také

Reference

  1. ^ Webové stránky Úmluvy o biologické rozmanitosti
  2. ^ A b C Schwartz, M. K.; et al. (2007). „Genetické monitorování jako slibný nástroj pro zachování a řízení“ (PDF). Trendy Ecol. Evol. 22 (1): 25–33. doi:10.1016 / j.tree.2006.08.009. PMID  16962204.
  3. ^ A b Boulanger, J .; et al. (2004). „Monitorování populačních trendů a demografie medvědů grizzly pomocí metod zpětného vychytávání DNA v oblasti jezera Owikeno v Britské Kolumbii“. Kanadský žurnál zoologie. 82 (8): 1267–1277. doi:10.1139 / Z04-100.
  4. ^ Piggott, M.P .; et al. (2006). „Odhad velikosti populace ohrožených kolonií skalních klokanů (Petrogale penicillata) pomocí fekální DNA“. Mol. Ecol. 15 (1): 81–91. doi:10.1111 / j.1365-294X.2005.02783.x. PMID  16367832.
  5. ^ Bhagavatula, J .; Singh, L. (2006). „Genotypizace vzorků výkalů bengálského tygra Panthera tigris tigris pro odhad populace: pilotní studie“. BMC Genet. 7: 48. doi:10.1186/1471-2156-7-48. PMC  1636336. PMID  17044939.
  6. ^ Jaňecka, J.E .; et al. (2008). „Monitorování populace levhartů sněhových pomocí neinvazivního odběru vzorků scat: pilotní studie“. Anim. Conserv. 11 (5): 401–411. doi:10.1111 / j.1469-1795.2008.00195.x.
  7. ^ Rudnick, J. A.; et al. (2005). „Používání přirozeně vrhaného peří k identifikaci jednotlivce, analýzám genetického rodičovství a monitorování populace ohrožené populace východní orlice říční (Aquila heliaca) z Kazachstánu.“ Mol. Ecol. 14 (10): 2959–2967. doi:10.1111 / j.1365-294X.2005.02641.x. PMID  16101766.
  8. ^ Fernández, N .; et al. (2006). „Hodnocení krajiny v ochraně: vzorkování molekul a modelování stanovišť pro rysa iberského“. Ecol. Appl. 16 (3): 1037–1049. doi:10.1890 / 1051-0761 (2006) 016 [1037: LEICMS] 2.0.CO; 2. PMID  16827001.
  9. ^ Schwartz, M.K .; et al. (2007). „Odvození geografické izolace vlkodavů v Kalifornii pomocí historické DNA“ (PDF). J. Wildl. Spravovat. 71 (7): 2170–2179. doi:10.2193/2007-026. S2CID  35396299.
  10. ^ Hitt, N.P .; et al. (2003). „Šíření hybridizace mezi původním pstruhem bezohledným westslope, Oncorhynchus clarki lewisi a nepůvodním pstruhem duhovým, Oncorhynchus mykiss“. Umět. J. Fish. Aquat. Sci. 60 (12): 1440–1451. doi:10.1139 / F03-125.
  11. ^ Homyack, J. A.; et al. (2008). „Canada lynx-bobcat (Lynx canadensis x L.rufus) hybridy na jižním okraji oblasti rysa v Maine, Minnesotě a New Brunswicku“ (PDF). Dopoledne. Midl. Nat. 159: 504–508. doi:10.1674 / 0003-0031 (2008) 159 [504: CLLCLR] 2.0.CO; 2.
  12. ^ Schwartz, M.K .; et al. (2004). „Hybridizace mezi rysem kanadským a bobcats: genetické výsledky a důsledky pro management“ (PDF). Conserv. Genet. 5 (3): 349–355. doi:10.1023 / B: COGE.0000031141.47148.8b. S2CID  16786563.
  13. ^ Kilpatrick, A.M .; et al. (2006). „Epidemie virů západního Nilu v Severní Americe jsou způsobeny posuny v chování při krmení komárů“. PLOS Biol. 4 (4): 606–610. doi:10.1371 / journal.pbio.0040082. PMC  1382011. PMID  16494532.
  14. ^ Luikart, G .; et al. (2008). „Varianta mikrosatelitu genů kandidátských genů je spojena s parazitismem u divokých ovcí velkého (PDF). Biol. Lett. 4 (2): 228–231. doi:10.1098 / rsbl.2007.0633. PMC  2429941. PMID  18270161.
  15. ^ Lee, C.E. (1999). „Rychlé a opakované invaze sladké vody kopytníkem Eurytemora affinis“ (PDF). Vývoj. 53 (5): 1423–1434. doi:10.1111 / j.1558-5646.1999.tb05407.x. PMID  28565555.
  16. ^ Seyoum, S; Tringali, MD; Bielefeld, RR; Feddersen, JC; Benedict Jr, RJ; Fanning, AT; Barthel, B; Curtis, C; Puchulutegui, C; Roberts, ACM; Villanova Jr., VL; Tucker, EC (2012). „Padesát devět mikrosatelitních markerů pro hybridní klasifikační studie zahrnující endemické kachny skvrnité na Floridě (Anas fulvigula fulvigula) a invazivní divoké kachny (A. platyrhynchos)“. Zdroje pro zachování genetiky. 4 (3): 681–687. doi:10.1007 / s12686-012-9622-9. S2CID  16072813.
  17. ^ Haig, S.M .; et al. (2004). „Genetická identifikace skvrnitých sov, zatarasených sov a jejich hybridů: právní důsledky hybridní identity“. Conserv. Biol. 18 (5): 1347–1357. doi:10.1111 / j.1523-1739.2004.00206.x.
  18. ^ Azzurro, E .; et al. (2006). „Genetika raných stadií invaze králíka menšího Siganus luridus“ (PDF). J. Exp. Mar. Biol. Ecol. 333 (2): 190–201. doi:10.1016 / j.jembe.2005.12.002.
  19. ^ A b C Baker, C.S. (2008). „Pravdivější opatření trhu: molekulární ekologie rybolovu a obchodu s divočinou“. Mol. Ecol. 17 (18): 3985–3998. doi:10.1111 / j.1365-294X.2008.03867.x. PMID  18643915.
  20. ^ Baker, C.S .; et al. (2007). „Odhad počtu velryb vstupujících do obchodu pomocí profilování DNA a analýzy zachycení a vychytávání tržních produktů“. Mol. Ecol. 16 (13): 2617–2626. doi:10.1111 / j.1365-294X.2007.03317.x. PMID  17594434.
  21. ^ Malik, S .; et al. (1997). „Pinniped penises in trade: a molekulárně genetické vyšetřování“. Conserv. Biol. 11 (6): 1365–1374. doi:10.1046 / j.1523-1739.1997.96125.x.
  22. ^ Sanders, J.G .; et al. (2008). „Špička ocasu: molekulární identifikace mořských koníků k prodeji v lékárnách a kuriozitách v Kalifornii“. Conserv. Genet. 9: 65–71. doi:10.1007 / s10592-007-9308-0. S2CID  15874239.
  23. ^ Clarke, S.C .; et al. (2006). „Identifikace druhového složení a podílu žraloků na trhu hongkongských žraločích ploutví na základě molekulární genetiky a obchodních záznamů“. Conserv. Biol. 20 (1): 201–211. doi:10.1111 / j.1523-1739.2005.00247.x. PMID  16909673.
  24. ^ Shapiro, B .; et al. (2004). „Vzestup a pád beringovského stepního bizona“. Věda. 306 (5701): 1561–1565. Bibcode:2004Sci ... 306.1561S. doi:10.1126 / science.1101074. PMID  15567864. S2CID  27134675.
  25. ^ Poulakakis, N .; et al. (2008). „Historická analýza DNA odhaluje žijící potomky vyhynulého druhu želvy galapágské“ (PDF). Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 105 (40): 15464–15469. doi:10.1073 / pnas.0805340105. PMC  2563078. PMID  18809928.
  26. ^ Hansen, M. M.; et al. (2006). „Pod vodou, ale ne z dohledu: genetické monitorování efektivní velikosti populace v ohroženém chovu severního moře (Coregonus oxyrhynchus).“ Umět. J. Fish. Aquat. Sci. 63 (4): 780–787. doi:10.1139 / F05-260.
  27. ^ Nielsen, E.E .; et al. (1999). "Genetická variace v čase a prostoru: Mikrosatelitová analýza vyhynulých a existujících populací lososa atlantického". Vývoj. 53 (1): 261–268. doi:10.1111 / j.1558-5646.1999.tb05351.x. PMID  28565198.
  28. ^ Miller, L.M .; Kapuscinski, A.R. (1997). „Historická analýza genetické variace odhaluje nízkou efektivní velikost populace v populaci štiky severní (Esox lucius)“ (PDF). Genetika. 147 (3): 1249–1258. PMC  1208248. PMID  9383067.
  29. ^ Hauser, L .; et al. (2002). „Ztráta mikrosatelitní diverzity a nízká efektivní velikost populace u nadměrně využívané populace kaniců novozélandských (Pagrus auratus)“. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 99 (18): 11742–11747. Bibcode:2002PNAS ... 9911742H. doi:10.1073 / pnas.172242899. PMC  129339. PMID  12185245.
  30. ^ Heath, D.D .; et al. (2002). "Časová změna genetické struktury a efektivní velikosti populace pstruha ocelového (Oncorhynchus mykiss)". Mol. Ecol. 11 (2): 197–214. doi:10.1046 / j.1365-294X.2002.01434.x. PMID  11856422.
  31. ^ Bellinger, M.R. (2003). „Ztráta genetické variace u prérijních kuřat po zúžení populace ve Wisconsinu v USA“. Conserv. Biol. 17 (3): 717–724. doi:10.1046 / j.1523-1739.2003.01581.x.
  32. ^ Groombridge, J. J.; et al. (2000). "'Duchové alely mauricijské poštolky “. Příroda. 403 (6770): 616. doi:10.1038/35001148. PMID  10688188. S2CID  4336347.
  33. ^ Pichler, F.B .; Baker, CS (2000). „Ztráta genetické rozmanitosti u endemického Hektorova delfína kvůli úmrtnosti související s rybolovem“. Proc. R. Soc. Lond. B. 267 (1438): 97–102. doi:10.1098 / rspb.2000.0972. PMC  1690489. PMID  10670959.
  34. ^ Østergaard, S .; et al. (2003). „Dlouhodobé časové změny genetického složení v populacích pstruha potočného (Salmo trutta L.) obývajícího nestabilní prostředí“. Mol. Ecol. 12 (11): 3123–3135. doi:10.1046 / j.1365-294X.2003.01976.x. PMID  14629391.
  35. ^ Palm, S .; et al. (2003). "Efektivní velikost populace a časová genetická změna v pstruzích potočních (Salmo trutta, L.)". Conserv. Genet. 4 (3): 249–264. doi:10.1023 / A: 1024064913094. S2CID  22607075.
  36. ^ A b Kendall, K.C .; et al. (2009). „Demografie a genetická struktura obnovující se populace medvědů grizzly“. J. Wildl. Spravovat. 73: 3–17. doi:10.2193/2008-330. S2CID  52249993.
  37. ^ Proctor, M.F .; et al. (2005). „Genetická analýza odhaluje demografickou fragmentaci medvědů grizzly, které přinášejí zranitelně malé populace“. Proc. R. Soc. Lond. B. 272 (1579): 2409–2416. doi:10.1098 / rspb.2005.3246. PMC  1559960. PMID  16243699.
  38. ^ Poulsen, NA; et al. (2006). „Dlouhodobá stabilita a efektivní velikost populace tresky v Severním a Baltském moři (Gadus morhua)“. Mol. Ecol. 15 (2): 321–331. doi:10.1111 / j.1365-294X.2005.02777.x. PMID  16448403.
  39. ^ Nussey, D.H .; et al. (2005). „Rychle klesající drobná prostorová genetická struktura u jelenice samčí“ (PDF). Mol. Ecol. 14 (11): 3395–3405. doi:10.1111 / j.1365-294X.2005.02692.x. PMID  16156811.
  40. ^ Hoffman, E.A.; Blouin, M.S. (2004). „Historická data vyvracejí nedávnou kontrakci rozsahu jako příčinu nízké genetické rozmanitosti v izolovaných populacích žab (PDF). Mol. Ecol. 13 (2): 271–276. doi:10.1046 / j.1365-294X.2003.02057.x. PMID  14717886.
  41. ^ Bonnin, I .; et al. (2001). "Prostorové efekty a vzácné křížové události v Medicago truncatula (Fabaceae)". Mol. Ecol. 10 (6): 1371–1383. doi:10.1046 / j.1365-294X.2001.01278.x. PMID  11412361.
  42. ^ Siol, M .; et al. (2007). „Efektivní velikost populace spojená se samooplodněním: poučení z časových změn ve frekvencích alel v samooplodné roční Medicago truncatula“. J. Evol. Biol. 20 (6): 2349–2360. doi:10.1111 / j.1420-9101.2007.01409.x. PMID  17956396.
  43. ^ Bradshaw, W.E .; Holzapfel, C.M. (2001). „Genetický posun fotoperiodické odezvy koreloval s globálním oteplováním“. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 98 (25): 14509–14511. doi:10.1073 / pnas.241391498. PMC  64712. PMID  11698659.
  44. ^ Rhoné, B .; et al. (2008). „Pohled na genetické základy klimatické adaptace v experimentálně se vyvíjejících populacích pšenice“. Mol. Ecol. 17 (3): 930–943. doi:10.1111 / j.1365-294X.2007.03619.x. PMID  18194164.
  45. ^ Strasburg, J.L .; Gross, B.L. (2008). „Přizpůsobení se zimě u pšenice: dlouhodobá studie sleduje paralelní fenotypové a genetické změny u tří experimentálních populací pšenice“. Mol. Ecol. 17 (3): 716–718. doi:10.1111 / j.1365-294X.2007.03639.x. PMID  18194165.
  46. ^ Ardern, S.L .; Lambert, D.M. (1997). „Je černý červ v genetickém nebezpečí?“. Mol. Ecol. 6 (1): 21–28. doi:10.1046 / j.1365-294X.1997.00147.x.
  47. ^ Miller, H.C .; et al. (2003). „Minisatelitové profilování DNA detekuje linie a původ v ohroženém kakapu (Strigops habroptilus) i přes nízkou variabilitu mikrosatelitních DNA“. Conserv. Genet. 4 (3): 265–274. doi:10.1023 / A: 1024037601708. S2CID  8877634.
  48. ^ Zpráva o výsledcích a doporučeních mezinárodního summitu o evolučních změnách v prostředích změněných člověkem
  49. ^ Národní centrum pro ekologickou analýzu a syntézu
  50. ^ Národní centrum evoluční syntézy
  51. ^ Genetické monitorování: vývoj nástrojů pro ochranu a správu
  52. ^ Rocky Mountain Research Station Wildlife Genetics Laboratory

externí odkazy