Adsorpce s rozšířeným ložem - Expanded bed adsorption

Adsorpce s rozšířeným ložem (EBA) je přípravný chromatografické technika, která umožňuje zpracování viskózních a částicových kapalin.

Zásada

The protein závazné principy v EBA jsou stejné jako v klasických sloupcová chromatografie a obyčejný iontová výměna, hydrofobní interakce a afinitní chromatografie mohou být použity ligandy.[1] Po dokončení adsorpčního kroku se fluidní vrstva promyje, aby se vypláchly všechny zbývající částice. Eluce adsorbovaných proteinů bylo běžně prováděno s eluent průtok v opačném směru; tj. jako konvenční balené lože, za účelem regenerace adsorbované látky rozpuštěné látky v menším objemu eluentu. Byla však vyvinuta nová generace EBA kolon, které během této fáze udržují lože v expandovaném stavu a produkují vysoce čisté, vysoké výtěžky např. MAbs [monoklonální protilátky] v ještě menších objemech eluentu. Trvání procesu ve výrobním měřítku bylo také značně zkráceno (v některých případech méně než 7 hodin).

EBA lze považovat za kombinaci kroků „Odstranění nerozpustných látek“ a „Izolace“ ve 4 krocích následné zpracování heuristický. Hlavními omezeními spojenými s technologií EBA jsou interakce a agregace biomasy na adsorbentu během zpracování.[2]

Kde klasický sloup chromatografie používá pevnou fázi vyrobenou z přeplněného lože, EBA používá částice v a fluidní stav, ideálně expandovaný faktorem 2. Adsorpce s expandovaným ložem se však liší od chromatografie s fluidním ložem v podstatě dvěma způsoby: jeden, pryskyřice EBA obsahuje částice různé velikosti a hustoty, což má za následek gradient velikosti částic při expandování; a dva, když je postel v roztaženém stavu, vytvoří se místní smyčky. Částice, jako jsou celé buňky nebo zbytky buněk, které by ucpávaly naplněný sloupec lože, snadno procházejí fluidním ložem.[3] EBA lze proto použít na surové kultivační bujóny nebo kaše rozbitých buněk, čímž obejde počáteční kroky čištění, jako je centrifugace a filtrace, což je povinné, jsou-li použity zabalené postele. Ve starších konstrukcích sloupů EBA je rychlost přítoku udržována dostatečně nízká, aby tuhá náplň zůstala stratifikovaná a ne fluidizovala úplně. Proto lze EBA modelovat jako čelní adsorpce spíše než v dobře promíchaném adsorbéru s kontinuálním tokem.

Reference

  1. ^ Vennapusa, R. R .; Binner, S .; Cabrera, R .; Fernandez-Lahore, M. (2008). "Povrchová energetika pro hodnocení mikrobiální adheze na adsorbenty fluidní chromatografie". Inženýrství v biologických vědách. 8 (5): 530. doi:10.1002 / elsc.200800027. S2CID  84105652.
  2. ^ Vennapusa, R .; Hunegnaw, S .; Cabrera, R .; Fernández-Lahore, M. (2008). „Hodnocení interakce adsorbent – ​​biomasa během adsorpce s expandovaným ložem na iontoměničích s využitím povrchové energie“. Journal of Chromatography A. 1181 (1–2): 9–20. doi:10.1016 / j.chroma.2007.11.078. PMID  18199439.
  3. ^ Hjorth, R. (1997). „Adsorpce v expandovaném loži v průmyslovém bioprocesu: nejnovější vývoj“. Trendy v biotechnologii. 15 (6): 230–235. doi:10.1016 / S0167-7799 (97) 01045-7. PMID  9183866.

externí odkazy