Postupný proces rozšíření - Staggered extension process
The střídavý proces rozšíření (označovaný také jako StEP) je běžná technika používaná v biotechnologie a molekulární biologie k vytvoření nových, mutovaných genů s kvalitami jednoho nebo více počátečních genů.
Samotná technika je upravená polymerázová řetězová reakce s velmi krátkými (přibližně 10 sekundovými) cykly. V těchto cyklech je prodloužení DNA velmi rychlé (pouze několik stovek párů bází) a syntetizované fragmenty hybridizují s komplementárními fragmenty jiných řetězců. Tímto způsobem jsou zamíchány mutace počátečních genů a nakonec jsou amplifikovány geny s novými kombinacemi mutací.[1][2]
Bylo zjištěno, že protokol StEP je užitečný jako metoda řízená evoluce za objev enzymů užitečných pro průmysl.[3]
Reference
- ^ Zhao, Huimin; Dárce, Lori; Shao, Zhixin; Affholter, Joseph A .; Arnold, Frances H. (1998). "Molekulární evoluce postupným roztažením (StEP) in vitro rekombinace". Přírodní biotechnologie. 16 (3): 258–261. doi:10.1038 / nbt0398-258.
- ^ Zhao, Huimin; Zha, Wenjuan (1. listopadu 2006). „In vitro„ sexuální “evoluce prostřednictvím odstupňovaného procesu rozšíření založeného na PCR (StEP)“. Přírodní protokoly. 1 (4): 1865–1871. doi:10.1038 / nprot.2006.309.
- ^ Marrs, Barry; Delagrave, Simon; Murphy, Dennis (29. července 1999). „Nové přístupy k objevování průmyslových enzymů“. Současný názor v mikrobiologii. 2 (3): 241–245. doi:10.1016 / S1369-5274 (99) 80042-3.