CFU-E - CFU-E - Wikipedia

CFU-E znamená Kolonie tvořící jednotka - erytroid.[1] Vychází z CFU-GEMM (přes BFU-E,[2] což je zkratka pro „erythroid burst-creating units“[3]) a vede k proerythroblasty.

myší CFU-E kolonie obarvené 3. den diaminobenzidinem na hemoglobin

Test na myší CFU-E

CFU-E je fáze vývoje erytroidů mezi fází BFU-E a fází pro-erytroblastů. Test CFU-E kolonie je navržen tak, aby detekoval, kolik jednotek tvořících kolonie erytroidní linie je v hematopoetické tkáni (kostní dřeň, slezina nebo fetální játra), což může odrážet požadavek organismu na dodávku kyslíku do tkání nebo porucha krvetvorby.

Časné progenitory erytroidu se nacházejí v poměrně nízké frekvenci ve srovnání s pozdějšími stadii diferenciace erytroidů, jako jsou pro-erytroblastová a bazofilní erytroblastová stadia, která lze detekovat průtokovou cytometrií přímo ex-vivo (Socolovsky, M; Nam, H; Fleming, MD; Haase, VH; Brugnara, C; Lodish, HF (prosinec 2001). „Neúčinná erytropoéza u myší Stat5a (- / -) 5b (- / -) kvůli sníženému přežití časných erytroblastů“. Krev. 98: 3261–73. doi:10.1182 / krev.v98.12.3261. PMID  11719363.). Kromě toho, na rozdíl od pro-erytroblastů a pozdějších stádií vývoje erytroidů, neexistují žádné skutečně spolehlivé a jedinečné pozitivní průtokové cytometrické markery, i když je možné použít negativní vylučovací markery k vyčerpání buněčné populace jiných prekurzorů a diferencovaných buněk tříděním buněk , což jej výrazně obohacuje o aktivitu CFU-E (Prospektivní izolace a analýza globální genové exprese jednotky tvořící kolonie erytrocytů, Terszowski G. et al. Blood 2005). Buňky CFU-E exprimují receptor Epo, c-Kit (receptor faktoru kmenových buněk), receptor transferinu (CD71 +) a jsou negativní na Ter119 (antigen asociovaný s glykoforinem A). Z výše uvedených důvodů je dnes test CFU-E, jakkoli neefektivní a proměnlivý, jak často může být, stále používán.

Buňky ve stadiu CFU-E exprimují určitý receptor erytropoetinu (EpoR), a lze je tak přimět k terminální diferenciaci in vitro za 2–3 dny v přítomnosti pouze erytropoetinu (Epo) (společně se základním obsahem kultivačního média: FBS , BSA v IMDM). Methylcelulóza je polotuhá přísada do média, která umožňuje vyšetřovateli obarvit (diaminobenzidinovým činidlem pro hemoglobin) a poté spočítat jednotlivé kolonie, z nichž každá pochází z jediného naloženého progenitoru, který je ve stadiu CFU-E. Ve dni 2 od doby nanesení bude každá kolonie CFU-E obsahovat mezi 8 (minimálně) a 64 hemoglobinizovanými buňkami, z nichž většina je v konečné fázi diferenciace erytroidů. Je možné vidět malé spektrum úrovně hemoglobinizace a možná i velikost buněk, což naznačuje, že některé buňky v kolonii dosáhly konečné fáze rychleji než jiné.

Počet buněk v kolonii je důležitý, protože pro-erytroblastové stádium také reaguje na Epo (exprimuje Epo receptor), ale proliferační kapacita těchto buněk není tak vysoká, čímž se získá kolonie s méně než 8 buňkami. Podobně dřívější fáze diferenciace erytroidů může také poskytnout kolonie v médiu obsahujícím pouze Epo, ale tyto kolonie by pravděpodobně byly menší a / nebo by nebyly hemoglobinizované, protože fáze před fází CFU-E (MEP a BFU-E) vyžadují další faktory (IL-3 atd.) A více času na růst, který také zpomalí terminální diferenciaci a hemoglobinizaci.

Reference

  1. ^ Miller, Cindy L .; Dykstra, Brad; Okapové, Connie J. (2008). "Charakterizace myších hemopoetických kmenových a progenitorových buněk". Současné protokoly v imunologii. 80 (1): 22B.2.1–22B.2.31. doi:10.1002 / 0471142735.im22b02s80. ISSN  1934-368X. PMID  18432636.
  2. ^ Wu H, Liu X, Jaenisch R, Lodish HF (říjen 1995). „Generace aktivovaných progenitorů erytroidních BFU-E a CFU-E nevyžaduje erytropoetin ani receptor erytropoetinu“. Buňka. 83 (1): 59–67. doi:10.1016/0092-8674(95)90234-1. PMID  7553874.
  3. ^ Marley SB, Lewis JL, Goldman JM, Gordon MY (červen 1996). „Abnormální kinetika tvorby kolonií jednotkami vytvářejícími erytroidní burst (BFU-E) u chronické myeloidní leukémie“. Br. J. Haematol. 93 (4): 878–83. doi:10.1046 / j.1365-2141.1996.d01-1738.x. PMID  8703820.

externí odkazy