Fluorochromasia - Fluorochromasia

Fluorochromasia (Řecky flōr χρῶμα - výslovnost: flｕ̇r · ō · krə′mā · zhə), je buněčný jev charakterizovaný okamžitým výskytem jasně zelené fluorescence uvnitř životaschopných buněk po expozici určitým membránovým permeabilit fluorogenní substráty jako např fluorescein diacetát, fluorescein dibutyrát a fluorescein dipropionát.[1]Tento jev je široce používán k měření buněčné životaschopnosti mnoha různých druhů, včetně zvířat, rostlin a mikroorganismů. Kromě toho byla fluorochromasie pozorována v orgánech, embryích a zebrafish. Fluorochromasia má mnoho aplikací, včetně testování histokompatibility, měření cytotoxických protilátek, in vitro testování chemo senzitivity nádorů a fluorochromové mezibuněčné translokace. Aplikuje se na rostliny,[2] bakterie,[3] savčí oocyty,[4] myší embrya,[5] a lidské nádorové buňky.[6]

Dějiny

V roce 1966 Rotman a Papermaster náhodně objevili fluorochromasii při studiu používání intracelulárních enzymů fluorogenní substráty. Studovali jeho způsob působení a představili molekulární model, ve kterém intracelulární retence fluoresceinu závisí na integritě buněčné membrány. Nepolární molekuly fluoresceinesterů, jako je fluorescein diacetát, snadno vstupují do buňky a jsou hydrolyzovány nespecifickými esterázami produkujícími fluorescein jako polární sloučeninu. V životaschopných buňkách není intracelulární fluorescein schopen snadno projít intaktní membránou (tj. Pomalu prosakuje) a hromadí se v cytoplazmě buňky. Jejich model je znázorněn na obrázku 1.

Schéma molekulárního mechanismu fluorochromasie

Reference

  1. ^ Rotman, Boris a Ben W. Papermaster. „Membránové vlastnosti živých savčích buněk studované enzymatickou hydrolýzou fluorogenních esterů.“ Sborník národní akademie věd 55.1 (1966): 134-141.
  2. ^ Widholm, Jack M. „Použití fluorescein diacetátu a fenosafraninu pro stanovení životaschopnosti kultivovaných rostlinných buněk.“ Technologie barvení 47,4 (1972): 189-194.
  3. ^ Chrzanowski, Thomas H. a kol. „Použitelnost metody fluorescein diacetátu pro detekci aktivních bakterií ve sladké vodě.“ Microbial Ecology 10.2 (1984): 179-185.
  4. ^ J. Boender (1984) Fluorescein ‐ diacetát, barvivo fluorescenční barvicí sloučeniny pro rychlé vyhodnocení životaschopnosti savčích oocytů před studiemi in vitro, Veterinary Quarterly, 6, 236-240
  5. ^ Linda R. Mohr a A. O. Trounson Použití fluorescein diacetátu k hodnocení životaschopnosti embryí u myší. J Reprod Fertil 1, 1980 189-196.
  6. ^ Eugene A. Woltering, Test chemosenzitivity nádoru Vyvíjející se technika. Lab Medicine 21, 82-84, 1990.