Získání antigenu - Antigen retrieval
![]() | Tento článek má několik problémů. Prosím pomozte vylepši to nebo diskutovat o těchto otázkách na internetu diskusní stránka. (Zjistěte, jak a kdy tyto zprávy ze šablony odebrat) (Zjistěte, jak a kdy odstranit tuto zprávu šablony)
|
Tkáně, které byly zachovány s formaldehyd, vysoce reaktivní sloučenina, obsahuje řadu chemických modifikací, které mohou snížit detekovatelnost proteinů v biomedicínských postupech, jako je imunohistochemie. Získání antigenu je přístup ke snížení nebo eliminaci těchto chemických modifikací. Dvě primární metody antigen vyhledávání jsou tepelně zprostředkovány epitop načítání (HIER) a proteolytický vyvolání epitopu (PIER).
Získání epitopu indukovaného proteázou (PIER)
V PIER byly použity enzymy včetně Proteinázy K, Trypsinu a Pepsinu k obnovení vazby protilátky na jeho epitop. Údajným mechanismem účinku je štěpení peptidů maskujících epitop a obnovujících antigenicitu.
Nevýhody PIER zahrnují nízkou úspěšnost pro obnovení imunoreaktivity a potenciální destrukci morfologie tkáně a požadovaného antigenu.
Získání epitopu vyvolaného teplem (HIER)
Předpokládá se, že HIER zvrátí některé příčné vazby a umožňuje obnovení sekundární terciární struktury epitopu.[1] Protokol vyžaduje optimalizaci pro každou tkáň, fixační metodu a antigen, které mají být studovány.
Obecně platí, že HIER má mnohem vyšší úspěšnost než PIER. HIER lze provádět pomocí mikrovlnných trub, tlakových hrnců, parníků na zeleninu, autoklávů nebo vodních lázní. HIER je citlivý na čas, teplotu, pufr a pH.
Získání epitopu při pokojové teplotě (RTER)
RTER zahrnuje reverzi zesíťování pomocí kyselin, jako je kyselina chlorovodíková (pH 1) nebo kyselina mravenčí (pH 2).
Reference
- ^ „Metody získávání antigenu“. Systémy výzkumu a vývoje. Citováno 20. března 2019.
![]() | Tento lékařský článek je a pahýl. Wikipedii můžete pomoci pomocí rozšiřovat to. |