Červený fluorescenční protein - Red fluorescent protein

Červený fluorescenční protein drFP583
Identifikátory
OrganismusDiscosoma sp.
Symbol?
UniProtQ9U6Y8

Červený fluorescenční protein (RFP) je fluorofor který při vzrušení fluoreskuje červeno-oranžově. Několik variant bylo vyvinuto pomocí řízená mutageneze.[1] Originál byl izolován od Discosoma a pojmenovaný DsRed. Nyní jsou k dispozici další, které fluoreskují oranžově, červeně a daleko červeně.[2]

RFP je přibližně 25,9 kDa. The excitační maximum je 558 nm a emisní maximum je 583 nm.[3]

První objevený fluorescenční protein, zelený fluorescenční protein (GFP), byl přizpůsoben k identifikaci a vývoji fluorescenčních markerů v jiných barvách. Varianty jako např žlutý fluorescenční protein (YFP) a azurová fluorescenční bílkovina (CFP) byly objeveny v roce Anthozoa.[4]

Problémy s fluorescenčními proteiny zahrnují dobu mezi syntézou proteinu a expresí fluorescence. DsRed má dobu zrání asi 24 hodin,[1] což ho může zneužít pro mnoho experimentů, které probíhají v kratším časovém rámci. Navíc DsRed existuje v tetramerní formě, která může ovlivnit funkci proteinů, ke kterým je připojen. Genetické inženýrství zlepšilo užitečnost RFP zvýšením rychlosti vývoje fluorescence a vytvořením monomerních variant.[3][4] Vylepšené varianty RFP zahrnují mFruits (mCherry, mOrange, mRaspberry), mKO, TagRFP, mKate, mRuby, FusionRed, mScarlet a DsRed-Express.[4][5]

Ukázalo se, že DsRed je vhodnější pro optické zobrazování přístupy než EGFP.[6]

Reference

  1. ^ A b Bevis, Brooke J .; Glick, Benjamin S. (2002). "Rychle zrající varianty červeného fluorescenčního proteinu Discosoma (DsRed)". Přírodní biotechnologie. 20 (1): 83–87. doi:10.1038 / nbt0102-83. ISSN  1546-1696. PMID  11753367.
  2. ^ Miyawaki, Atsushi; Shcherbakova, Daria M; Verkhusha, Vladislav V (říjen 2012). „Červené fluorescenční proteiny: tvorba chromoforů a buněčné aplikace“. Aktuální názor na strukturní biologii. 22 (5): 679–688. doi:10.1016 / j.sbi.2012.09.002. ISSN  0959-440X. PMC  3737244. PMID  23000031.
  3. ^ A b Remington, S. James (1. ledna 2002). "Vyjednávání nárazů do fluorescence". Přírodní biotechnologie. 20 (1): 28–29. doi:10.1038 / nbt0102-28. PMID  11753356.
  4. ^ A b C Piatkevich, Kiryl D .; Verkhusha, Vladislav V. (2011). „Průvodce červenými fluorescenčními proteiny a biosenzory pro průtokovou cytometrii“. Metody v buněčné biologii. 102: 431–461. doi:10.1016 / B978-0-12-374912-3.00017-1. ISBN  9780123749123. ISSN  0091-679X. PMC  3987785. PMID  21704849.
  5. ^ Bindels, Daphne S; Haarbosch, Lindsay (2017). „mScarlet: jasně monomerní červený fluorescenční protein pro buněčné zobrazování“. Přírodní metody. 14 (1): 53–56. doi:10,1038 / nmeth.4074. ISSN  1548-7105. PMID  27869816.
  6. ^ Böhm I, Gehrke S, Kleb B, Hungerbühler M, Müller R, Klose KJ, Alfke H (2019). „Monitorování nádorové zátěže in vivo optickým zobrazováním na xenograftovém SCID myším modelu: hodnocení dvou fluorescenčních proteinů GFP-superrodiny“. Acta Radiol. 60 (3): 315–326. doi:10.1177/0284185118780896. PMID  29890843.

externí odkazy