Psaní tkání - Tissue typing

Psaní tkání je postup, při kterém jsou tkáně potenciálního dárce a příjemce testovány na kompatibilitu před transplantace. Neshodující se tkáně dárce a příjemce mohou vést k odmítnutí tkání. Existuje několik metod typování tkání.

Přehled

Mapování HLA lokusů na chromozomu 6

Během psaní tkáně, jednotlivce lidské leukocytové antigeny (HLA) jsou identifikovány.[1] HLA molekuly jsou prezentovány na povrchu buněk a usnadňují interakce mezi imunitními buňkami (např dendritické buňky a T buňky ) které vedou k adaptivní imunitní odpovědi.[2] Pokud je HLA od dárce rozpoznána imunitním systémem příjemce jako odlišná od HLA vlastního příjemce, může být spuštěna imunitní odpověď proti dárcovským tkáním.[3] Přesněji řečeno, nesoulady HLA mezi dárci orgánů a příjemci mohou vést k vývoji anti-HLA protilátky specifické pro dárce (DSA).[4] DSA jsou silně spojeny s odmítnutím dárcovských tkání u příjemce a jejich přítomnost je považována za indikátor odmítnutí zprostředkovaného protilátkami.[5] Když se shodují HLA mezi dárcem a příjemcem, je pravděpodobnější, že dárcovské tkáně budou přijaty imunitním systémem příjemce.[3] Během typování tkáně by měla být typována řada genů HLA u dárce i příjemce, včetně HLA třída I A, B, a C geny, stejně jako HLA třída II DRB1, DRB3, DRB4, DRB5, DQA1, DQB1, DPA1, a DPB1 geny.[6] Typizace HLA je ztížena skutečností, že oblast HLA je geneticky nejvíce variabilní oblastí v lidském genomu.[7]

Metody psaní tkáně

Tento diagram ukazuje sérologické psaní. V horní polovině diagramu byla přidána správná protilátka pro typ HLA buňky, takže došlo k aktivaci komplementu, což vedlo k lýze buněk. Lýza buněk naznačuje, že přidaná protilátka odpovídala typu HLA buňky, takže je potom znám typ HLA buňky. Ve spodní polovině diagramu byla přidána protilátka HLA, která neodpovídala typu HLA buňky, takže nedocházelo k aktivaci komplementu a nedocházelo k lýze buněk.

Jednou z prvních metod typizace tkání byla sérologická typizace. V této technice jsou krevní buňky dárce HLA napsané smícháním s sérum obsahující anti-HLA protilátky. Pokud protilátky rozpoznají své epitop na HLA dárce doplněk dojde k aktivaci vede k buňce lýza a smrt, umožňující buňkám absorbovat barvivo (trypanová modrá ). To umožňuje identifikaci HLA buněk na základě nepřímo na základě specificity známých protilátek v séru. Tato metoda byla široce používána, protože je jednoduchá, rychlá a nízkonákladová; obrovská variabilita v HLA alely znamená, že sérum obsahující protilátky specifické pro HLA testovaných buněk nemusí být k dispozici.[6][8] Sérologická typizace neposkytuje jasný obraz o oblasti HLA a ne vždy vede k úspěšné typizaci HLA, takže mnoho laboratoří ji přestalo používat ve prospěch efektivnějších metod.[6][9]

V poslední době se objevily další účinnější přístupy, včetně použití polymerázové řetězové reakce (PCR ) na základě sekvenčně specifických primerů (SSP) nebo sekvenčně specifických oligonukleotid sondy (SSOP).[3][6] SSP-PCR však může být časově i zdrojově náročná.[9] SSOP-PCR je lepší pro HLA typizující velký počet jedinců, například velký počet dárců pro registry kostní dřeně.[9] RT-PCR je další přístup k psaní HLA, který je rychlý a všestranný, ale je drahý.[6]

Konformační analýza zprostředkovaná referenčním vláknem (RSCA) je další metodou používanou pro typizaci HLA. V této metodě je neznámý HLA vzorek smíchán s referenční alelou a zpracován v gelu elektroforéza.[9] RSCA je omezen počtem dostupných alel HLA, protože oblast HLA je tak různorodá.[9]

Přímo Sekvenování DNA je v současné době považována za nejlepší metodu psaní HLA, buď Sangerovo sekvenování nebo sekvenování nové generace, i když to může být také časově náročné a je to jedna z dražších metod.[6][9] Sekvenování RNA lze také použít, ale mnoho laboratoří ne, protože RNA je nestabilní a náchylná k degradaci.[9]

Reference

  1. ^ Mulley, William R .; Hudson, Fiona; Lee, Darren; Holdsworth, Rhonda F. (2019). „Typizace tkání pro transplantaci ledvin pro hlavního nefrologa“. Nefrologie. 24 (10): 997–1000. doi:10.1111 / nep.13637. ISSN  1440-1797. PMID  31335997.
  2. ^ Nazahah, M .; Koh, M. B. C. (2015). "Typování tkáně a její role při transplantaci". Vědecká řada ISBT. 10 (S1): 115–123. doi:10.1111 / voxs.12168. ISSN  1751-2824.
  3. ^ A b C Mahdi, Batool Mutar (2013-02-23). „Záře psaní HLA při transplantaci orgánů“. Klinická a translační medicína. 2 (1): 6. doi:10.1186/2001-1326-2-6. ISSN  2001-1326. PMC  3598844. PMID  23432791.
  4. ^ Argani, Hassan (leden 2019). „Protilátka proti HLA: role epitopů při transplantaci orgánů“. Experimentální a klinická transplantace. 17 (Suppl 1): 38–42. doi:10 6002 / atd. MEZOT2018.L41. PMID  30777521.
  5. ^ Zhang, Rubin (01.01.2018). „Protilátky specifické pro dárce u příjemců transplantace ledvin“. Klinický časopis Americké nefrologické společnosti. 13 (1): 182–192. doi:10,2215 / CJN.00700117. ISSN  1555-9041. PMC  5753302. PMID  28446536.
  6. ^ A b C d E F Deaglio, Silvia; Amoroso, Antonio; Rinaldi, Mauro; Boffini, Massimo (2020-02-13). „Typizace HLA při transplantaci plic: vyhovuje vysoké rozlišení všem?“. Annals of Translational Medicine. 8 (3): 45. doi:10,21037 / atm.2020.01.45. ISSN  2305-5847. PMC  7036624. PMID  32154803.
  7. ^ Kishore, Amit; Petrek, Martin (2018). „Psaní HLA sekvenováním nové generace: dešifrování imunogenetických aspektů sarkoidózy“. Frontiers in Genetics. 9: 503. doi:10.3389 / fgene.2018.00503. ISSN  1664-8021. PMC  6210504. PMID  30410504.
  8. ^ Mahdi, Batool Mutar (2013-02-23). „Záře psaní HLA při transplantaci orgánů“. Klinická a translační medicína. 2 (1): 6. doi:10.1186/2001-1326-2-6. ISSN  2001-1326. PMC  3598844. PMID  23432791.
  9. ^ A b C d E F G Dunn, P. P. J. (2011). "Typizace lidského leukocytového antigenu: techniky a technologie, kritické hodnocení". International Journal of Imunogenetics. 38 (6): 463–473. doi:10.1111 / j.1744-313X.2011.01040.x. ISSN  1744-313X. PMID  22059555.

Viz také

externí odkazy