Zobrazení hmotnostní spektrometrií - Mass spectrometry imaging

Zobrazení hmotnostní spektrometrií (MSI) je technika používaná v hmotnostní spektrometrie vizualizovat prostorovou distribuci molekul, jako biomarkery, metabolity, peptidy nebo bílkoviny podle jejich molekulárních hmot. Po shromáždění hmotnostního spektra na jednom místě se vzorek přesune do další oblasti atd., Dokud nebude naskenován celý vzorek. Výběrem píku ve výsledném spektru, který odpovídá sledované sloučenině, se data MS použijí k mapování jeho distribuce ve vzorku. Výsledkem jsou obrázky prostorově rozlišené distribuce složeného pixelu po pixelu. Každá sada dat obsahuje opravdovou galerii obrázků, protože jakýkoli vrchol v každém spektru lze prostorově mapovat. Navzdory skutečnosti, že MSI byla obecně považována za kvalitativní metodu, signál generovaný touto technikou je úměrný relativnímu množství analytu. Proto je kvantifikace možná, když jsou překonány její výzvy. Ačkoli široce používané tradiční metodiky jako radiochemie a imunohistochemie dosáhnout stejného cíle jako MSI, mají omezené schopnosti analyzovat více vzorků najednou a mohou se ukázat jako chybějící, pokud vědci nemají předchozí znalosti o studovaných vzorcích.[1] Nejběžnější ionizační technologie v oblasti MSI jsou DESI zobrazování, MALDI zobrazování a zobrazení hmotnostní spektrometrie sekundárních iontů (Zobrazování SIMS ).[2][3]

Dějiny

Před více než 50 lety byla společnost MSI představena pomocí hmotnostní spektrometrie sekundárních iontů (SIMS) ke studiu polovodičových povrchů Castaingem a Slodzianem.[4] Byla to však průkopnická práce Richarda Caprioliho a jeho kolegů na konci 90. let, která ukázala, jak na to laserová desorpce / ionizace za pomoci matice (MALDI) lze použít k vizualizaci velkých biomolekul (jako proteinů a lipidů) v buňkách a tkáních, aby se odhalila funkce těchto molekul a jak se funkce mění chorobami, jako je rakovina, což vedlo k širokému použití MSI. V současné době se používají různé ionizační techniky, včetně SIMS, MALDI a desorpční elektrosprejová ionizace (DESI), stejně jako další technologie. Přesto je MALDI v současné době dominantní technologií, pokud jde o klinické a biologické aplikace MSI.[5]

Princip činnosti

MSI je založen na prostorové distribuci vzorku. Princip operace proto závisí na technice, která se používá k získání prostorové informace. Dvě techniky používané v MSI jsou: mikrosonda a mikroskop.[6]

Microprobe

Tato technika se provádí pomocí zaostřeného ionizačního paprsku k analýze specifické oblasti vzorku generováním hmotnostního spektra. Hmotové spektrum je uloženo spolu s prostorovou koordinací, kde měření probíhalo. Poté je vybrána nová oblast a analyzována pohybem vzorku nebo ionizačního paprsku. Tyto kroky se opakují, dokud nebude naskenován celý vzorek. Spojením všech jednotlivých hmotnostních spekter lze vykreslit distribuční mapu intenzit jako funkci míst x a y. Ve výsledku jsou získány rekonstruované molekulární obrazy vzorku.[6]

Mikroskop

V této technice je 2D citlivé na polohu Detektor se používá k měření prostorového původu iontů generovaných na povrchu vzorku iontovou optikou nástrojů. Rozlišení prostorové informace bude záviset na zvětšení mikroskopu, kvalitě iontové optiky a citlivosti detektoru. Stále je třeba skenovat nový region, ale počet pozic se drasticky snižuje. Omezením tohoto režimu je konečná hloubka vidění přítomná u všech mikroskopů.[6]

Závislost na zdroji iontů

Ionizační techniky dostupné pro IMS jsou vhodné pro různé aplikace. Některá kritéria pro výběr ionizační metody jsou požadavek na přípravu vzorku a parametry měření, jako rozlišení, hmotnostní rozsah a citlivost. Na základě toho jsou nejčastěji používanou ionizační metodou MALDI, SIMS A DESI které jsou popsány níže. Přesto jsou použity další drobné techniky laserová ablace elektrosprejová ionizace (LAESI) a jáaser-ablace-indukčně vázaná plazma (LA-ICP).

Zobrazování SIMS

Hmotnostní spektrometrie sekundárních iontů (SIMS) se používá k analýze pevných povrchů a tenké filmy podle prskání povrch se zaostřeným primárem iontový paprsek a sběr a analýza vyvržených sekundárních iontů. Existuje mnoho různých zdrojů pro primární iontový paprsek. Primární iontový paprsek však musí obsahovat ionty, které jsou na horním konci energetické stupnice. Některé běžné zdroje jsou: Cs+, O2+, O, Ar+ a Ga+.[7] Zobrazování SIMS se provádí podobným způsobem elektronová mikroskopie; primární iontový paprsek je emitován napříč vzorkem, zatímco jsou zaznamenávána sekundární hmotnostní spektra.[8] SIMS se ukazuje jako výhodná při poskytování nejvyššího rozlišení obrazu, ale pouze na malé ploše vzorků.[9] Navíc je tato technika široce považována za jednu z nejcitlivějších forem hmotnostní spektrometrie, protože dokáže detekovat prvky v koncentracích pouhých 1012-1016 atomů na kubický centimetr.[10][poznámka 1][poznámka 2]


Multiplexované iontové paprskové zobrazování (MIBI) je metoda SIMS, která používá kovové izotopem značené protilátky ke značení sloučenin v biologických vzorcích.[11]

Vývoj v rámci SIMS: V rámci SIMS byly provedeny některé chemické úpravy za účelem zvýšení efektivity procesu. V současné době se používají dvě samostatné techniky, které pomáhají zvyšovat celkovou účinnost zvýšením citlivosti měření SIMS: matice rozšířené SIMS (ME-SIMS) - má stejnou přípravu vzorku jako MALDI, protože simuluje chemické ionizační vlastnosti MALDI . ME-SIMS nezkoumá téměř tolik materiálu. Pokud má ale testovaný analyt nízkou hmotnostní hodnotu, může vytvářet podobná spektra jako spektra MALDI. ME-SIMS byl tak účinný, že byl schopen detekovat chemikálie s nízkou hmotností na subcelulárních úrovních, což nebylo možné před vývojem techniky ME-SIMS.[3] Druhá použitá technika se nazývá metallizace vzorku (Meta-SIMS) - jedná se o proces přidání zlata nebo stříbra do vzorku. To vytváří vrstvu zlata nebo stříbra kolem vzorku a obvykle není tlustá více než 1-3 nm. Použití této techniky vedlo ke zvýšení citlivosti u vzorků s větší hmotností. Přidání kovové vrstvy také umožňuje převod izolačních vzorků na vodivé vzorky, takže kompenzace náboje v rámci experimentů SIMS již není nutná.[12]

MALDI zobrazování

Myší ledvina: (a) MALDI spektra z tkáně. (b) H&E obarvená tkáň. N-glykany v m / z = 1996,7 (c) jsou umístěny v kůře a míchě, zatímco m / z = 2158,7 (d) je v kůře, (e) překryvný obraz těchto dvou hmot, (f) neošetřená kontrolní tkáň .[13]
Hlavní článek: MALDI zobrazování

Maticová laserová desorpční ionizace lze použít jako zobrazovací techniku ​​hmotnostní spektrometrie pro relativně velké molekuly.[3] Nedávno bylo prokázáno, že nejúčinnějším typem matrice, která se používá, je iontová matice pro MALDI zobrazování tkáně. V této verzi techniky je vzorek, obvykle tenký tkáň sekce se pohybuje ve dvou rozměrech, zatímco hmotnostní spektrum je zaznamenán.[14] Ačkoli má MALDI výhodu v tom, že dokáže zaznamenat prostorovou distribuci větších molekul, přichází za cenu nižšího rozlišení než technika SIMS. Limit pro laterální rozlišení pro většinu moderních nástrojů využívajících MALDI je 20 m. MALDI experimenty běžně používají buď Nd: YAG (355 nm) nebo N2 (337 nm) laser pro ionizaci.[3]

Farmakodynamika a toxikodynamika v tkáni byly studovány pomocí MALDI zobrazování.[15]

DESI zobrazování

Desorpční elektrosprejová ionizace je méně destruktivní technika, která spojuje jednoduchost a rychlou analýzu vzorku. Na vzorek se nastříká elektricky nabitá mlha rozpouštědla pod úhlem, který způsobí ionizaci a desorpci různých molekulárních druhů. Poté jsou generovány dvourozměrné mapy hojnosti vybraných iontů na povrchu vzorku ve vztahu k prostorovému rozložení.[16][9] Tato technika je použitelná na pevné, kapalné, zmrazené a plynné vzorky. Kromě toho DESI umožňuje analyzovat širokou škálu organických a biologických sloučenin, jako jsou vzorky zvířecích a rostlinných tkání a buněčných kultur, bez složité přípravy vzorků[5][9] Přestože tato technika má mimo jiné nejhorší rozlišení, dokáže vytvořit vysoce kvalitní obraz z velkoplošného skenování jako skenování celého těla.[9]

Srovnávací mezi ionizačními technikami

Porovnání typických parametrů mezi technikami IMS[9]
Zdroj ionizaceTyp ionizaceAnalytyProstorové rozlišeníHmotnostní rozsah
SIMSIontová zbraňTvrdýElementární ionty, malé molekuly, lipidy<10 m0-1000 Da
MALDIUV laserový paprsekMěkkýLipidy, peptidy, bílkoviny20 m0-100 000 Da
DESIRozpouštědlový sprejMěkkýMalé molekuly, lipidy, peptidy50 m0-2000 Da

Kombinace různých IMS technik a dalších zobrazovacích technik

Kombinace různých technik IMS může být prospěšná, protože každá konkrétní technika má svou vlastní výhodu. Například pokud jsou ve stejné tkáňové části nezbytné informace týkající se jak proteinů, tak lipidů, provedení DESI k analýze lipidů, následované MALDI k získání informací o peptidu a finální nanesení barviva (hematoxylin a eosin) pro lékařskou diagnostiku strukturní charakteristika tkáně.[9] Na druhé straně IMS s jinými zobrazovacími technikami, fluorescenční barvení s IMS a zobrazování magnetickou rezonancí (MRI) s MRI lze zvýraznit. Fluorescenční barvení může poskytnout informace o vzhledu některých proteinů přítomných v jakémkoli procesu uvnitř tkáně, zatímco IMS může poskytnout informace o molekulárních změnách prezentovaných v tomto procesu. Kombinací obou technik lze generovat multimodální obraz nebo dokonce 3D obrazy distribuce různých molekul.[9] Naproti tomu MRI s IMS kombinuje kontinuální 3D reprezentaci obrazu MRI s detailní strukturální reprezentací pomocí molekulárních informací z IMS. I když IMS sám dokáže generovat 3D obrazy, obraz je jen částí reality kvůli omezení hloubky v analýze, zatímco MRI poskytuje například podrobný tvar orgánu s dalšími anatomickými informacemi. Tato spojená technika může být přínosem pro přesnou diagnostiku rakoviny a neurochirurgii.[9]

Zpracování dat

Standardní formát dat pro datové sady zobrazování hmotnostní spektrometrií

Užitečným datovým formátem pro IMS je datový formát imML (imzML ), protože to podporuje několik softwarových nástrojů pro zpracování obrazu MS. Výhodou tohoto formátu je flexibilita při výměně dat mezi různými nástroji a softwarem pro analýzu dat.[17]

Software

Existuje mnoho bezplatných softwarových balíčků pro vizualizaci a těžbu obrazových dat hmotnostní spektrometrie. Převaděče z formátu Thermo Fisher, formátu Analyze, formátu GRD a formátu Bruker do formátu imzML byly vyvinuty v rámci projektu Computis. Některé softwarové moduly jsou také k dispozici pro prohlížení snímků hmotnostní spektrometrie ve formátu imzML: Biomap (Novartis, zdarma), Datacube Explorer (AMOLF, zdarma),[18] EasyMSI (CEA), Mirion (JLU), MSiReader (NCSU, zdarma)[19] a SpectralAnalysis.[20]

Pro zpracování souborů .imzML pomocí bezplatného statistického a grafického jazyka R je k dispozici kolekce skriptů R, která umožňuje paralelní zpracování velkých souborů na místním počítači, vzdáleném klastru nebo na cloudu Amazon.[21]

Existuje další bezplatný statistický balíček pro zpracování imzML a analyzování dat 7.5 v R, Cardinal.[22]

SPUTNIK [23] je balíček R obsahující různé filtry k odstranění vrcholů charakterizovaných nekorelovanou prostorovou distribucí s umístěním vzorku.

Aplikace

Pozoruhodnou schopností IMS je zjistit lokalizaci biomolekul ve tkáních, i když o nich nejsou dosud žádné informace. Tato vlastnost učinila z IMS jedinečný nástroj pro klinický výzkum a farmakologický výzkum. Poskytuje informace o biomolekulárních změnách souvisejících s chorobami sledováním proteinů, lipidů a buněčného metabolismu. Například identifikace tvůrců biomasy pomocí IMS může ukázat podrobnou diagnostiku rakoviny. Kromě toho lze získat levné zobrazování pro farmaceutické studie, například snímky molekulárních podpisů, které by svědčily o léčebné odpovědi na konkrétní lék nebo o účinnosti konkrétního způsobu podávání léku.[24][25][26]

Výhody, výzvy a omezení

Hlavní výhodou MSI pro studium umístění a distribuce molekul ve tkáni je to, že tato analýza může poskytnout buď větší selektivitu, více informací nebo větší přesnost než jiné. Kromě toho tento nástroj vyžaduje menší investice času a zdrojů pro dosažení podobných výsledků.[16] Níže uvedená tabulka ukazuje srovnání výhod a nevýhod některých dostupných technik, včetně MSI, korelovaných s analýzou distribuce léků.[4]

Porovnání výhod a nevýhod technik hodnocení distribuce drog[4]
MetodologieOtázka byla zodpovězenaVýhodyNevýhody
AutoradiografieKde a kolik radioaktivityVelmi vysoké prostorové rozlišení; spolehlivá kvantifikaceEx vivo; vyžaduje radioaktivně značený lék; nerozlišuje lék od metabolitů.
ImunohistochemieKdeKrátká doba zpracování; snadná interpretace; levnýEx vivo; vyžaduje protilátky, které se liší v citlivosti a specifičnosti; přidělování potíží; detekční práh; nedostatek standardního bodovacího systému
FluorescenceKdeIn vivo možné; přiměřené nákladyNe kvantitativní; špatné rozlišení; autofluorescenční interference
Pozitronová emisní tomografie (PET)Kde, co a aktivitaIn vivo možné; dobré rozlišení; lze připojit k rentgenové, gama kameře CTDrahý; krátkodobé izotopy; potřebují cyklotron k výrobě izotopů
Koherentní anti-Stokes

Ramanův rozptyl

mikroskopie (AUTA)

Kde a coBez štítků; subcelulární prostorové rozlišeníNe kvantitativní; špatná selektivita; vysoký hluk pozadí
Elektrochemická atomová

silová mikroskopie (AFM)

Kde a coZobrazování bez štítků; vysoké rozlišeníNe kvantitativní; špatná reprodukovatelnost; vysoké pozadí
MSIKde a coMultiplex; zobrazování bez štítků; dobré prostorové rozlišeníSemikvantitativní; účinky potlačení iontů; komplexní analýza

Poznámky

  1. ^ pro srovnání, 1 cm3 uhlíku (diamant) obsahuje asi 1,8 x 1023 atomy. 1012 do 1016 odpovídá 6 dílům na bilion (ppt) až 60 dílům na miliardu (ppb).
  2. ^ citlivost se liší podle prvku (nebo molekuly) i podle povahy analyzovaného povrchu a podmínek analýzy.

Reference

  1. ^ Monroe E, Annangudi S, Hatcher N, Gutstein H, Rubakhin S, Sweedler J (2008). „SIMS a MADLI MS Zobrazování míchy“. Proteomika. 8 (18): 3746–3754. doi:10.1002 / pmic.200800127. PMC  2706659. PMID  18712768.
  2. ^ Rohner T, Staab D, Stoeckli M (2005). "MALDI hmotnostní spektrometrické zobrazování řezů biologických tkání". Mechanismy stárnutí a rozvoje. 126 (1): 177–185. doi:10.1016 / j.mad.2004.09.032. PMID  15610777.
  3. ^ A b C d McDonnell LA, Heeren RM (2007). "Zobrazovací hmotnostní spektrometrie". Recenze hmotnostní spektrometrie. 26 (4): 606–43. Bibcode:2007MSRv ... 26..606M. doi:10.1002 / mas.20124. hdl:1874/26394. PMID  17471576.
  4. ^ A b C Cobice, DF; Goodwin, RJ A; Andren, PE; Nilsson, A; Mackay, CL; Andrew, R (01.07.2015). „Budoucí technologický vhled: zobrazování pomocí hmotnostní spektrometrie jako nástroj výzkumu a vývoje léčiv“. British Journal of Pharmacology. 172 (13): 3266–3283. doi:10.1111 / bph.13135. ISSN  1476-5381. PMC  4500365. PMID  25766375.
  5. ^ A b Addie, Ruben D .; Balluff, Benjamin; Bovée, Judith V. M. G .; Morreau, Hans; McDonnell, Liam A. (2015). „Aktuální stav a budoucí výzvy zobrazování pomocí masové spektrometrie pro klinický výzkum“. Analytická chemie. 87 (13): 6426–6433. doi:10.1021 / acs.analchem.5b00416. PMID  25803124.
  6. ^ A b C McDonnell, Liam A .; Heeren, Ron M.A. (01.07.2007). "Zobrazovací hmotnostní spektrometrie". Recenze hmotnostní spektrometrie. 26 (4): 606–643. Bibcode:2007MSRv ... 26..606M. doi:10.1002 / mas.20124. hdl:1874/26394. ISSN  1098-2787. PMID  17471576.
  7. ^ Amstalden Van Hove E, Smith D, Heeren R (2010). "Stručný přehled zobrazení hmotnostní spektrometrií". Journal of Chromatography A. 1217 (25): 3946–3954. doi:10.1016 / j.chroma.2010.01.033. PMID  20223463.
  8. ^ Penner-Hahn, James E. (2013). „Kapitola 2. Technologie pro detekci kovů v jednotlivých buňkách. Oddíl 2.1, Hmotnostní spektrometrie sekundárních iontů“. V Banci, Lucia (ed.). Metallomics and the Cell. Kovové ionty v biologických vědách. 12. Springer. str. 15–40. doi:10.1007/978-94-007-5561-1_2. ISBN  978-94-007-5560-4. PMID  23595669.elektronická kniha ISBN  978-94-007-5561-1 ISSN  1559-0836 elektronický-ISSN  1868-0402
  9. ^ A b C d E F G h Bodzon-Kulakowska, Anna; Suder, Piotr (01.01.2016). "Zobrazovací hmotnostní spektrometrie: Přístrojové vybavení, aplikace a kombinace s jinými vizualizačními technikami". Recenze hmotnostní spektrometrie. 35 (1): 147–169. Bibcode:2016MSRv ... 35..147B. doi:10,1002 / mas.21468. ISSN  1098-2787. PMID  25962625.
  10. ^ Chabala J, Soni K, Li J, Gavlirov K, Levi-Setti R (1995). "Chemické zobrazování s vysokým rozlišením se skenovací iontovou sondou SIMS". International Journal of Mass Spectrometry and Ion Processes. 143: 191–212. Bibcode:1995IJMSI.143..191C. doi:10.1016 / 0168-1176 (94) 04119-R.
  11. ^ Angelo, Michael; Bendall, Sean C; Finck, Rachel; Hale, Matthew B; Hitzman, Chuck; Borowsky, Alexander D; Levenson, Richard M; Lowe, John B; Liu, Scot D; Zhao, Shuchun; Natkunam, Yasodha; Nolan, Garry P (2014). „Multiplexované zobrazování iontového paprsku lidských nádorů prsu“. Přírodní medicína. 20 (4): 436–442. doi:10,1038 / nm.3488. ISSN  1078-8956. PMC  4110905. PMID  24584119.
  12. ^ Delcorte A, Befahy S, Poleunis C, Troosters M, Bertrand P. „Zlepšení přilnavosti kovů ke křemíkovým filmům: studie ToF-SIMS“. Citovat deník vyžaduje | deník = (Pomoc)
  13. ^ Powers, Thomas W .; Neely, Benjamin A .; Shao, Yuan; Tang, Huiyuan; Troyer, Dean A .; Mehta, Anand S .; Haab, Brian B .; Drake, Richard R. (2014). „MALDI zobrazovací hmotnostní spektrometrie pro profilování N-glykanů ve formalínem fixovaných parafinových klinických tkáňových blocích a tkáňových mikročipech“. PLOS ONE. 9 (9): e106255. Bibcode:2014PLoSO ... 9j6255P. doi:10.1371 / journal.pone.0106255. ISSN  1932-6203. PMC  4153616. PMID  25184632.
  14. ^ Chaurand P, Norris JL, Cornett DS, Mobley JA, Caprioli RM (2006). "Nový vývoj v profilování a zobrazování proteinů z tkáňových řezů pomocí MALDI hmotnostní spektrometrie". J. Proteome Res. 5 (11): 2889–900. doi:10.1021 / pr060346u. PMID  17081040.
  15. ^ Patel, Ekta (1. ledna 2015). "MALDI-MS zobrazování pro studium tkáňové farmakodynamiky a toxikodynamiky". Bioanalýza. 7 (1): 91–101. doi:10,4155 / bio.14,280. PMID  25558938.
  16. ^ A b Nilsson, Anna; Goodwin, Richard J. A .; Shariatgorji, Mohammadreza; Vallianatou, Theodosia; Webborn, Peter J. H .; Andrén, Per E. (2015-02-03). "Mass Spectrometry Imaging in Drug Development". Analytická chemie. 87 (3): 1437–1455. doi:10.1021 / ac504734s. ISSN  0003-2700. PMID  25526173.
  17. ^ A. Römpp; T. Schramm; A. Hester; I. Klinkert; J.P. oba; R.M.A. Heeren; M. Stoeckli; B. Spengler (2011). "Kapitola imzML: Zobrazovací značkovací jazyk pro hmotnostní spektrometrii: Společný formát dat pro zobrazování pomocí hmotnostní spektrometrie při dolování dat v proteomice: od standardů po aplikace". Metody v molekulární biologii, Humana Press, New York. 696. str. 205–224.
  18. ^ Klinkert, I .; Chughtai, K .; Ellis, S. R .; Heeren, R. M. A. (2014). "Metody pro průzkum a vizualizaci dat v plném rozlišení pro velké datové sady 2D a 3D hmotnostní spektrometrie". International Journal of Mass Spectrometry. 362: 40–47. Bibcode:2014 IJMSp. 362 ... 40 tis. doi:10.1016 / j.ijms.2013.12.012.
  19. ^ Robichaud, G .; Garrard, K. P .; Barry, J. A .; Muddiman, D. C. (2013). „MSiReader: Open-source rozhraní pro prohlížení a analýzu souborů MS s vysokým rozlišením pro zobrazování na platformě Matlab“. Journal of the American Society for Mass Spectrometry. 24 (5): 718–721. Bibcode:2013JASMS..24..718R. doi:10.1007 / s13361-013-0607-z. PMC  3693088. PMID  23536269.
  20. ^ Race, A. M .; Palmer, A.D .; Dexter, A .; Steven, R. T .; Styles, I. B .; Bunch, J. (2016). „SpectralAnalysis: software pro masy“ (PDF). Analytická chemie. 88 (19): 9451–9458. doi:10.1021 / acs.analchem.6b01643. PMID  27558772.
  21. ^ Gamboa-Becerra, Roberto; Ramírez-Chávez, Enrique; Molina-Torres, Jorge; Winkler, Robert (01.07.2015). „MSI.R skripty odhalují těkavé a polotěkavé vlastnosti při nízkoteplotním plazmovém hmotnostním spektrometrickém zobrazování (LTP-MSI) chilli (Capsicum annuum)“. Analytická a bioanalytická chemie. 407 (19): 5673–5684. doi:10.1007 / s00216-015-8744-9. PMID  26007697.
  22. ^ Bemis, Kyle D .; Harry, duben; Eberlin, Livia S .; Ferreira, Christina; van de Ven, Stephanie M .; Mallick, Parag; Stolowitz, Mark; Vitek, Olga (2015-03-15). "Kardinál: balíček R pro statistickou analýzu zobrazovacích experimentů založených na hmotnostní spektrometrii ". Bioinformatika. 31 (14): 2418–2420. doi:10.1093 / bioinformatika / btv146. PMC  4495298. PMID  25777525.
  23. ^ Inglese, Paolo; Correia, Gonçalo; Takats, Zoltan; Nicholson, Jeremy K .; Glen, Robert C. (2018). „SPUTNIK: Balíček R pro filtrování prostorově souvisejících vrcholů v zobrazovacích datech hmotnostní spektrometrie“. Bioinformatika. 35 (1): 178–180. doi:10.1093 / bioinformatika / bty622. PMC  6298046. PMID  30010780.
  24. ^ Swales, John G .; Hamm, Gregory; Clench, Malcolm R .; Goodwin, Richard J.A. (Březen 2019). „Zobrazování pomocí hmotnostní spektrometrie a její aplikace ve farmaceutickém výzkumu a vývoji: Stručný přehled“. International Journal of Mass Spectrometry. 437: 99–112. doi:10.1016 / j.ijms.2018.02.007. ISSN  1387-3806.
  25. ^ Addie, Ruben D .; Balluff, Benjamin; Bovée, Judith V. M. G .; Morreau, Hans; McDonnell, Liam A. (07.07.2015). „Současný stav a budoucí výzvy zobrazování pomocí masové spektrometrie pro klinický výzkum“. Analytická chemie. 87 (13): 6426–6433. doi:10.1021 / acs.analchem.5b00416. ISSN  0003-2700. PMID  25803124.
  26. ^ Aichler, Michaela; Walch, Axel (duben 2015). "MALDI zobrazovací hmotnostní spektrometrie: současné hranice a perspektivy ve výzkumu a praxi patologie". Laboratorní vyšetřování. 95 (4): 422–431. doi:10.1038 / labinvest.2014.156. ISSN  1530-0307. PMID  25621874.