Ficoll - Ficoll

Složky Ficoll

Ficoll je neutrální, vysoce rozvětvený, vysoce hmotný, hydrofilní polysacharid který se snadno rozpustí v vodný řešení. Poloměry Ficoll se pohybují od 2 do 7 nm. Připravuje se reakcí polysacharidu s epichlorhydrin. Ficoll je registrovaná ochranná známka vlastněná společnostmi GE Healthcare.[1]

Ficoll je součástí Ficoll-Paque, který se používá v biologie laboratoře oddělit krev k jeho součástem (erytrocyty, leukocyty atd.). Ficoll-Paque se obvykle umístí na dno kónické trubice a krev se poté pomalu navrství nad Ficoll-Paque. Poté, co byl odstředěn, v kuželovité trubici budou shora dolů vidět následující vrstvy: plazma a další složky, vrstva mononukleárních buněk zvaná buffy kabát (PBMC / MNC), Ficoll-Paque a erytrocyty a granulocyty které by měly být přítomny ve formě pelet. Toto oddělení umožňuje snadnou sklizeň PBMC. Všimněte si, že některé červená krvinka ve vrstvě PBMC nebo Ficoll-Paque může dojít k zachycení (přítomnost erytrocytů a granulocytů). Hlavní, důležitý srážení krve se někdy může vyskytnout ve vrstvě PBMC. Ethylen diamin tetra-acetát (EDTA ) a heparin se běžně používají ve spojení s Ficoll-Paque ™ k prevenci srážení a používají se jako oddělovač mononukleárních buněk.

Najednou, poměrně brzy ve výzkumu léčby diabetu transplantací, byl Ficoll použit ve snaze oddělit se Langerhansových ostrůvků z lidské pankreatické tkáně štěpené enzymy (kolagenázou). Teorie spočívala v tom, že oddělené ostrůvky lze poté použít k transplantaci pacientům s cukrovka 1. typu. V praxi vedlo použití Ficoll k potížím se získáním dostatečně čisté přípravy ostrůvků s dostatečným zotavením ostrůvků z původní tkáně pro bezpečnou a účinnou transplantaci ostrůvků u lidí.

Protože vrstvení Ficoll-Paque je velmi pomalý proces, byla vyvinuta zařízení, která pomáhají v časově nejnáročnějším kroku, překrytí. Jedním z takových produktů je SepMate-50,[2] specializovaná trubice obsahující porézní vložku, která tvoří fyzickou bariéru mezi Ficoll-Paque a vzorkem krve. To umožňuje, aby byl vzorek krve rychle pipetován na inzert, čímž se zabrání nutnosti jeho překrytí přímo na Ficoll-Paque. Vložka SepMate také zkracuje dobu trvání odstřeďovacího kroku a po odstředění lze vrchní vrstvu obsahující plazmu a PBMC nalít do nové zkumavky.[3] Mezi další zařízení patří kolona obsahující porézní vysokou hustotu polyethylen bariéra nebo „frita“. Tyto produkty umožňují mnohem rychlejší navrstvení krve bez míchání polysacharidu a krve. Příkladem takového produktu je „Accuspin System Histopaque-1077“ prodávaný společností Sigma Aldrich. Cena tohoto produktu je výrazně vyšší než u základních produktů Ficoll a Ficoll-Paque. Je také možné, aby byl do systému zahrnut oddělovací systém Ficoll-Paque Vacutainer slouží k odběru krve. Takové Vacutainery zvyšují pohodlí a bezpečnost při odběru krevních produktů, ale stojí 50krát více než základní Vacutainer.

Viz také

Poznámky

  1. ^ "Ficoll". Úřad pro patenty a ochranné známky Spojených států. Citováno 2007-02-15.
  2. ^ SepMate ™ -50
  3. ^ http://www.sepmate.com. Přístupné 25. 9. 2012.

externí odkazy