Standardní křivka - Standard curve

Příklad standardní křivky ukazující absorbance různých koncentrací proteinu (dvě zkoušky pro každé měření). Hmotnost proteinu v jiném vzorku se stanoví určením, kam by se to mělo na standardní křivce dostat - v tomto případě 30 miligramů.

A standardní křivka, také známý jako a kalibrační křivka, je typ grafu používaného jako a kvantitativní výzkum technika. Je měřeno a grafováno více vzorků se známými vlastnostmi, což umožňuje interpolací v grafu stanovit stejné vlastnosti pro neznámé vzorky. Standardy jsou vzorky se známými vlastnostmi a graf je standardní křivka. Koncentraci neznámého lze vypočítat z hmotnosti v testu.

Příklad

Vzorky ošetřené Bradfordovým testem. Hnědý vzorek (nižší absorbance) neobsahuje žádný protein, zatímco modrý vzorek (vyšší absorbance) obsahuje bílkoviny. Množství proteinu ve druhém vzorku lze určit porovnáním se standardní křivkou.

The Bradfordův test je kolorimetrický test, který měří koncentraci proteinu. The činidlo Coomassie Brilliant Blue změní na modrou, když se váže na arginin a aromatický aminokyseliny přítomné v bílkovinách, čímž se zvyšuje absorbance vzorku. Absorbance se měří pomocí a spektrofotometr při maximální absorpční frekvenci (Amax) modrého barviva (což je 595 nm). V tomto případě, čím větší je absorbance, tím vyšší je koncentrace proteinu.

Data pro známé koncentrace proteinu se použijí k vytvoření standardní křivky, vynesení koncentrace na osu X a měření testu na ose Y. Stejný test se poté provede se vzorky neznámé koncentrace. Chcete-li analyzovat data, vyhledejte měření na ose Y, které odpovídá měřenému měření neznámé látky, a sledujte přímku protínající standardní křivku. Odpovídající hodnotou na ose X je koncentrace látky v neznámém vzorku.

Viz také

Reference

„Bradford Protein Assay“ (PDF). Bio-Rad Quick Start Bradford Protein Assay Návod k použití. Citováno 31. května 2005.