SPINE (molekulární biologie) - SPINE (molecular biology) - Wikipedia

PÁTEŘ znamená experiment interakce strep-protein. SPINE je mocný nástroj k detekci interakce protein-protein in vivo. Protein návnady musí být exprimován a Strep-tag za podmínek, kdy jsou potenciální interakční partneři pravděpodobně přítomni v buňkách. Přidání formaldehyd spojuje protein návnady s jeho potenciálními interakčními partnery. Návnadový protein spolu s jeho potenciálními interakčními partnery lze poté izolovat pomocí kolony se streptaktinem sepharosou. Zesíťování mezi proteinem návnady a potenciálním interakčním partnerem lze štěpit zahřátím vzorků v Laemmliho pufru. Nakonec lze společně vyčištěného interakčního partnera oddělit pomocí SDS PAGE a identifikovat hmotnostní spektrometrií.


Reference