Anti-miRNA oligonukleotidy - Anti-miRNA oligonucleotides - Wikipedia

Tento obrázek je ilustrací anti-miRNA vázané na miRNA hybridizací. Toto je jeden z několika způsobů, kterými mohou AMO interagovat s miRNA v těle. Hybridizací sekvence miRNA je funkce sekvence miRNA neutralizována zabráněním její selektivní vazby na cílovou genetickou informaci. Ačkoli tento diagram ilustruje pouze párování genetických bází mezi miRNA a anti-miRNA sekvencemi, existují specifické chemické modifikace, které jsou umístěny na 3 'a 5' konci anti-miRNA.

Oligonukleotidy anti-miRNA (známé také jako AMO) mají v buněčné mechanice mnoho využití. Tyto synteticky navržené molekuly se používají k neutralizaci mikroRNA (miRNA ) fungují v buňkách pro požadované odpovědi. miRNA jsou komplementární sekvence (≈22 bp) k mRNA, které se účastní štěpení RNA nebo suprese překlad.[1] Regulací miRNA, která reguluje mRNA v buňkách, lze AMO použít jako další regulaci i pro terapeutickou léčbu určitých buněčných poruch. K této regulaci může dojít prostřednictvím a sterický blokovací mechanismus stejně jako hybridizace na miRNA.[2] Tyto interakce v těle mezi miRNA a AMO mohou být pro terapeutika při poruchách, při kterých dochází k nadměrné / nedostatečné expresi nebo odchylky v miRNA vedou k problémům s kódováním. Mezi poruchy spojené s miRNA, které se vyskytují u lidí, patří rakovina, svalová onemocnění, autoimunitní poruchy a viry. Aby bylo možné určit funkčnost určitých AMO, musí být měřena vazebná exprese AMO / miRNA (koncentrace transkriptu) proti expresím izolované miRNA. Přímá detekce různých úrovní genetické exprese umožňuje ukázat vztah mezi AMO a miRNA. To lze zjistit prostřednictvím luciferáza aktivita (bioluminiscence v reakci na cílenou enzymatickou aktivitu). Porozumění sekvencím miRNA zapojeným do těchto onemocnění nám může umožnit použít anti miRNA oligonukleotidy k narušení cest, které vedou k nedostatečné / nadměrné expresi proteinů buněk, které mohou způsobit příznaky těchto onemocnění.

Syntéza

Během návrhu oligonukleotidů anti-miRNA jsou nezbytné úpravy k optimalizaci vazebné afinity, zlepšení rezistence na nukleázy a in vivo musí být zváženo dodání.[3] Existuje několik generací návrhů se snahou vyvinout AMO s vysokou vazebnou afinitou i vysokou specificitou. První generace využívala nukleotidy 2’-O-methyl RNA s fosforothioátovými internukleotidovými vazbami umístěnými na obou koncích, aby zabránila exonukleázový útok. Nedávná studie objevila sloučeninu, N, N-diethyl-4- (4-nitronafthalen-l-ylazo) fenylamin (ZEN), která zlepšila vazebnou afinitu a blokovala degradaci exonukleázy.[4] Tato metoda byla zkombinována s designem první generace k vytvoření nové generace ZEN-AMO se zlepšenou účinností.

S různými složkami AMO lze manipulovat tak, aby ovlivnily vazebnou afinitu a účinnost AMO. 2'-cukr AMO může být upraven tak, aby byl nahrazen fluorem a různými methylovými skupinami, téměř všechny se zvýšením vazebné afinity. Některé z těchto modifikovaných AMO 2'-cukru však vedly k negativním účinkům na růst buněk. Úpravy 5'-3 ' fosfodiesterová páteř Bylo také prokázáno, že vazba na páteřní vazbu fosforothiorát (P-S) má vliv na cílovou afinitu. Ukázalo se, že použití P-S mutace snižuje Tm oligonukleotidu, což vede k nižší cílové afinitě. Posledním požadavkem pro AMO je neshoda specifičnosti a omezení délky. Kvůli miRNA ve stejných rodinách sdílející „seed“ (sdílené) sekvence a liší se jen o pár dalších nukleotidy; jeden AMO může potenciálně cílit na více miRNA sekvencí. Studie však naznačují, že je to obtížné kvůli ztrátě aktivity s nesoulady jednotlivých nukleotidů. Více než tři neshody ukazují úplnou ztrátu aktivity. Změny v délce AMO byly tolerovány mnohem lépe, se změnami jednoho nukleotidu a dvou nukleotidů, které vedly k malé ztrátě aktivity a třem nebo více k celkové ztrátě aktivity. Zkrácení jediného nukleotidu z 3´ konce vedlo k mírnému zlepšení aktivity AMO.[5]

Dodání a detekce

Tento obrázek ukazuje způsob použití zlaté nanočástice a DNA nákladu k zavedení AMO do buněk do in vitro transfekce. Inspirováno obrázkem 1.[6]

Dodání AMO vyžaduje in vitro transfekce do cílových buněk. V současné době existují potíže s konvenčními metodami transfekce, které vedou k nízké účinnosti podávání. Za účelem zvýšení efektivity dodávek AMO bylo v dokumentu z roku 2011 navrženo použití funkcionalizovaných nanočástic zlata. Zlaté nanočástice zvyšují efektivitu dodávek konjugací s DNA nákladu, která se spojuje s AMO pomocí komplementarity. DNA nákladu je připojena k povrchu nanočástic.[6] Protože mnoho variací DNA a RNA je nestabilních in vivo podmínky jsou nosiče, jako jsou nanočástice, nezbytné k ochraně před degenerací nukleázami. Tyto nanočástice jsou užitečné k usnadnění příjmu do buňky a přenosu genetické informace do jádra.[7] Další metodou dodání in vivo podporovanou výsledky u myší je intravenózní injekce AMO. Ukázalo se, že injekce AMO do ocasní žíly do myší byla účinná. Aby byl tento systém užitečný, byly AMO konjugovány s cholesterol pro zvýšenou absorpci do buňky membránou a byly chemicky modifikovány 2'-OMe fosforamidity, aby se zabránilo degradaci AMO.[8]

K detekci přítomnosti a funkčnosti AMO mohou vědci sledovat relativní aktivitu cílového enzymu nebo proteinu miRNA. Tato metoda byla použita při studiu jednotlivých AMO zaměřených na více miRNA, kde byla sledována relativní aktivita luciferázy v buňkách HEK293. Pro stanovení relativních úrovní aktivity luciferázy byla zahrnuta kontrola bez přítomnosti miRNA. Přítomnost funkčních AMO s inhibující miRNA by vedla ke zvýšení aktivity luciferázy v důsledku inaktivace miRNA potlačující aktivitu enzymu.[9]

Poruchy / terapeutika

Bylo zjištěno, že mnoho lidských poruch má určité změny v expresi nebo aberacích zahrnujících miRNA. Bylo zjištěno, že miRNA se účastnila mnoha klíčových regulačních cest, u nichž existuje podezření, že souvisejí s rakovinou, virovými geny a metabolickými cestami,[10] stejně jako svalové poruchy (konkrétně kardiovaskulárně související).[11] Cílením na buňky postižené nesprávnou expresí miRNA lze normální rovnováhu exprese obnovit pomocí AMO. Minimalizací nadměrné exprese a zvýšením nedostatečné exprese s AMO lze některé z těchto genetických poruch potenciálně obejít nebo alespoň jejich příznaky minimalizovat. To se provádí hybridizací AMO na sekvence miRNA, které se podílejí na expresi specifických genů. Jde o nalezení způsobu, jak by AMO mohli úspěšně vykonávat svou funkci v koncentracích, které jsou dostatečné pro úspěch, a zároveň jsou dostatečně nízké, aby se zabránilo toxicitě vektoru a samotných AMO.

Rakovina

Všechno rakoviny jsou mutace v genomech, které způsobují abnormální růst buněk. Stanovení faktorů, které přispívají nebo regulují tento nadměrný růst, může potenciálně vést k preventivní terapeutické léčbě rakoviny. Například chronický lymfocyt leukémie ilustruje oblast miRNA (mir-15 a mir-16), které chybí v genomu při expresi této rakoviny. Zatímco u jiných druhů rakoviny, jako je Burkittův lymfom exprese sekvencí miRNA je amplifikována.[10] To vede k domněnce, že mnoho miRNA má regulační sekvence zapojené do rakoviny. Pokud by měly být lépe regulovány, potenciálně prostřednictvím AMO, mohl by být regulován nástup a progrese rakoviny.

Po studii 540 vzorků nádorů různých typů rakoviny bylo zjištěno, že 15 miRNA bylo upregulováno a 12 bylo downregulováno.[12] Ze studie byl vyvozen závěr, že tyto miRNA sekvence měly účinek na buněčný růst a apoptóza v cele. AMO hrají do rovnice jako tento regulační faktor pro miRNA podílející se na rakovině. Pokud je vázán na jediné ovlivněné místo miRNA, zdá se, že účinek je minimální. Avšak vytvořením sekvencí anti-miRNA oligonukleotidů, které se vážou na všechny tyto implicitní miRNA, došlo ke zvýšení buněčné smrti v rakovinných buňkách.[11] Jedna studie zahrnující antagomiry, různé varianty anti-miRNA oligonukleotidů, se zaměřila na snížení indukovaných nádorů u myší. Po 2 týdnech léčby byl růst nádoru potlačen a regrese byla prokázána ve 30% případů.[13] To ukazuje, že AMO lze použít k úspěšné inhibici rakoviny prostřednictvím miRNA. Tato inhibice je způsobena přímým umlčováním interakce miRNA, které se zase váží na sekvence mRNA, které vytvářejí proteiny v rakovinných buňkách, a také zvýšenou kontrolou buněčných procesů rakoviny.

Svalový rozvoj

Při vývoji tkání v embryích může miRNA hrát roli při upregulaci nebo downregulaci specifického svalového vývoje. miRNA-1 hraje roli ve svalové diferenciaci mezi prekurzorovými buňkami srdečního a kosterního svalstva.[14] Ve vývoji, pokud hladiny prekurzorových buněk nejsou správně regulovány, může to mít za následek svalovou aktivitu hypoplázie. Vytvořením AMO pro tyto známé miRNA podílející se na generování svalů je možné sledovat specifické mechanismy miRNA v celém procesu generování svalů tím, že se v podstatě používá vytvořený AMO k vypnutí miRNA. Tím se zastaví výroba myogenin (transkripční faktor zapojený do myogeneze ). Poté měřením změn v myogeninu ve srovnání se standardní neinhibovanou myogenezí lze určit funkci miRNA buď jako upregulační nebo downregulační syntézu myogeninu.[15] Dalším porozuměním toho, jak určité sekvence miRNA regulují vývoj svalu, lze AMO využít k podpoře normální úrovně produkce myogeninu v organismech, u nichž bylo zjištěno, že obsahují genetické chyby zahrnující myogenezi.

AMO lze také použít k prevenci apoptózy nebo orgánové hypoplázie srdce za přítomnosti vysokých koncentrací peroxidu vodíku. Peroxid vodíku může vyvolat apoptózu oxidační stres. Důvodem je, že oxidační stres způsobený H
2Ó
2 indukuje zvýšenou aktivitu miRNA-1. Tato zvýšená aktivita miRNA-1 potlačuje aktivitu Bcl-2, vyvolávající apoptózu. Avšak vytvořením a zavedením AMO pro miRNA-1 v prostředí oxidačního stresu byla odpověď na H
2Ó
2 se snižuje, čímž se vytváří odolnost vůči oxidačnímu stresu v srdci. Z tohoto důvodu je u srdečních onemocnění sníženo množství apoptózy kardiomyocytů vyvolané peroxidem vodíku.[16] Vzhledem ke snížení úmrtí kardiomyocytů v podmínkách oxidačního stresu pomocí anti-miRNA-1 oligonukleotidu nám regulace miRNA umožňuje hlubší pochopení vývoje srdce a přežití srdečního svalu za podmínek s nízkým obsahem kyslíku.

Autoimunitní reakce a poruchy

Tento diagram ilustruje různá místa v procesu specificity lymfocytů, která mají regulaci miRNA. Každé z těchto míst má potenciál být nadměrně nebo nedostatečně exprimován, což může vést k hyper / hypo-citlivosti imunitního systému. Inspirováno obrázkem 2[17]

Autoimunitní poruchy jsou, když má tělo imunitní reakci na sebe, což způsobuje zánětlivou reakci v těle. Protože autoimunitní poruchy zahrnují abnormality v imunitní systém buňky (tj. B-buňky, T-buňky). Lze odvodit, že miRNA jsou silně exprimovány v oblastech těla, které souvisejí s jejich zráním T a B lymfocyty, například ve slezině a lymfatických uzlinách.[17] Abnormality v miRNA nebo funkce miRNA v post-transkripčním procesu mohou mít za následek zvýšenou citlivost lymfocytů. Kvůli zvýšené citlivosti mohou nyní tyto lymfocyty cílit antigeny že se nemohla dříve vázat, což umožňuje, aby tyto lymfocyty samy zaútočily, pokud se tyto antigeny přirozeně vyskytují v buňkách v těle.[18]

Jedna instance tohoto je Revmatoidní artritida, ve kterém tělo rozkládá své vlastní klouby. Porucha je způsobena nadměrnou expresí specifických shluků miRNA. Tyto shluky způsobují nárůst synoviálních fibroblastů. Kvůli tomuto zvýšenému množství fibroblastů jisté proteázy ' zvyšují se koncentrace, které způsobují rozpad chrupavky v kloubech.[17] Zaměřením na shluky miRNA odpovědné za expresi onemocnění lze snížit zánět způsobený touto poruchou přidáním AMO do postižených oblastí.

Systémový lupus erythematodes způsobuje dlouhodobé poškození orgánů v těle. Šíří se v důsledku environmentálních a genetických faktorů. Cílením na mikroRNA (miR-184, miR-196a, miR-198 a miR-21)[19] které jsou down-regulovány v SLE s AMO v postižených orgánech, může být obnovena normální exprese těchto genů.

Virové studie

Předpokládá se, že buněčné miRNA inhibují expresi virových genů. Ve studii o HIV-1, anti-miRNA inhibitory byly použity k deaktivaci dvou miRNA, které inhibují expresi virového genu, má-miR-29a a 29b. Ukázalo se, že exprese virového genu se zvýšila po zavedení anti-miRNA zaměřených na-miR-29a a 29b. To prokázalo, že miRNA inhibitory byly schopny přímo cílit a zvrátit inhibiční účinek has-miR-29a a 29b na virus HIV-1.[20] Vytvořením AMO bylo možné podrobněji studovat určité genomové sekvence HIV. Další pochopení fungování genomu určitých virů může vědcům umožnit vytvořit preventivní opatření proti těmto virům.

Mechanismus pro regulaci anti-miRNA v případě Virus Epstein-Barr (EBV) se mírně liší od ostatních virových případů, jako je HIV-1. EBV je herpesvirus související s různými druhy rakoviny, který má schopnost exprimovat miRNA, na rozdíl od mnoha jiných virů, které ovlivňují člověka. Na rozdíl od jiných studií, které využívají anti-miRNA jako nástroj k prokázání účinků miRNA, vědci EBV je použili k inhibici miRNA produkovaných virem. MiR-BART5, miRNA EBV, reguluje bílkoviny: str53 Uregulováno p Modulátor Apoptosis (PUMA). Když byl virový mir-BART5 vyčerpán pomocí své anti-miRNA, anti-miR-BART5, byla spuštěna buněčná apoptóza a vyústila v kontrolu choroby a zabila buňky, které byly identifikovány jako infikované.[21]

Další zvláštní případ interakce hostitel-virus zprostředkovaný mikroRNA nastává u viru hepatitidy C (HCV). HCV, který způsobuje akutní infekci jater, často nezjištěnou a progredující do chronické, využívá lidskou miRNA miR-122 k náboru proteinů Argonaute2 na neuzavřený 5 'konec svého genomu RNA, čímž jej maskuje před buněčnou antivirovou odpovědí a stabilizuje to. Tato interakce vedla k vývoji AMO, které cílí na miR-122 ve snaze odstranit virus z jaterních buněk.[22] Nejpokročilejší z těchto sloučenin je miravirsen, a uzamčená nukleová kyselina -DNA mixér, [23] v současné době prochází klinickými zkouškami.[24]Zajímavým aspektem miravirsenu je jeho hlášená schopnost inhibovat nejen zralý miR-122, ale také napadnout struktury kmenové smyčky v prekurzorových molekulách mikroRNA, což narušuje biogenezi miR-122 v biochemických testech a buněčné kultuře.[25]

Reference

  1. ^ Cox, David L. Nelson, Michael M. (2008). Lehningerovy principy biochemie (5. vydání). New York: W.H. Freemane. p.1045. ISBN  978-0-7167-7108-1.
  2. ^ Lennox, Ka; Behlke, MA (14. července 2011). "Chemická modifikace a design anti-miRNA oligonukleotidů". Genová terapie. 18 (12): 1111–1120. doi:10.1038 / gt.2011.100. PMID  21753793.
  3. ^ Stenvang, Jan; Petri, Andreas; Lindow, Morten; Obad, Susanna; Kauppinen, Sakari (2012). "Inhibice funkce mikroRNA antimiR oligonukleotidy". Umlčet. 3 (1): 1. doi:10.1186 / 1758-907X-3-1. PMC  3306207. PMID  22230293.
  4. ^ Lennox, Kim A; Owczarzy, Richard; Thomas, Derek M; Walder, Joseph A; Behlke, Mark A (2013). "Vylepšený výkon anti-miRNA oligonukleotidů pomocí nového nenukleotidového modifikátoru". Molekulární terapie: nukleové kyseliny. 2 (8): e117. doi:10.1038 / mtna.2013.46. PMC  3759741. PMID  23982190.
  5. ^ Davis, S .; Lollo, B; Freier, S; Esau, C (28. dubna 2006). „Vylepšené cílení miRNA s antisense oligonukleotidy“. Výzkum nukleových kyselin. 34 (8): 2294–2304. doi:10.1093 / nar / gkl183. PMC  1459537. PMID  16690972.
  6. ^ A b Kim, Jae-Hong; Yeom, Ji-Hyun; Ko, Jeong-Jae; Han, Min Su; Lee, Kangseok; Na, Soon-Young; Bae, Jeehyeon (září 2011). "Efektivní dodání anti-miRNA DNA oligonukleotidů funkcionalizovanými nanočásticemi zlata". Journal of Biotechnology. 155 (3): 287–292. doi:10.1016 / j.jbiotec.2011.07.014. PMID  21807040.
  7. ^ Neu, Michael; Fischer, Dagmar; Kissel, Thomas (srpen 2005). "Nedávné pokroky v racionálním designu vektoru přenosu genů založeném na poly (ethyleniminu) a jeho derivátech". The Journal of Gene Medicine. 7 (8): 992–1009. doi:10,1002 / jgm.773. PMID  15920783.
  8. ^ Krützfeldt, Jan; Rajewsky, Nikolaus; Braich, Ravi; Rajeev, Kallanthottathil G .; Tuschl, Thomas; Manoharan, Muthiah; Stoffel, Markus (30. října 2005). „Umlčení mikroRNA in vivo pomocí„ antagomirů “'". Příroda. 438 (7068): 685–689. Bibcode:2005 Natur.438..685K. doi:10.1038 / nature04303. PMID  16258535.
  9. ^ Lu, Y .; Xiao, J .; Lin, H .; Bai, Y .; Luo, X .; Wang, Z .; Yang, B. (9. ledna 2009). „Jediný anti-microRNA antisense oligodeoxyribonukleotid (AMO) zaměřený na více mikroRNA nabízí vylepšený přístup k interferenci mikroRNA“. Výzkum nukleových kyselin. 37 (3): e24. doi:10.1093 / nar / gkn1053. PMC  2647303. PMID  19136465.
  10. ^ A b Weiler, J; Hunziker, J; Hall, J (29. září 2005). „Anti-miRNA oligonukleotidy (AMO): střelivo pro cílení miRNA zapojených do nemoci člověka?“. Genová terapie. 13 (6): 496–502. doi:10.1038 / sj.gt.3302654. PMID  16195701.
  11. ^ A b Wang, Zhiguo (28. srpna 2010). Koncept technologie s více cílovými anti-miRNA antisense oligonukleotidy. Metody v molekulární biologii. 676. str. 51–57. doi:10.1007/978-1-60761-863-8_4. ISBN  978-1-60761-862-1. PMID  20931389.
  12. ^ Volinia, S .; Calin, G. A .; Liu, C.-G .; Ambs, S .; Cimmino, A .; Petrocca, F .; Visone, R .; Iorio, M .; Roldo, C .; Ferracin, M .; Prueitt, R.L .; Yanaihara, N .; Lanza, G .; Scarpa, A .; Vecchione, A .; Negrini, M .; Harris, C. C .; Croce, C. M. (3. února 2006). „MikroRNA expresní podpis lidských solidních nádorů definuje cíle genů pro rakovinu“. Sborník Národní akademie věd. 103 (7): 2257–2261. doi:10.1073 / pnas.0510565103. PMC  1413718. PMID  16461460.
  13. ^ Negrini, Massimo; Nicoloso, Milena S; Calin, George A (2009). „MicroRNA a rakovina - nová paradigmata v molekulární onkologii“. Současný názor na buněčnou biologii. 21 (3): 470–479. doi:10.1016 / j.ceb.2009.03.002. PMID  19411171.
  14. ^ Zhao, Yong; Samal, Eva; Srivastava, Deepak (14. července 2005). „Faktor sérové ​​odezvy reguluje svalovou specifickou mikroRNA, která se zaměřuje na Hand2 během kardiogeneze“. Příroda. 436 (7048): 214–220. Bibcode:2005 Natur.436..214Z. doi:10.1038 / nature03817. PMID  15951802.
  15. ^ Chen, Jian-Fu; Mandel, Elizabeth M; Thomson, J. Michael; Wu, Qiulian; Callis, Thomas E; Hammond, Scott M; Conlon, Frank L; Wang, Da-Zhi (25. prosince 2005). „Role microRNA-1 a microRNA-133 při proliferaci a diferenciaci kosterního svalstva“. Genetika přírody. 38 (2): 228–233. doi:10.1038 / ng1725. PMC  2538576. PMID  16380711.
  16. ^ Tang, Yehua; Zheng, Jiaoyang; Sun, Yan; Wu, Zonggui; Liu, Zhimin; Huang, Gaozhong (2009). „MicroRNA-1 reguluje apoptózu kardiomyocytů cílením na Bcl-2“. International Heart Journal. 50 (3): 377–387. doi:10,1536 / ihj.50,377. PMID  19506341.
  17. ^ A b C Tili, Esmerina; Michaille, Jean-Jacques; Costinean, Stefan; Croce, Carlo M (26. srpna 2008). "MicroRNA, imunitní systém a revmatická nemoc". Přírodní klinická praxe revmatologie. 4 (10): 534–541. doi:10.1038 / ncprheum0885. PMID  18728632.
  18. ^ „Imunitní odpověď“. Medline Plus. Národní lékařská knihovna. Citováno 1. listopadu 2014.
  19. ^ Kaucsár, Tamás; Rácz, Zsuzsanna; Hamar, Péter (30. listopadu 2010). "Regulace exprese genu po transkripci sítí micro RNA (miRNA) u onemocnění ledvin ☆". Pokročilé recenze dodávek drog. 62 (14): 1390–1401. doi:10.1016 / j.addr.2010.10.003. PMID  20940025.
  20. ^ Ahluwalia, Jasmine K; Khan, Sohrab; Soni, Kartik; Rawat, Pratima; Gupta, Ankit; Hariharan, Manoj; Scaria, Vinod; Lalwani, Mukesh; Pillai, Beena; Mitra, Debashis; Brahmachari, Samir K (2008). „Lidská buněčná mikroRNA hsa-miR-29a interferuje s expresí virového nef proteinu a replikací HIV-1“. Retrovirologie. 5 (1): 117. doi:10.1186/1742-4690-5-117. PMC  2635386. PMID  19102781.
  21. ^ Choy, E. Y.-W .; Siu, K.-L .; Kok, K.-H .; Lung, R. W.-M .; Tsang, C. M .; To, K.-F .; Kwong, D.L.-W .; Tsao, S. W .; Jin, D.-Y. (6. října 2008). „MikroRNA kódovaná virem Epstein-Barr cílí na PUMA, aby podpořila přežití hostitelských buněk“ (PDF). Journal of Experimental Medicine. 205 (11): 2551–2560. doi:10.1084 / jem.20072581. PMC  2571930. PMID  18838543.
  22. ^ Sarnow, P; Sagan, SM (2016). „Odhalení tajemných interakcí mezi RNA viru hepatitidy C a játrově specifickou MicroRNA-122“. Roční přehled virologie. 3 (1): 309–332. doi:10.1146 / annurev-virology-110615-042409. PMID  27578438.
  23. ^ Elmén J, Lindow M, Schütz S, Lawrence M, Petri A, Obad S, Lindholm M, Hedtjärn M, Hansen HF, Berger U, Gullans S, Kearney P, Sarnow P, Straarup EM, Kauppinen S (2008). "Umlčení mikroRNA zprostředkované LNA u primátů (jiných než lidských)". Příroda. 452 (7189): 896–9. Bibcode:2008Natur.452..896E. doi:10.1038 / nature06783. PMID  18368051.
  24. ^ Janssen, Harry L.A .; Reesink, Hendrik W .; Lawitz, Eric J .; Zeuzem, Stefan; Rodriguez-Torres, Maribel; Patel, Keyur; Van Der Meer, Adriaan J .; Patick, Amy K .; Chen, Alice; Zhou, Yi; Persson, Robert; King, Barney D .; Kauppinen, Sakari; Levin, Arthur A .; Hodges, Michael R. (2013). "Léčba infekce HCV cílením na MicroRNA". New England Journal of Medicine. 368 (18): 1685–94. doi:10.1056 / NEJMoa1209026. PMID  23534542.
  25. ^ Gebert, Luca F. R .; Rebhan, Mario A. E .; Crivelli, Silvia E. M .; Denzler, Rémy; Stoffel, Markus; Hall, Jonathan (7. ledna 2014). „Miravirsen (SPC3649) může inhibovat biogenezi miR-122“. Výzkum nukleových kyselin. 42 (1): 609–621. doi:10.1093 / nar / gkt852. PMC  3874169. PMID  24068553.