Cytocentrifuga - Cytocentrifuge

Příklad cytocentrifugy

A cytocentrifuga, někdy označované jako a cytospin,[1] je specialista odstředivka slouží ke koncentraci buněk ve vzorcích tekutin na a mikroskopický sklíčko aby mohli být obarvený a zkoumal.[2] Cytocentrifugy se používají v různých oblastech EU klinická laboratoř, jako cytopatologie, hematologie a mikrobiologie, stejně jako v biologickém výzkumu. Metodu lze použít na mnoha různých typech vzorků, včetně jemné jehly aspiráty, mozkomíšní mok, serózní a synoviální tekutina, a moč.[3]

Postup

Za účelem přípravy stěrů z cytocentrifugy je k přední části sklíčka mikroskopu připojena sestava trychtýře. Povrch sestavy nálevky, který je v kontaktu se sklíčkem, je vyložen filtračním papírem, aby absorboval přebytečnou tekutinu. Do nálevky se umístí několik kapek tekutiny. Sestava je umístěna v cytocentrifuze, která pracuje na minimu platnost (600–800 x g) pro zachování buněčné struktury.[4] Odstředivá síla tlačí tekutinu otvorem trychtýře a koncentruje buňky v malé oblasti sklíčka. Proces centrifugace koncentruje buňky asi dvacetkrát[5] a vytváří monovrstvu tlustou jednu buňku, která umožňuje hodnocení buněčné morfologie. Snímek pak může být pevný a obarvené.[6][7]

Aplikace

Buňky lymfomu v mozkomíšním moku, sklíčko cytocentrifugy
Lymfom buňky v mozkomíšní mok

Některé aplikace cytocentrifug zahrnují:

Omezení

Proces cytocentrifugace může způsobit, že buňky vypadají zkresleně. Buňky umístěné ve středu nátěru mohou vypadat komprimované ve srovnání s buňkami na periferii. Buněčná jádra může vyvinout rozštěpy, laloky nebo díry,[4] a cytoplazma mohou vypadat vakuově nebo se mohou objevit nepravidelné projekce. Cytoplazmatické granule mohou být tlačeny na periferii buňky. Pokud je počet buněk vysoký, buňky mohou být zkresleny kvůli vytěsnění; proto se vzorky s vysokým počtem buněk ředí před přípravou nátěru.[10]

Dějiny

Vyšetřování buněk v tělních tekutinách bylo historicky prováděno pomocí a hemocytometr, komora určená pro mikroskopické počítání buněk. Tato technika byla omezena špatnou diskriminací mezi typy buněk (buňky lze klasifikovat pouze jako mononukleární nebo polymorfonukleární) a nízkým počtem buněk přítomných v nekoncentrovaných tělesných tekutinách. Navíc tato technika nepřinesla trvalý záznam o vzorku.[10] V článku z roku 1966 popsal Watson P. první cytocentrifugu a nazval ji „zařízením pro koncentraci buněk v suspenzi na podložním sklíčku mikroskopu“.[11] Zařízení bylo komerčně prodáno v 70. letech a v roce 1983 bylo patentováno společností Shandon (nyní Thermo Scientific ). Od roku 2012 existuje na trhu řada značek cytocentrifugy.[8]

Reference

  1. ^ Linda McManus; Richard Mitchell (1. srpna 2014). Pathobiologie nemoci člověka: dynamická encyklopedie mechanismů nemocí. Elsevierova věda. str. 3365. ISBN  978-0-12-386457-4.
  2. ^ Mary Louise Turgeon (23. března 2015). Linné & Ringsrud's Clinical Laboratory Science: Concepts, Procedures, and Clinical Applications (7. vydání). Elsevier Mosby. str. 146. ISBN  978-0-323-22545-8.
  3. ^ A b Stokes, Barry O. (2004). „Principy cytocentrifugace“. Laboratorní medicína. 35 (7): 434–437. doi:10.1309 / FTT59GWKDWH69FB0. ISSN  0007-5027.
  4. ^ A b C Nancy A. Brunzel (5. listopadu 2016). „Kapitola 17: Analýza tělesných tekutin“. Základy analýzy moči a tělesných tekutin. Elsevier Health Sciences. str. 356–58. ISBN  978-0-323-39636-3.
  5. ^ Katherine A. Galagan (2006). Barevný atlas tělních tekutin: Ilustrovaný terénní průvodce založený na testování odbornosti. College of American Pathologists. s. 13–14. ISBN  978-0-930304-91-1.
  6. ^ Behdad Shambayati (17. února 2011). Cytopatologie. OUP Oxford. str. 24. ISBN  978-0-19-953392-3.
  7. ^ Elaine M. Keohane; Larry Smith; Jeanine M. Walenga (19. února 2015). Rodakova hematologie: Klinické principy a aplikace. Elsevier Health Sciences. str. 270–1. ISBN  978-0-323-32716-9.
  8. ^ A b Gary Gill (19. října 2012). „Kapitola 6: Cytocentrifugace“. Cytopreparation: Principles & Practice. Springer Science & Business Media. str. 73–84. ISBN  978-1-4614-4932-4.
  9. ^ Connie R. Mahon; Donald C. Lehman; George Manuselis (25. března 2014). Učebnice diagnostické mikrobiologie - elektronická kniha. Elsevier Health Sciences. str. 129. ISBN  978-0-323-29262-7.
  10. ^ A b Denise Harmening (2009). „Kapitola 30: Vyšetření tělesných tekutin: kvalitativní, kvantitativní a morfologická analýza“. Klinická hematologie a základy hemostázy (5. vydání). Společnost F. A. Davise. 720–757. ISBN  978-0-8036-1732-2.
  11. ^ Watson P (1966). "Skluzavka centrifuga: zařízení pro koncentraci buněk v suspenzi na mikroskopické sklíčko". J Lab Clin Med. 68 (3): 494–501. PMID  5922759.