Transkripce zprostředkovaná amplifikace - Transcription-mediated amplification

Transkripce zprostředkovaná amplifikace (TMA) je izotermický (nezmění teplotu nukleové kyseliny), jedno trubice nukleová kyselina amplifikační systém využívající dva enzymy, RNA polymeráza a reverzní transkriptáza. „Amplifikace“ znamená vytvoření mnohem více kopií řetězce nukleové kyseliny, než bylo přítomno na začátku, aby bylo možné jej snadno detekovat nebo otestovat. Rychlá amplifikace cílové RNA / DNA umožňuje laboratoři současně detekovat více patogenních organismů v jedné zkumavce. Technologie TMA umožňuje provádění klinické laboratoře test nukleových kyselin (NAT) testy pro screening krve s méně kroky, kratší dobou zpracování a rychlejšími výsledky. Používá se v molekulární biologie, forenzní, a lék pro rychlou identifikaci a diagnostiku patogenních organismů, Na rozdíl od podobných technik, jako je polymerázová řetězová reakce a ligázová řetězová reakce, tato metoda zahrnuje transkripci RNA (via RNA polymeráza ) a syntéza DNA (přes reverzní transkriptáza ) k produkci RNA amplikon (zdroj nebo produkt amplifikace) z cílové nukleové kyseliny. Tuto techniku ​​lze použít k cílení jak na RNA, tak na DNA.

Transkripce zprostředkovaná amplifikace má několik výhod ve srovnání s jinými metodami amplifikace, včetně:

  • TMA je izotermický; místo tepelného cyklovače se používá vodní lázeň nebo tepelný blok.
  • TMA produkuje spíše RNA amplikon než DNA amplikon. Jelikož je RNA v laboratorním prostředí labilnější, snižuje to možnost kontaminace přenosem.
  • TMA produkuje 100–1 000 kopií na cyklus (PCR a LCR exponenciálně zdvojnásobuje každý cyklus). Výsledkem je 10 miliardnásobný nárůst kopií DNA (nebo RNA) během přibližně 15–30 minut.

Z: http://www.gen-probe.com