Myc-tag - Myc-tag

A myc tag je polypeptid proteinová značka odvozeno z c-myc genový produkt, který lze přidat k proteinu za použití rekombinantní DNA technologie. Může být použit pro afinitní chromatografie, poté se použije k oddělení rekombinantního, nadměrně exprimovaného proteinu od proteinu divokého typu exprimovaného hostitelským organismem. Může být také použit při izolaci proteinových komplexů s více podjednotkami.

Značku myc lze použít v mnoha různých testech, které vyžadují rozpoznání pomocí protilátka. Pokud proti studovanému proteinu neexistuje žádná protilátka, přidání značky myc umožňuje jednomu sledovat protein s protilátkou proti epitopu Myc. Příkladem jsou studie lokalizace celulitidy pomocí imunofluorescence nebo detekce pomocí Western blot.

Peptidová sekvence myc-tagu je (v 1-písmenném a 3-písmenném kódu): N-EQKLISEEDL-C, N-Glu-Gln-Lys-Leu-Ile-Ser-Glu-Glu-Asp-Leu- C, kde N znamená Amino-konec a C znamená Karboxy konec. Značka je přibližně 1202 Daltony v atomové hmotnosti a má 10 aminokyselin.

Může být spojen s C-konec a N-konec bílkoviny. Doporučuje se nefúzovat značku přímo za signální peptid sekrečního proteinu, protože může interferovat s translokací do sekreční cesta.

Monoklonální protilátka proti myc epitop, s názvem 9E10, je k dispozici na nekomerční bázi Vývojové studie Hybridoma Bank.^[1]

Viz také

• Proteinová značka
  • Polyhistidinová značka
  • Značka vlajky

Reference