Scintilační proximitní test - Scintillation proximity assay - Wikipedia

Scintilační proximitní test (LÁZNĚ) je vývoj testu a biochemický screening, který umožňuje rychlé a citlivé měření široké škály biologických procesů v homogenním systému. Typ korálků, které se účastní SPA, má mikroskopickou velikost a uvnitř samotných korálků je a scintilant který při stimulaci vyzařuje světlo. Stimulace nastává, když radioaktivně značené molekuly interagují a váží se na povrch perličky. Tato interakce způsobí, že korálek vydá světlo, které lze detekovat pomocí a fotometr.

Přehled

Technika SPA závisí na přeměna energie z radioaktivní rozpad, který uvolňuje světlo fotony které lze detekovat pomocí některých zařízení, například fotonásobičů scintilačních čítačů nebo CCD snímače. Toto je velmi populární technika v postupech, které vyžadují detekci a kvantifikaci radioaktivity.^[1]

Proces přeměny radioaktivity na světlo vyžaduje kapalné médium scintilační kombinace sestávající z rozpustného organický scintilátory a organická rozpouštědla. Během procesu radioaktivního rozpadu, a beta částice bude vydán. Zatímco tato částice cestuje v médiu, energie, kterou vlastní, se rozptýlí při srážce s okolím molekuly v rozpouštědle a tím je vzrušuje. Vzrušené molekuly přenesou energii, kterou nyní mají, na molekuly scintilátoru, kde bude energie emitována jako světlo.

Detail

Podrobněji, když označeno rádiem molekula je připojena nebo je v blízkosti kuliček, stimuluje se emise světla. Pokud se však kulička nenaváže na radioaktivně značenou molekulu, nebude kulička stimulována k emitování světla. Je to proto, že beta částice (vysokorychlostní elektrony) uvolněné z nenavázané molekuly jsou ztraceny ke kolizím s molekulami vody, pokud jsou příliš daleko od kuliček obsahujících scintillant, a tak SPA kulička, která poté není stimulována k produkci signálu .

Rozpad radioaktivních atomů uvolňuje subatomární částice a / nebo gama paprsky. Uvolňuje se tritium elektrony jako jeden z subatomární částice. Energie těchto částic ovlivňuje vzdálenost uraženou samotnými částicemi prostředím, jako je voda, protože existuje k inverzní korelace mezi kinetickou energií částic a silou interakce s hmotou. metoda SPA závisí na krátké délce dráhy beta částic uvolňovaných tritiem.

Například rozpad a Tritium atom uvolňuje beta částici. Tritium je vysoce doporučeno, protože velmi vyhovuje SPA. Je to kvůli 1,5 µm délka cesty skrz vodu, což je velmi krátké. Když je tedy ß-částice v tomto konkrétním rozmezí 1,5 um se scintilační kuličkou, je zde dostatek energie ke stimulaci kuličky k vyzařování světla. Pokud je vzdálenost mezi nimi větší než 1,5 µm, pak ß-částice není schopna urazit požadovanou vzdálenost, aby stimulovala perličku, protože nemá dostatek energie.

Korálky v SPA jsou tvořeny zabudováním scintilantu do malých kuliček známých jako fluomikrosféry. Jsou speciálně navrženy pro vazbu se specifickými molekulami. Když je kulička v těsné blízkosti radioaktivní molekuly, je stimulováno světlo.

K detekci emitovaných fotonů lze použít trubici fotonásobiče (PMT). Toto zařízení převádí emitovanou energii fotonu na elektrická energie podle a fotokatoda prostřednictvím řady dalších elektrody. Další zařízení je známé jako CCD kamera, který se skládá ze sady chlazených digitální fotoaparáty s citlivými detektory vázaných na náboj a s některými vylepšenými telecentrické čočky převést zachycenou energii fotonu na vysoce kvalitní snímky.

K dispozici je také sortiment perličkových povlaků, které umožňují použití této metody pro širokou škálu aplikací, jako je enzym testy a radioimuno testy.

Výhody oproti předchozím metodám

Ve srovnání s předchozími metodami s povrchovou úpravou na bázi desek má SPA řadu výhod, díky nimž je populárnější:

• Flexibilita testu - koncentrace složek v testu může být upravena tak, aby vyhovovala uživateli díky většímu designu povrchu perliček SPA, čímž poskytuje uživateli flexibilitu při navrhování testu.
• Radioaktivní štítek redukce - kuličky SPA umožňují potenciální snížení množství požadovaného radioaktivního značení díky své vyšší vazebné kapacitě, která dává vyšší signál. Tato metoda také umožňuje uživateli optimalizovat citlivost testu změnou množství SPA perliček.
• Pohodlné - klíčová součást testu SPA, kuličky, nezávisí na konkrétním typu destičky nebo dodavateli, a proto je k dispozici široká.
• Sortiment korálků - existuje řada typů korálků, ze kterých si můžete vybrat, aby vyhovovaly potřebám uživatele a aplikace.
• Žádný separační krok - umožňuje měření vazby bez separačního kroku spojeného s dřívějšími metodami, což snižuje chyby a umožňuje vyšší propustnost.

Reference