Imunochirurgie - Immunosurgery

Imunochirurgie a blastocyst. Přidávají se protilátky, které se připojují k nejvzdálenější vrstvě buněk, kterou na blastocystě je trofoblast. Po odstranění veškerých nenavázaných protilátek a přidání doplněk, buňky trofoblastu jsou zničeny a zbývá pouze vnitřní buněčná hmota.[1]

Imunochirurgie je metoda selektivního odstranění externího buňka vrstva (trofoblast ) a blastocyst přes a cytotoxicita postup. Protokol pro imunochemii zahrnuje preinkubaci s antisérum, opláchněte to on je derivační médium k odstranění protilátek a jejich vystavení doplněk, a poté odstraněním lyžovaného trophoectodermu pipetou.[1] Tato technika se používá k izolaci vnitřní buněčná hmota blastocysty. Trophoectoderm buněčné spoje a těsný epitel "chránit" ICM před vazbou protilátek tím, že bude účinně zajišťovat nepropustnost buňky makromolekuly.[2][3]

Imunochirurgii lze použít k získání velkého množství čisté vnitřní buněčné hmoty za relativně krátkou dobu. Získaný ICM lze poté použít pro kmenová buňka výzkum a je lepší použít než dospělé nebo fetální kmenové buňky, protože ICM nebyl ovlivněn vnějšími faktory, jako je ruční půlení buňky.[4][5] Pokud je však strukturní integrita blastocysty narušena před experimentem, je ICM citlivý na imunologickou reakci. To znamená, že kvalita embryo použitý je nezbytný pro úspěch experimentu. Při použití doplňku pocházejícího ze zvířat navíc záleží na zdroji zvířat. Měly by být uchovávány v bez specifických patogenů prostředí ke zvýšení pravděpodobnosti, že zvíře nevytvořilo přirozené protilátky proti bakteriálním sacharidům přítomným v séru (které lze získat od jiného zvířete).[6]

Solter a Knowles vyvinuli první metodu imunochirurgie s prací z roku 1975 „Imunosurgery of Mouse Blastocyst“. Primárně ho používali pro předčasné studium embryonální vývoj.[4][7] I když je nejběžnější metodou izolace ICM imunochemie, různé experimenty tento proces vylepšily, například pomocí laserů (prováděných Tanakou, et al.) a mikromanipulátory (provádí Ding, et al.).[8][9] Tyto nové metody snižují riziko kontaminace živočišnými materiály v EU embryonální kmenové buňky odvozené z ICM, což může později způsobit komplikace, pokud budou embryonální kmenové buňky transplantovány člověku pro buněčná terapie.

Reference

  1. ^ A b Häggström, Mikael (2014). „Allogenní složka k překonání rejekce v mezidruhovém těhotenství“. WikiJournal of Medicine. 1 (1). doi:10.15347 / wjm / 2014.004.
  2. ^ Cruz, Y. P .; Treichel, R. S .; Harsay, E .; Chi, K. D. (01.01.1993). "Imunosurgie myších blastocyst s komerčním antisérem pro myší erytrocyty". In Vitro buněčná a vývojová biologie. Zvíře. 29A (8): 671–675. JSTOR  4294104.
  3. ^ Nichols, Jennifer; Boroviak, Thorsten (2015). "Maximalizace derivace klonálních embryonálních kmenových buněk inhibicí dráhy ERK". Protokoly embryonálních kmenových buněk. Metody v molekulární biologii. 1341. s. 1–13. doi:10.1007/7651_2015_253. ISBN  978-1-4939-2953-5. PMID  26026883.
  4. ^ A b Solter, D; Knowles, BB (1975). "Imunochirurgie myší blastocysty". Sborník Národní akademie věd Spojených států amerických. 72 (12): 5099–102. Bibcode:1975PNAS ... 72.5099S. doi:10.1073 / pnas.72.12.5099. PMC  388883. PMID  1108013.
  5. ^ Crook, Jeremy M .; Kravets, Lucy; Peura, Teija; Firpo, Meri T. (2017). "Odvození lidských embryonálních kmenových buněk". Bankovnictví kmenových buněk. Metody v molekulární biologii. 1590. str. 115–129. doi:10.1007/978-1-4939-6921-0_8. ISBN  978-1-4939-6919-7. PMID  28353265.
  6. ^ „Produkce chimér“, kapitola 11, v Manipulace s myší embryí, 3. vydání, autor: Andras Nagy, Marina Gertsenstein, Kristina Vintersten a Richard Behringer. Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, USA, 2003.
  7. ^ Amit, Michal (2013). "Zdroje a odvození lidských embryonálních kmenových buněk". Pluripotentní kmenové buňky. Metody v molekulární biologii. 997. s. 3–11. doi:10.1007/978-1-62703-348-0_1. ISBN  978-1-62703-347-3. PMID  23546743.
  8. ^ Tanaka, Noriko; Takeuchi, Takumi; Neri, Queenie V .; Parapety, Eric Scott; Palermo, Gianpiero D. (01.01.2006). „Disekce blastocyst asistovaná laserem a následná kultivace embryonálních kmenových buněk v systému kultivace bez séra / buněk: aplikace a předběžné výsledky na myším modelu“. Journal of Translational Medicine. 4: 20. doi:10.1186/1479-5876-4-20. ISSN  1479-5876. PMC  1479373. PMID  16681851.
  9. ^ Yan Ding, Yi Gan, Jing Bo Feng, Shao Hua Qi, Rui Ming Li, Dong Sheng Li. "Efektivní izolace vnitřní buněčné hmoty z blastocyst vylepšenou mikrochirurgickou technikou". Cell Research (2008) 18: s39. doi: 10,1038 / cr.2008,129; zveřejněno online 4. srpna 2008