Elektroeluce - Electroelution

Zařízení pro analytickou gelovou elektroforézu s kontinuální elucí: elektroforetická komora, peristaltické čerpadlo, sběrač frakcí, recirkulační čerpadlo pufru a UV detektor (v chladničce), napájení a zapisovač (na stole). Srov. STRÁNKA QPNC.

Elektroeluce je metoda používaná k extrakci a nukleová kyselina nebo a protein vzorek z elektroforéza gel nanesením záporného proudu v rovině nejmenší dimenze gelu, natažením makromolekuly na povrch pro extrakci a následnou analýzu. Elektroblotování je založen na stejném principu.[1]

Extrakce DNA

Pomocí této metody lze fragmenty DNA získat z určité oblasti agarózových nebo polyakrylamidových gelů. Kousek gelu obsahující fragment je vyříznut (vyříznut z celého gelu) a umístěn do dialyzačního vaku s pufrem. Elektroforéza způsobí, že DNA migruje z gelu do pufru dialyzačního vaku. Fragmenty DNA se izolují z tohoto pufru a čistí se pomocí extrakce fenol / chloroformem a následně srážení ethanolem. Tato metoda je jednoduchá, rychlá a poskytuje vysoké výnosy (75%[1]) izolace fragmentů DNA z kousků gelu.

Reference

  1. ^ A b Zarzosa-Álvarez, Ana L .; et al. (2010). „Electroeluting DNA Fragments“. Žurnál vizualizovaných experimentů. 43: 2136. doi:10.3791/2136. PMC  3157863. PMID  20834225.