Spektrofluorometr - Spectrofluorometer - Wikipedia

A spektrofluorometr je přístroj, který využívá fluorescenční vlastnosti některých sloučenin za účelem poskytnutí informací o jejich koncentraci a chemickém prostředí ve vzorku. Je vybrána určitá excitační vlnová délka a emise je pozorována buď na jedné vlnové délce, nebo je prováděno skenování, které zaznamenává intenzitu versus vlnovou délku, nazývanou také emisní spektrum.^[1] Nástroj se používá v fluorescenční spektroskopie.

Úkon

Spektrofluorometry obecně používají vysoce intenzivní světelné zdroje k bombardování vzorku co největším počtem fotonů. To umožňuje maximálnímu počtu molekul být v excitovaném stavu v kterémkoli okamžiku. Světlo buď prochází filtrem s výběrem pevné vlnové délky, nebo a monochromátor, což umožňuje vybrat požadovanou vlnovou délku pro použití jako vzrušující světlo. Emise se sbírá kolmo na vyzařované světlo. Emise také prochází filtrem nebo monochromátorem, než je detekována a fotonásobič, fotodioda nebo nabíjené zařízení detektor. Signál může být zpracován jako digitální nebo analogový výstup.

Systémy se velmi liší a na výběr má vliv řada faktorů. První je poměr signálu k šumu. Existuje mnoho způsobů, jak se dívat na signál k šumu daného systému, ale přijímaným standardem je použití Raman signál vody. Citlivost nebo detekční limit je další specifikací, kterou je třeba vzít v úvahu, a to je, jak málo světla lze měřit. Standard by byl fluorescein v NaOH, typické hodnoty pro špičkový nástroj jsou ve femtomolárním rozsahu.

Pomocné komponenty

Tyto systémy přicházejí s mnoha možnostmi, včetně:

• Polarizátory
• Peltierovy regulátory teploty
• Kryostaty
• Cold Finger Dewars
• Pulzní lasery pro celoživotní měření
• LED diody po celou dobu životnosti
• Držáky filtrů
• Nastavitelná optika (velmi důležité)
• Pevné držáky vzorků
• Držáky diapozitivů
• Integrace sfér
• Detektory blízkého infračerveného záření
• Bilaterální štěrbiny
• Ruční štěrbiny
• Počítačem řízené štěrbiny
• Rychle se měnící monochromátory
• Filtrační kola

Reference