SPINE (molekulární biologie) - SPINE (molecular biology) - Wikipedia
PÁTEŘ znamená experiment interakce strep-protein. SPINE je mocný nástroj k detekci interakce protein-protein in vivo. Protein návnady musí být exprimován a Strep-tag za podmínek, kdy jsou potenciální interakční partneři pravděpodobně přítomni v buňkách. Přidání formaldehyd spojuje protein návnady s jeho potenciálními interakčními partnery. Návnadový protein spolu s jeho potenciálními interakčními partnery lze poté izolovat pomocí kolony se streptaktinem sepharosou. Zesíťování mezi proteinem návnady a potenciálním interakčním partnerem lze štěpit zahřátím vzorků v Laemmliho pufru. Nakonec lze společně vyčištěného interakčního partnera oddělit pomocí SDS PAGE a identifikovat hmotnostní spektrometrií.
Reference
- Herzberg C, Weidinger LA, Dörrbecker B, Hübner S, Stülke J a Commichau FM (2007). Páteř: Metoda pro rychlou detekci a analýzu interakcí protein – protein in vivo. Proteomics 7 (22): 4032-4035
- Müller VS, Jungblut PR, Meyer TF, Hunke S (2011). Membrane-SPINE: vylepšená metoda k identifikaci partnerů interakce protein-protein membránových proteinů in vivo. Proteomics 11 (10): 2124-2128
- Müller VS, Tschauner K, Hunke S (2013). Membrane-SPINE: biochemický nástroj k identifikaci protein-proteinových interakcí membránových proteinů in vivo. J Vis Exp 7 (81): e50810
![]() | Tento molekulární nebo buněčná biologie článek je a pahýl. Wikipedii můžete pomoci pomocí rozšiřovat to. |