Douglas Prasher - Douglas Prasher - Wikipedia

Dr.

Douglas C. Prasher
narozenýSrpna 1951
Národnostamerický
Alma materOhio State University
Vědecká kariéra
PoleMolekulární biologie
OvlivněnoMartin Chalfie, Roger Y. Tsien

Douglas C. Prasher (narozený 08. 1951) je Američan molekulární biolog. Je známý svou prací klon a sekvence the geny pro fotoprotein ekvorin [1] a zelený fluorescenční protein (GFP) [2] a pro jeho návrh použít GFP jako sledovací molekulu.[3] Sdělil svou průkopnickou práci Martin Chalfie a Roger Y. Tsien, ale do roku 1991 nebyl sám schopen získat další financování výzkumu a opustil akademickou obec. Nakonec musel opustit vědu. Chalfie a Tsien byli oceněni v roce 2008 Nobelova cena za chemii za práci, kterou veřejně uznali, v zásadě vycházela z práce Douglase Prashera, a prostřednictvím svého úsilí i úsilí ostatních se Douglas Prasher v červnu 2010 vrátil k vědeckovýzkumné práci.

Kariéra

Prasher získal titul Ph.D. v biochemie z Ohio State University v roce 1979. Od roku 1979 do roku 1983 pracoval v genetika a biochemický výzkum na University of Georgia, kde identifikoval genovou sekvenci pro ekvorin.[1][4] Poté nastoupil na biologické oddělení Oceánografická instituce Woods Hole, Woods Hole, Massachusetts kde studoval bioluminiscence. V roce 1988 získal dvouletý grant ve výši 200 000 USD Americká rakovinová společnost klonovat gen pro zelený fluorescenční protein (GFP), protein, který dává Medúza jeho záře. Prasher uspěl v tomto projektu a později se podělil o svá zjištění Martin Chalfie a Roger Tsien poté, co s ním každý vědec komunikoval.[5][6] V následujících letech Prasher poskytl klon stovkám vědců.[Citace je zapotřebí ]

Uvádí, že Prasher měl potíže s dosažením fluorescence GFP u jiných druhů v rekombinantních studiích [7] jsou nepřesné, protože Prasher úspěšně spolupracoval se skupinou Chalfie na prokázání rekombinantní exprese v bakterii E-coli a hlístice C. elegans,[8] a později v závodě Arabidopsis thaliana.[9] Než Prasherovo financování ACS skončilo, izoloval částečné, ale téměř úplné gfp cDNA, s 965 bázemi z 1050 bází odpovídající mRNA.[2] Aby mohl Prasher izolovat klon cDNA plné délky, vyžadovalo by v následujícím (nefinancovaném) roce vybudování další knihovny cDNA, i když je třeba poznamenat, že tento částečný cDNA klon byl následně použit a shledán jako dostatečný pro úspěšnou heterologní expresi v E-coli, C. elegans [8] a A. thaliana.[9] Do této doby si Prasher nemohl dovolit věnovat omezené zdroje na studium exprese v E-coli.[Citace je zapotřebí ] Až oznámení Nobelovy ceny ukázalo, jak nešťastné to bylo. Chalfie a Tsien pokračovali ve svých úspěšných studiích výrazu. GFP následně našel uplatnění jako biochemický indikátor v oblastech, jako jsou fluorescenční studie genové exprese.

Prasher požádal o Národní institut zdraví za financování, ale byl odmítnut, a v době, kdy procházel kontrolou povýšení z asistenta na nezajištěného spolupracovníka, se rozhodl opustit akademickou obec.[Citace je zapotřebí ] Následně Prasher pracoval pro Inspekční služba pro zdraví zvířat a rostlin,[1] Americké ministerstvo zemědělství v jeho středisku pro ochranu rostlin Otis v Cape Cod, Massachusetts jako populační genetik, a později byl převezen do Laboratoře karantény a biotechnologie rostlinných plazmatických rostlin v Beltsville, Maryland. Poté, co se v lokalitě Beltsville zhoršily pracovní podmínky, odešel pracovat NASA subdodavatel Technologie AZ v Huntsville, Alabama, Práce na stávajícím projektu vývoje zařízení lab-on-a-chip pro monitorování prostředí kabiny a provádění lidské diagnostiky během dlouhodobých vesmírných letů.[Citace je zapotřebí ] O práci však přišel po 1,5 roce, kdy NASA reorganizovala a zrušila projekt.[10][11]

Dne 8. října 2008 byla udělena Nobelova cena za chemii za rok 2008 Osamu Shimomura, Chalfie a Tsien za práci na GFP.[12] Prasher nebyl zařazen mezi laureáty Nobelovy ceny, protože pouze tři jednotlivci mohou sdílet jednu Nobelovu cenu. Chalfie řekl o Prasherově příspěvku:

(Douglas Prasher) práce byla kritická a zásadní pro práci, kterou jsme dělali v naší laboratoři. Mohli snadno dát cenu Douglasovi a dalším dvěma a vynechali mě.[13]

Tsien také souhlasil, že by to nedokázali bez Prashera a „Doug Prasher měl velmi důležitou roli.“[14]

V telefonickém rozhovoru z 9. Října 2008 s Národní veřejné rádio (NPR) a 14. Října 2008 televizní rozhovor s Inside Edition „Prasher uvedl, že si nemohl najít práci ve vědě, došly mu celoživotní úspory a pracoval jako řidič kyvadlového autobusu u autorizovaného prodejce Toyota v Huntsville za 8,50 $ za hodinu.[6][11][13][14][15] Ve vysílání NPR jeden z jeho bývalých kolegů označil Prasherovu současnou situaci za „ohromující plýtvání talentem“.[6] Prasher prohlásil, že si přeje pokračovat ve vědecké kariéře, ale ne u medúz.[10] Rovněž vyjádřil potěšení z učení o udělení Nobelovy ceny Shimomurovi, Chalfie a Tsienovi:

Jsem za ně opravdu šťastný. Byl jsem opravdu překvapen, že konkrétní téma mělo tak velkou váhu.[10]

Chalfie a Tsien pozvali Prashera a jeho manželku Virginii Eckenrodeovou, aby se jako hosté a na jejich náklady zúčastnili obřadu Nobelovy ceny.[16] Všichni tři laureáti Chemistry za rok 2008 poděkovali Prasherovi ve svých projevech.[17]

V červnu 2010 se Prasher konečně mohl vrátit k vědě a do prosince 2011 pracoval pro Streamline Automation v Huntsville a poté od roku 2012 do roku 2015 v Tsienově laboratoři na Kalifornská univerzita v San Diegu.[18][19]

Publikace

  • Prasher, D., McCann, R.O., Cormier, M.J., Klonování a exprese cDNA kódující aequorin, bioluminiscenční protein vázající vápník. Biochem. Biophys. Res. Comm., 126, 1259-1268 (1985).
  • Richard, J.P., Prasher, D.C., Ives, D.H., Frey, P.A., Chiral [18O] fosforothioáty. Stereochemický průběh přenosu thiofosforylových skupin katalyzovaný nukleosidovou fosfotransferázou. J. Biol. Chem., 254(11), 4339-4341 (1979).
  • Prasher, D.C., Carr, M.C., Ives, D.H., Tsai, T.C., Frey, P.A., Nucleoside fosfotransferáza z ječmene. Charakterizace a důkazy kinetiky ping pongu zahrnující fosforylový enzym. J. Biol. Chem., 257(9), 4931-4939 (1982).
  • Prasher, D.C., Conarro, L., Kushner, S.R., Amplification and purification of exonuclease I from Escherichia coli K12. J. Biol. Chem., 258(10), 6340-6343 (1983)
  • Prasher, D.C., McCann, R.O., Longiaru, M., Cormier, M.J., Sekvenční srovnání komplementárních DNA kódujících izotypy aequorinu. Biochemie, 26(5), 1326-1332 (1987).
  • Phillips, G.J., Prasher, D.C., Kushner, S.R., Fyzikální a biochemická charakterizace klonovaných mutací sbcB a xonA z Escherichia coli K-12. J. Bacteriol., 170(5), 2089-2094 (1988).
  • Cormier, M. J., Prasher, D. C., Longiaru, M., McCann, R. O., Enzymologie a molekulární biologie Ca2 + aktivovaného fotoproteinu, aequorinu. Photochem. Fotobiol., 49(4), 509-512 (1989).
  • Prasher, D.C., O'Kane, D., Lee, J., Woodward, B., Gen proteinu lumazinu v Photobacterium phosphoreum je spojen s operonem lux. Nucleic Acids Res., 18(21), 6450 (1990).
  • O'Kane, D.J., Woodward, B., Lee, J., Prasher, D.C., vypůjčené proteiny v bakteriální bioluminiscenci. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88(4), 1100-1104 (1991).
  • O'Kane, D.J., Prasher, D.C., Evoluční počátky bakteriální bioluminiscence. Mol. Microbiol., 6(4), 443-449 (1992).
  • Prasher, D.C., Eckenrode, V.K., Ward, W.W., Prendergast F.G., Cormier, M.J., Primární struktura zeleného fluorescenčního proteinu Aequorea victoria. Gen, 111(2), 229-233 (1992).
  • Hannick, L.I., Prasher, D.C., Schultz, L.W., Deschamps, J.R., Ward, K.B., Příprava a počáteční charakterizace krystalů fotoproteinového aequorinu z Aequorea victoria. Proteiny, 15(1), 103-107 (1993).
  • Cody, C.W., Prasher, D.C., Westler, W.M., Prendergast, F.G., Ward, W.W., Chemická struktura hexapeptidového chromoforu zeleno-fluorescenčního proteinu Aequorea. Biochemie, 32(5), 1212-1218 (1993).
  • Chalfie, M., Tu, Y., Euskirchen, G., Ward, W.W., Prasher, D.C., zelený fluorescenční protein jako marker genové exprese. Věda, 263(5148), 802-805 (1994).
  • Heim, R., Prasher, D.C., Tsien, R.Y., Wavelength mutations and posttranslational autoxidation of green fluorescent protein. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 91(26), 12501-12504 (1994).
  • Prasher, D.C., pomocí GFP viděl světlo. Trendy Genet., 11(8), 320-323 (1995).
  • Haseloff, J., Siemering, K.R., Prasher, D.C., Hodge, S., Odstranění kryptického intronu a subcelulární lokalizace zeleného fluorescenčního proteinu jsou nutné k jasnému označení transgenních rostlin Arabidopsis. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 94(6), 2122-2127 (1997).
  • Bernon, G., Schander, C., Prasher, D., Robinson, D., Průzkum a stav suchozemských slimáků v Severní Americe Americká malakologická společnost Abstrakty 2000, 41 (2000).
  • Barr, NB, Cook, A., Elder, P., Molongoski, J., Prasher, D., Robinson D.G. Aplikace čárového kódu DNA pomocí genu 16S rRNA k diagnostice škůdců druhů Arion v USA. "J. Moll. Stud. 75: 187-191 (2009).

Viz také

Reference

  1. ^ A b Prasher, D C; R McCann; M Longiaru; M J. Cormier (10.03.1987). "Porovnání sekvencí komplementárních DNA kódujících izekopy aekvorinu". Biochemie. 26 (5): 1326–1332. doi:10.1021 / bi00379a019. ISSN  0006-2960. PMID  2882777.
  2. ^ A b Prasher, D C; V K Eckenrode; W W Ward; F G Prendergast; M J. Cormier (1992-02-15). "Primární struktura zeleno-fluorescenčního proteinu Aequorea victoria". Gen. 111 (2): 229–233. doi:10.1016 / 0378-1119 (92) 90691-H. ISSN  0378-1119. PMID  1347277.
  3. ^ Prasher, D C (srpen 1995). "Použití GFP k vidění světla". Trendy v genetice. 11 (8): 320–323. doi:10.1016 / s0168-9525 (00) 89090-3. ISSN  0168-9525. PMID  8585130.
  4. ^ Matthew Herper (08.10.2008). „Zářivý průlom společnosti Biotech získává Nobelovu cenu“. Forbes. Citováno 2008-10-13.
  5. ^ Kenneth Chang (09.10.2008). „Tři chemici vyhráli Nobelovu cenu“. New York Times. Citováno 2008-10-11.
  6. ^ A b C Dan Charles (09.10.2008). „Glowing Gene's Discoverer vynechal Nobelovu cenu“. Ranní vydání (Národní veřejné rádio [NPR]). Citováno 2008-10-05.
  7. ^ Tina Hesman Saey (2008-10-25). „Nobelova cena za chemii chválí nalezení a použití zeleného fluorescenčního proteinu“. Vědecké zprávy. Citováno 2008-10-11.
  8. ^ A b Chalfie, M; Y Tu; G Euskirchen; W W Ward; D C Prasher (11.02.1994). "Zelený fluorescenční protein jako marker pro genovou expresi". Věda. 263 (5148): 802–805. doi:10.1126 / science.8303295. ISSN  0036-8075. PMID  8303295.
  9. ^ A b Haseloff, J; K R Siemering; D C Prasher; S Hodge (1997-03-18). „K jasnému označení transgenních rostlin Arabidopsis je nutné odstranění kryptického intronu a subcelulární lokalizace zeleného fluorescenčního proteinu.“. Sborník Národní akademie věd Spojených států amerických. 94 (6): 2122–2127. doi:10.1073 / pnas.94.6.2122. ISSN  0027-8424. PMC  20051. PMID  9122158.
  10. ^ A b C Steve Doyle (10.10.2008). „Místní biochemik měl Nobelovu ruku“. Huntsville Times. Archivovány od originál dne 09.06.2011. Citováno 2008-10-11.
  11. ^ A b „Práce řidiče dodávky v mši. Pomohla nositelům Nobelovy ceny“. Boston Globe. 11. 10. 2008. Archivovány od originál dne 14. října 2008. Citováno 2014-03-17.
  12. ^ „Nobelova cena za chemii 2008“ (Tisková zpráva). Královská švédská akademie věd. 8. října 2008. Citováno 2008-10-11.
  13. ^ A b Aaron Gouveia (11.10.2008). „Řidič raketoplánu se odráží na Nobelově urážce“. Cape Cod Times. Archivovány od originál dne 11.10.2008. Citováno 2008-10-11.
  14. ^ A b Jim Moret (2008-10-14). „Génius za volantem - proč geniální vědec řídí autobus?“. Inside Edition. Archivovány od originál dne 2012-06-20. Citováno 2017-10-07.
  15. ^ Philip Sherwell (11.10.2008). „Vědec, protein medúzy a Nobelova cena, která utekla“. The Daily Telegraph. Citováno 2008-10-11.
  16. ^ Steve Doyle (04.12.2008). „Řidič dodávky se zúčastní obřadu Nobelovy ceny“. Huntsville Times. Archivovány od originál dne 09.06.2011. Citováno 2008-12-11.
  17. ^ Lee Roop (18. 12. 2008). "'Kouzelný výlet Nobelovy ceny může vést k novým příležitostem “. Huntsville Times. Archivovány od originál dne 09.06.2011. Citováno 2009-02-04.
  18. ^ Profil Douglase Prashera
  19. ^ Roger Tsien nekrolog

externí odkazy