Hydrolýza diacetátu fluoresceinu - Fluorescein diacetate hydrolysis
tento článek potřebuje další citace pro ověření.Leden 2007) (Zjistěte, jak a kdy odstranit tuto zprávu šablony) ( |
Fluorescein diacetát (FDA) hydrolýza testy lze použít k měření aktivita enzymu mikrobů ve vzorku. Vytvoří se jasně žlutozelená záře, která je nejsilnější, když je enzymatická aktivita největší. To lze kvantifikovat pomocí a spektrofluorometr.
Aplikace
Hydrolýza FDA se často používá k měření aktivity ve vzorcích půdy a kompostu; nemusí však poskytovat přesné údaje, pokud mikroby s fázemi s nižší aktivitou, jako jsou esterázy, štěpí fluorescein První.
Používá se také v kombinaci s propidium jodid (PI) do určit životaschopnost v eukaryotických buňkách. Živé buňky aktivně převádějí nefluorescenční FDA na zelenou fluorescenční sloučeninu fluorescein, což je známkou životaschopnosti; zatímco jádro buněk poškozených membránou bude fluoreskovat červeně, což je známka buněčné smrti. V současné době je barvení FDA / PI standardním hodnocením životaschopnosti ostrůvků lidského pankreatu s vhodností pro transplantaci, když je skóre životaschopnosti vyšší než 70%.
Příprava
Zásobní roztok FDA se připraví rozpuštěním 5 mg fluorescein diacetátu v 1 ml aceton,[1] a sacharóza mohou být přidány pro testování životaschopnosti živých buněk. FDA skvrna musí být udržována ve tmě při 4 ° C, jinak se zkazí.[2]
Reference
- ^ „ZKOUŠKA VIABILITY S FLUORESCEIN DIACETÁTEM (FDA)“. www.cabri.org.
- ^ Fontvieille, D.A.; Outaguerouine, A .; Thevenot, D.R. (1992). „Hydrolýza diacetátu fluoresceinu jako měřítko mikrobiální aktivity ve vodních systémech: aplikace na aktivované kaly“ (PDF). Environmentální technologie. 13 (6): 531–540. doi:10.1080/09593339209385181.
3. „Stanovení hydrolýzy diacetátu fluoresceinu“ http://www.eeescience.utoledo.edu/Faculty/Sigler/Von_Sigler/LEPR_Protocols_files/FDA%20assay.pdf
- Ministerstvo zemědělství USA (USDA): Stanovení hydrolytické aktivity fluorescein-diacetátu pro vzorky půdy
- Fluorescein-diacetát: potenciální biologický indikátor pro suché půdy
Tento biochemie článek je a pahýl. Wikipedii můžete pomoci pomocí rozšiřovat to. |