Zmrazené tkáňové pole - Frozen tissue array

Zmrazený blok tkáňového pole.

Zmrazené tkáňové pole sestává z čerstvých zmrazených tkání, ve kterých je sestaveno až 50 samostatných jader tkání uspořádaných způsobem, který umožňuje současné histologická analýza.

Dějiny

Parafín tkáňové pole bylo vyvinuto během pozdních let v 80. letech; toto pole může vědcům pomoci analyzovat vysokou propustnost gen a protein výrazy ve více vzorky tkáně, zejména analyzujte různé hladiny bílkovin pomocí protilátky podle imunohistochemie. Různá pole parafínových tkání jsou nyní komerčně dostupná od mnoha biotechnologických společností. Většinu polí lze snadno vyrobit pomocí mikrořadicího nástroje (Beecher Instruments Inc.). Tkáně zalité v parafinu však mají svá omezení. Pufrované roztoky formalinu zesíťují proteiny a nukleové kyseliny, pokud se používají k fixaci tkání. DNA, RNA a protein v tkáních jsou během fixace poškozeny na různých úrovních. Proto mnoho vědeckých experimentálních výsledků z formalinu fixovaných tkání není spolehlivých. Protože zmrazené tkáňové řezy neprocházejí žádnými fixačními postupy, a proto si DNA, RNA a bílkoviny ve zmrazených tkáních zachovávají své přirozené vlastnosti mnohem více než v tkáních zalitých v parafinu. Vědci, kteří vyvíjejí protilátky pro terapeutické účely, potřebují k získání souhlasu FDA své předběžné výsledky ze zmrazených tkání. Z tohoto důvodu by zmrazené tkáňové pole mělo být pro tento účel nejlepším nástrojem pro analýzu s vysokou propustností.

Postup

Zmrazená jádra tkáně s průměrem 2 mm z oblastí zájmu jsou odstraněna ze zmrazených tkáňových OCT bloků při různé teplotě zmrazení, protože každý typ tkáně má své vlastní teplotní preference ve zmrazeném stádiu. Poté jsou všechna zmrazená jádra tkáně vložena do zmrazeného bloku příjemce OCT v přesně rozmístěném maticovém vzoru. Řezy z tohoto bloku jsou řezány pomocí kryostatu, namontovány na mikroskopické sklíčko a poté analyzovány jakoukoli metodou standardní histologické analýzy. Každý blok pole zmrazených tkání lze rozdělit na 100–500 sekcí, které lze podrobit nezávislým testům. Testy běžně používané v poli zmrazených tkání zahrnují imunohistochemii a hybridizaci in situ.

Viz také

Reference

  • Battifora H: Multitumorový (klobásový) tkáňový blok: nová metoda pro testování imunohistochemických protilátek. Lab Invest 1986, 55: 244-248.
  • Battifora H, Mehta P: Šachovnicový tkáňový blok. Vylepšený multitissue kontrolní blok. Lab Invest 1990, 63: 722-724.
  • Kononen J, Bubendorf L, Kallioniemi A, Barlund M, Schraml P, Leighton S, Torhorst J, Mihatsch MJ, Sauter G, Kallioniemi OP: Tkáňové mikročipy pro vysoce výkonné molekulární profilování vzorků nádorů. Nat Med 1998, 4: 844-847.
  • Schoenberg Fejzo M, Slamon DJ: Technologie mikročipů zmrazené nádorové tkáně pro analýzu nádorové RNA, DNA a proteinů. American Journal of Pathology 2001, 159 (5): 1645-50.
  • Schoenberg Fejzo M, Slamon DJ. Tkáňové mikročipy ze zmrazených tkání - technika OCT. Methods Mol Biol. 2010, 664: 73-80.
  • "Frozen Tissue Array ". BioChain Institute Inc.. Citováno 2017-06-24.