Diagnostická elektronová mikroskopie - Diagnostic electron microscopy

The transmisní elektronový mikroskop (TEM) se používá jako důležitý diagnostický nástroj k screeningu lidských tkání při vysokém zvětšení (na ultrastrukturální úrovni), často ve spojení s jinými metodami, zejména světelná mikroskopie a imunofluorescenční techniky. TEM byl k tomuto účelu poprvé značně používán v 80. letech, zejména k identifikaci markerů diferenciace buněk k identifikaci nádorů a v nemoc ledvin. Pro diagnostiku nádoru se nyní místo TEM obecně používají techniky imunoznačení, ale tato technika si zachovává klíčovou roli v diagnostice onemocnění ledvin a řady dalších stavů.

Konkrétně by měl být TEM použit pro diagnostické účely, když: (1) poskytuje užitečné (doplňkové) informace v kontextu pečlivě zváženého diferenciální diagnostika; (2) poskytuje „vylepšenou“ diagnózu, která vede k lepším léčebným strategiím a; (3) je čas & nákladově efektivní s ohledem na alternativní techniky. Pro diagnostické účely se pevné tkáně připravují pro TEM stejným způsobem jako jiné biologické tkáně, fixují se v glutaraldehydu a oxid osmičelý pak dehydratovaný a vložený do epoxidová pryskyřice. Blok epoxidové pryskyřice je oříznut a cílová tkáň je vybrána pomocí a světelný mikroskop prohlížením semithinových řezů obarvených toluidinovou modří. Blok je poté retrimován a specifická oblast pro pozorování je ultratenká, nejlépe pomocí diamantového nože. Ultratenké řezy se shromáždí na 3mm měděných (mřížkových) mřížkách a obarví se uranyl-acetát a citrát olovnatý, aby byl obsah tkáňového elektronu hustý (a tedy viditelný v elektronový mikroskop ).[1]

Reference

[2]

  1. ^ Woods AE, Stirling JW. 2008. Elektronová mikroskopie. In, Theory and Practice of Histologické techniky. Eds, Bancroft JD a Gamble M. 6. vydání. Churchill Livingstone: strany 601-640
  2. ^ Stirling, John; Curry, Alan; Eyden, Brian (2013). Diagnostická elektronová mikroskopie. Praktický průvodce interpretací a technikou (1. vyd.). Chichester, Velká Británie: John Wiley & Sons Ltd. ISBN  978-1-119-97399-7.

externí odkazy