Arxula adeninivorans - Arxula adeninivorans

Arxula adeninivorans (Blastobotrys adeninivorans) je dimorfní droždí s neobvyklými vlastnostmi. První popis A. adeninivorans byla poskytnuta v polovině osmdesátých let. Tento druh byl původně označen jako Trichosporon adeninovorans.^[2] Po první identifikaci v Holandsko, kmeny tohoto druhu byly později také nalezeny v Sibiř a v Jižní Afrika v půdě a v hydrolyzátech dřeva. Nedávno, A. adeninivorans byl přejmenován na Blastobotrys adeninivorans po podrobném fylogenetické srovnání s jinými příbuznými druhy kvasinek. Mnoho vědců si však přeje zachovat populární jméno A. adeninivorans.

Vlastnosti

Všechno A. adeninivorans kmeny sdílejí neobvyklé biochemické činnosti schopné asimilovat řadu aminy, adenin (odtud název A. adeninivorans) a několik dalších purin sloučeniny jako jediný zdroj energie a uhlíku, všechny mají podobné vlastnosti dusičnan asimilace, jsou tepelně tolerantní (mohou růst při teplotách až 48 ° C nebo 118 ° F). Zvláštností biotechnologického dopadu je teplotně závislý dimorfismus. Při teplotách nad 42 ° C (108 ° F) je reverzibilní přechod z pučící buňky do myceliální formy jsou indukovány. Pučení se obnoví, když teplota kultivace klesne pod 42 ° C (108 ° F).

Biotechnologický potenciál

Návrh a funkčnost vektorového systému CoMed. Základní vektor CoMed obsahuje vše E-coli prvky pro šíření v E-coli systém a MCS (vícenásobné klonování) pro integraci modulů ARS, rDNA, selekčních značek a expresních kazet. Za tímto účelem jsou fragmenty ARS ohraničeny VakII a BcuI restrikční místa, rDNA oblasti podle BcuJá a Eco47III restrikční místa, výběrové značky podle Eco47III a Sali restrikční weby a romoter prvky od SalJá a ApaOmezuji weby.

Výše popsané neobvyklé vlastnosti A. adeninivorans velmi atraktivní pro biotechnologické aplikace. Na jedné straně je to pro mnohé zdroj enzymy například se zajímavými vlastnostmi a příslušnými geny glukoamyláza, tannase, lipáza, fosfatázy a mnoho dalších. Na druhou stranu je to velmi robustní a bezpečný organismus, který lze geneticky upravit tak, aby produkoval cizí bílkoviny. Vhodné hostitelské kmeny mohou být transformovaný s plazmidy. Základní konstrukce takových plazmidů je podobná té, která je popsána níže Hansenula polymorpha a kvasinkové expresní platformy.

Zde jsou dva speciální příklady rekombinantní kmeny a jejich aplikace: v obou případech bylo do kvasinek zavedeno několik plazmidů s různými geny cizích produktů. V prvním případě získal tento rekombinantní kmen kvasinek schopnost vyrábět přírodní plasty, konkrétně PHA (polyhydroxyalkanoáty ). Za tímto účelem musela být do tohoto organismu, který se skládá ze tří enzymů, přenesena nová syntetická cesta. Příslušné geny phbA, phbB a phbC byly izolovány z bakterie Ralstonia eutropha a integrovány do plazmidů. Tyto plazmidy byly zavedeny do organismu. Výsledný rekombinantní kmen byl schopen produkovat plastický materiál.

Ve druhém příkladu a biosenzor pro detekci estrogenní byly vyvinuty činnosti v odpadních vodách. V tomto případě byla napodobena cesta, jak estrogeny působí v přírodě. Gen pro člověka estrogenový receptor alfa (HERalfa) obsažený v prvním plazmidu byl původně zaveden. Protein kódovaný tímto genem rozpoznává a váže estrogeny. Komplex se poté váže na druhý gen obsažený v druhém plazmidu, který se aktivuje po navázání. V tomto případě genová sekvence a reportér gen (genový produkt lze snadno monitorovat jednoduchými testy) byl fúzován s kontrolní sekvencí (a promotér ) reagující na komplex estrogen / receptor. Takové kmeny lze kultivovat v přítomnosti odpadní vody a estrogeny přítomné v takových vzorcích lze snadno kvantifikovat množstvím produktu reportérového genu.

Reference

• Gellissen G (ed) (2005) Produkce rekombinantních proteinů - nové mikrobiální a eukaryotické expresní systémy. Wiley-VCH, Weinheim. ISBN  3-527-31036-3