Izotachoforéza - Isotachophoresis
![]() | Tento článek obsahuje a seznam doporučení, související čtení nebo externí odkazy, ale její zdroje zůstávají nejasné, protože jí chybí vložené citace.Listopad 2017) (Zjistěte, jak a kdy odstranit tuto zprávu šablony) ( |
![]() | Tato sekce potřebuje další citace pro ověření.Říjen 2019) (Zjistěte, jak a kdy odstranit tuto zprávu šablony) ( |

Bílá: vedoucí elektrolyt; šedá: koncový elektrolyt; vylíhla: analytové

Izotachoforéza (ITP) je technika v analytická chemie používá se pro selektivní separaci a koncentraci iontové analytů. Je to forma elektroforéza; nabité analyty se dělí na základě iontová mobilita, množství, které říká, jak rychle ion migruje přes elektrické pole.
Přehled
V konvenčních ITP separacích se používá diskontinuální vyrovnávací systém. Vzorek je zaveden mezi zónu rychlého vedení elektrolyt (LE) a zóna pomalu končícího (nebo: koncového) elektrolytu (TE). LE a TE mají obvykle společné protiion, ale koionty (mající náboje se stejným znaménkem jako sledované analyty) se liší: LE je definován koionty s vysokými iontová mobilita, zatímco TE je definován koionty s nízkou iontovou mobilitou. Sledované analyty mají střední iontovou mobilitu. Výsledkem aplikace elektrického potenciálu je nízký elektrické pole v předním elektrolytu a vysoké elektrické pole v koncovém elektrolytu. Analytické ionty umístěné v zóně TE budou migrovat rychleji než okolní TE koionty, zatímco analytové ionty umístěné v LE budou migrovat pomaleji; výsledkem je, že analyty jsou zaměřeny na rozhraní LE / TE.
ITP je metoda vytěsňování: zaostřování iontů určitého druhu vytěsňuje jiné ionty. Pokud jsou přítomny v dostatečném množství, zaostřovací ionty analytu mohou vytlačit všechny elektrolytové koionty a dosáhnout plató koncentrace. Více analytů s dostatečně odlišnými iontovými mobilitami vytvoří několik plató zón. Ve skutečnosti jsou ITP separace v plató režimu snadno rozpoznatelné podle schodovitých profilů, přičemž každá plató schodiště představuje elektrolytovou nebo analytickou zónu mající (od LE do TE) zvyšující elektrická pole a snižující vodivost. Ve špičkovém režimu ITP není množství analytů dostatečné k dosažení plató koncentrací, tyto analyty se zaostří ostře Gaussian -jako vrcholy. Ve špičkovém režimu ITP se vrcholy analytů budou silně překrývat, pokud nebudou přidány takzvané spacerové sloučeniny se střední iontovou mobilitou mezi těmi analytů; takové spacerové sloučeniny jsou schopné oddělit sousední zóny analytu.[1]
Dokončené oddělení ITP je charakterizováno a dynamická rovnováha ve kterém všechny kionické zóny migrují se stejnými rychlostmi. Z tohoto jevu získal ITP svůj název: iso = stejný, tachos = rychlost, phoresis = migrace.
Izotachoforéza se přesně rovná kroku ustáleného stohování Diskontinuální elektroforéza.[2]
Přechodná ITP
Populární formou ITP je přechodná ITP (tITP). Zmírňuje omezení konvenčního ITP, že má omezenou separační kapacitu kvůli překrytí zóny analytu. V přechodném ITP jsou analyty nejprve koncentrovány ITP a poté mohou být odděleny základní úrovní zónová elektroforéza. Přechodné ITP se obvykle provádí rozpuštěním vzorku v TE a vložením zástrčky vzorku / TE mezi LE zóny - nebo naopak: zástrčka vzorku / LE může být také vložena mezi TE zóny. V prvním případě jsou analyty zaměřeny na přední rozhraní TE / LE. Mezitím se zadní část TE zástrčky rozpustí v LE, protože rychlejší ionty LE překonají ionty TE. Když jsou všechny ionty TE rozpuštěny, proces zaostřování přestane a analyt se oddělí podle principů zónové elektroforézy.
tITP je dnes rozšířenější než konvenční ITP, protože je snadno implementovatelný v kapilární elektroforéza (CE) separace jako předkoncentrační krok, díky čemuž je CE citlivější a zároveň těží ze svých silných separačních kapacit.
Reference
- ^ "Izotachoforéza | Národní diagnostika". www.nationaldiagnostics.com. Citováno 2019-10-17.
- ^ (1959–1964) viz Ornstein *
- Adam, Albert; Schots, Carlo (1980). Biochemické a biologické aplikace izotachoforézy. Elsevier Scientific Pub. Co. ISBN 0-444-41891-1.